第五章尿液检验临床基础检验学

1、第五章尿液检验临床基础检验学l尿糖一般是指尿液中的葡萄糖。尿糖一般是指尿液中的葡萄糖。l正常人尿液中有微量葡萄糖，定性试验正常人尿液中有微量葡萄糖，定性试验为阴性。为阴性。l糖尿：血糖超过肾糖阈（），糖尿：血糖超过肾糖阈（）， 或肾小管重吸收能力下降，或肾小管重吸收能力下降， 尿糖阳性。尿糖阳性。l检查糖尿病的代谢情况。检查糖尿病的代谢情况。l检测与评价糖尿病的治疗。检测与评价糖尿病的治疗。l1班氏定性法班氏定性法l2干化学法干化学法 l3薄层层析法薄层层析法l稳定稳定l缺乏特异性缺乏特异性l葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法l敏感、半定量敏感、半定量l还原物质可致假阴性还原物质可致假阴性阳性标准葡

2、萄糖含量(mmol/L)班氏法氧化酶试带法5.51.675.6-11.2 1.67-2.7828 5.0-1428-56 14-2857-112 28-56112 56-112l空腹及餐后空腹及餐后2h尿尿l阴性阴性l1.标本留取标本留取l2.容器清洁容器清洁l3.及时送检及时送检l4.干扰因素及处理干扰因素及处理l5.判断结果判断结果l6.过筛指标过筛指标lVit C ：班氏，试带：班氏，试带l高比重尿及高酮体尿高比重尿及高酮体尿l蛋白尿蛋白尿l其他还原糖类其他还原糖类l1.血糖增高性糖尿：糖尿病血糖增高性糖尿：糖尿病 其他内分泌异常其他内分泌异常 应激状态应激状态 饮食因素饮食因素l2.血

3、糖正常性糖尿：肾性糖尿血糖正常性糖尿：肾性糖尿l3.其他糖尿其他糖尿l酮体（酮体（ketone bodies）是脂肪氧化代谢）是脂肪氧化代谢过程中的中间代谢产物，包括乙酰乙酸、过程中的中间代谢产物，包括乙酰乙酸、-羟丁酸、丙酮。在健康人中，少量的羟丁酸、丙酮。在健康人中，少量的酮体以酮体以78%的的-羟丁酸、羟丁酸、20%的乙酰乙的乙酰乙酸和酸和2%的丙酮的比例存在于血液中。的丙酮的比例存在于血液中。l当肝脏内酮体产生的速度超过肝外组织当肝脏内酮体产生的速度超过肝外组织利用的速度时，血中酮体增加，可出现利用的速度时，血中酮体增加，可出现酮血症（酮血症（ketonemia），过多的酮体从尿），过

4、多的酮体从尿中排出称酮尿（中排出称酮尿（ketonuria）。）。l1朗格（朗格（Lange）法）法l2改良改良Rothera（粉剂）法（粉剂）法l3干化学法干化学法 l4其他其他l乙酰乙酸或丙酮在碱性条件下与亚硝基乙酰乙酸或丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠生成紫红色化合物。铁氢化钠生成紫红色化合物。 l对对-羟丁酸不反应。羟丁酸不反应。l易受其他物质的干扰。易受其他物质的干扰。l与乙酰乙酸反应与乙酰乙酸反应l与乙酰乙酸和丙酮都起反应与乙酰乙酸和丙酮都起反应l敏感、方便、快速敏感、方便、快速l-羟丁酸定性试验羟丁酸定性试验l对酮血症的早期诊断意义较大对酮血症的早期诊断意义较大l较繁琐较繁琐l阴

5、性阴性l1.尿液新鲜尿液新鲜l2.正确分析结果正确分析结果l尿液酮体检验主要用于糖代谢障碍和脂尿液酮体检验主要用于糖代谢障碍和脂肪不完全氧化的判断与评价。肪不完全氧化的判断与评价。l1糖尿病酮症酸中毒糖尿病酮症酸中毒 l2其他：饥饿、过分节食其他：饥饿、过分节食l法法l胆红素与氯化钡反应，形成钡盐沉淀吸附胆红素，胆红素与氯化钡反应，形成钡盐沉淀吸附胆红素，滴加酸性三氯化铁试剂，使胆红素氧化为胆绿素滴加酸性三氯化铁试剂，使胆红素氧化为胆绿素显绿色。显绿色。l操作较为复杂，但准确性高。操作较为复杂，但准确性高。l2.干化学试带法干化学试带法l结合胆红素在强酸性介质中，与结合胆红素在强酸性介质中，与

6、2,4-二氯苯胺重氮二氯苯胺重氮盐起偶氮联反应而呈紫红色。盐起偶氮联反应而呈紫红色。l敏感度不高、但操作简便、快速及半定量的作用，敏感度不高、但操作简便、快速及半定量的作用，可用目视或仪器检测等优点，已得到临床广泛应可用目视或仪器检测等优点，已得到临床广泛应用。用。l阴性阴性l1.标本要新鲜、避光。标本要新鲜、避光。l法法可滴加硫酸铵试剂可滴加硫酸铵试剂1-2滴，以促使沉淀形成，滴，以促使沉淀形成，保证胆红素最大限度被吸附。保证胆红素最大限度被吸附。l3.注意药物的干扰注意药物的干扰 ：尿中含大量水杨酸和阿司匹：尿中含大量水杨酸和阿司匹林时易产生紫红色反应而干扰林时易产生紫红色反应而干扰Har

7、rison法的结果法的结果观察。观察。Vit C和亚硝酸盐能抑制偶氮反应而使试带和亚硝酸盐能抑制偶氮反应而使试带法为假阴性；而大剂量氯丙嗪和高浓度的盐酸苯法为假阴性；而大剂量氯丙嗪和高浓度的盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物在酸性条件下则使试带法呈偶氮吡啶的代谢产物在酸性条件下则使试带法呈假阳性。假阳性。l4试带法结果可疑者，最好用试带法结果可疑者，最好用Harrison法加以验法加以验证。证。l1.肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸l2.阻塞性黄疸阻塞性黄疸l3.先天性高胆红素血症先天性高胆红素血症l1.改良改良Ehrlich法法 尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛反应生尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛反

8、应生成樱红色化合物。操作简便，但结果受胆红素、成樱红色化合物。操作简便，但结果受胆红素、叶胆色素原以及某些药物的干扰。叶胆色素原以及某些药物的干扰。l2.干化学法干化学法l试带有两种：一种同干化学法，另一种是利用尿试带有两种：一种同干化学法，另一种是利用尿胆原与重氮化合物的偶联反应，根据产生红色的胆原与重氮化合物的偶联反应，根据产生红色的深浅判断尿胆原含量。深浅判断尿胆原含量。l试带法简单快速，可以半定量，不受尿中胆红素试带法简单快速，可以半定量，不受尿中胆红素的影响。的影响。l阴性或弱阳性阴性或弱阳性l120稀释后阴性稀释后阴性l1.标本采集与送检标本采集与送检l2.假阳性尿的鉴别假阳性尿的

9、鉴别 l3.假阴性假阴性l4.温度温度l5.结果观察结果观察l1.鉴别黄疸鉴别黄疸l2.反映肝细胞损伤的敏感指标反映肝细胞损伤的敏感指标l3.药物影响药物影响l尿血红蛋白来源：血管内溶血尿血红蛋白来源：血管内溶血 肾及上尿路出血肾及上尿路出血l隐血试验：肉眼无变化，化学定性阳性隐血试验：肉眼无变化，化学定性阳性l1.湿化学法湿化学法l血红蛋白所含的血红素有类似过氧化物酶活性，能催化一种供血红蛋白所含的血红素有类似过氧化物酶活性，能催化一种供氢（电子）体脱氢，使供氢体分子结构发生变化而显色。氢（电子）体脱氢，使供氢体分子结构发生变化而显色。l2.干化学试带法干化学试带法l与湿化学法原理相同。简便

10、、快速，敏感度高。与湿化学法原理相同。简便、快速，敏感度高。l上述方法干扰因素很多，特异性差。上述方法干扰因素很多，特异性差。VitC等其它还原性物质可等其它还原性物质可抑制酶活性使反应呈假阴性；高浓度的葡萄糖和蛋白质会降低抑制酶活性使反应呈假阴性；高浓度的葡萄糖和蛋白质会降低反应的敏感性；一些铁剂、碘化合物等氧化物可使反应呈假阳反应的敏感性；一些铁剂、碘化合物等氧化物可使反应呈假阳性。这些试剂与肌红蛋白也起反应。因而性。这些试剂与肌红蛋白也起反应。因而,需加以鉴别。需加以鉴别。 l3.单克隆抗体免疫胶体金法单克隆抗体免疫胶体金法l采用抗人血红蛋白单克隆抗体进行隐血检测。采用抗人血红蛋白单克隆

11、抗体进行隐血检测。l敏感度更高，特异性强，简便、快速；但目前费用较高。敏感度更高，特异性强，简便、快速；但目前费用较高。l阴性阴性l1.尿液要及时测定尿液要及时测定l2.保证试剂、试带质量保证试剂、试带质量l3.控制干扰因素：控制干扰因素：VitC、标本污染、标本污染l4.综合分析结果综合分析结果l1.辅助诊断泌尿系统疾病辅助诊断泌尿系统疾病l2.辅助诊断肾前性溶血性疾病辅助诊断肾前性溶血性疾病l尿中含有硝酸盐还原酶的病原菌可将硝尿中含有硝酸盐还原酶的病原菌可将硝酸盐还原为亚硝酸盐。酸盐还原为亚硝酸盐。l常见菌：大肠杆菌、克雷伯杆菌、变形常见菌：大肠杆菌、克雷伯杆菌、变形杆菌。杆菌。lGris

12、s原理：亚硝酸盐先于对氨基苯磺酸原理：亚硝酸盐先于对氨基苯磺酸或氨基苯磺酰胺反应生成重氮盐，再与或氨基苯磺酰胺反应生成重氮盐，再与-萘胺结合形成红色偶氮化合物。萘胺结合形成红色偶氮化合物。l感染的病原微生物的种类感染的病原微生物的种类l尿液滞留时间尿液滞留时间l硝酸盐的存在硝酸盐的存在l1.湿化学法：方便、快速。湿化学法：方便、快速。l2.干化学法：主要用于检出大肠杆菌。干化学法：主要用于检出大肠杆菌。l（二）参考值：阴性（二）参考值：阴性l1.防止假阳性干扰防止假阳性干扰l2.控制假阴性：晨尿、尿量、抗生素等。控制假阴性：晨尿、尿量、抗生素等。l3.综合分析结果综合分析结果l泌尿系感染的过筛

13、实验泌尿系感染的过筛实验l阴性不能排除感染阴性不能排除感染l尿中本尿中本-周蛋白定性检查周蛋白定性检查l尿液肌红蛋白定性检查尿液肌红蛋白定性检查l尿液清蛋白定量测定尿液清蛋白定量测定l尿总蛋白定量测定尿总蛋白定量测定l尿尿2-微球蛋白定量测定微球蛋白定量测定l尿免疫球蛋白定量测定尿免疫球蛋白定量测定l本周蛋白本周蛋白(Bence-Jones protein，BJP)是是免疫球蛋白轻链，能通过肾小球滤过膜。免疫球蛋白轻链，能通过肾小球滤过膜。又称为凝溶蛋白。又称为凝溶蛋白。l免疫球蛋白轻链在血液中的浓度增高，免疫球蛋白轻链在血液中的浓度增高，超过了肾近曲小管重吸收阈值时，可出超过了肾近曲小管重吸

14、收阈值时，可出现本周蛋白尿。现本周蛋白尿。l1.热沉淀法：在热沉淀法：在40时开始混浊，时开始混浊，60时时凝固，继续加热至凝固，继续加热至90-100时溶解，当时溶解，当温度恢复为温度恢复为4060时又凝固。时又凝固。 l2.对甲苯磺酸沉淀法：对对甲苯磺酸沉淀法：对-甲苯磺酸能沉甲苯磺酸能沉淀相对分子质量较小的本周蛋白，而对淀相对分子质量较小的本周蛋白，而对相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。起反应。 l3.电泳法或免疫法电泳法或免疫法l阴性阴性l1.标本要新鲜，以去除其他蛋白质的干扰。标本要新鲜，以去除其他蛋白质的干扰。 l2.严格控制严格控制pH

15、。l3.如尿中出现其他球蛋白如尿中出现其他球蛋白(大于大于5.0g/L)可可出现假阳性，需进行确证试验。出现假阳性，需进行确证试验。 l4.电泳法或免疫法：浓缩。电泳法或免疫法：浓缩。l5.使用利福平类抗结核药时，可出现。使用利福平类抗结核药时，可出现。l1.辅助诊断：辅助诊断：MM、巨球蛋白血症、巨球蛋白血症l2.预后观察：肾功能不全预后观察：肾功能不全lMb有种属特异性有种属特异性l自由透过肾小球膜自由透过肾小球膜l类过氧化物酶活性类过氧化物酶活性l可被可被100%的硫酸铵沉淀的硫酸铵沉淀l不被不被80%的硫酸铵沉淀的硫酸铵沉淀l化学法：隐血实验化学法：隐血实验l分光光度法：吸收光谱分光光

16、度法：吸收光谱l单克隆抗体免疫法：最敏感、特异单克隆抗体免疫法：最敏感、特异l阴性阴性l1.标本新鲜标本新鲜l2.缓慢加入硫酸铵，轻微振荡缓慢加入硫酸铵，轻微振荡l1.大面积外伤大面积外伤l2.缺氧、缺血缺氧、缺血l3.其他其他l测定方法及评价：免疫分析法、化学定测定方法及评价：免疫分析法、化学定量量l参考值：晨尿参考值：晨尿 随机尿随机尿1.270.78mmolCr 或或 11.216.93mg /gCr 24h尿尿l1.注意非特异性浊度的控制注意非特异性浊度的控制l2.注意抗原抗体的比例注意抗原抗体的比例l3.每次更换试剂后应重新制作标准曲线每次更换试剂后应重新制作标准曲线l1.早期肾损害

17、的筛检早期肾损害的筛检 l2.过敏性紫癜的肾功能监测过敏性紫癜的肾功能监测 l3.肾小球肾炎的病情观察肾小球肾炎的病情观察l4.其他其他l测定方法及评价：双缩脲法测定方法及评价：双缩脲法 染料结合法染料结合法 比浊法比浊法 免疫比浊法或放射比浊免疫比浊法或放射比浊法法l蛋白质中的肽键（蛋白质中的肽键（-CONH-）在碱性溶液）在碱性溶液中能与中能与Cu2+作用而产生紫红色络合物，作用而产生紫红色络合物，l其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关。而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关。l40-150mg/24hl丽春红丽春红S法法 l考

18、马斯亮蓝法考马斯亮蓝法l方法选择方法选择l标本要求标本要求l尿液浓缩尿液浓缩l消除尿液颜色的干扰消除尿液颜色的干扰 l测定方法及评价：免疫测定方法及评价：免疫l参考值：参考值：2MG 2MG排泄率排泄率0.2mg /(gCr) 2MG排泄率排泄率3mg /Ll质量控制：标本处理、试剂质量控制：标本处理、试剂l临床意义：临床意义：1.肾小球滤过功能受损的敏感肾小球滤过功能受损的敏感指标。指标。 2.肾小管疾病的早期诊断指标。肾小管疾病的早期诊断指标。 3.鉴别上、下尿路感染。鉴别上、下尿路感染。 4.观察肾移植排斥反应。观察肾移植排斥反应。l血浆血浆l尿路感染局部免疫反应产生尿路感染局部免疫反应

19、产生l肾脏疾病肾脏疾病l测定方法及评价：晨尿或测定方法及评价：晨尿或24h尿液尿液 免疫学方法免疫学方法l参考值：参考值：l临床意义：诊断肾小球性蛋白尿临床意义：诊断肾小球性蛋白尿 评价肾小球的损害程度评价肾小球的损害程度 肾炎型肾病肾炎型肾病lNAG、GGT、AAP、AMY、TRl尿酶活性计算：肌酐换算尿酶活性计算：肌酐换算 8h尿量计算尿量计算 酶清除率酶清除率l肾小管损伤的标志物肾小管损伤的标志物l测定方法及评价：比色法测定方法及评价：比色法 荧光光度法荧光光度法 电泳法电泳法l参考值：比色法参考值：比色法30U/L尿尿l质量控制；标本、试剂质量控制；标本、试剂l肾脏病变：肾小管损害肾脏

20、病变：肾小管损害l肾移植排异反应：早发现肾移植排异反应：早发现l上、下尿路感染的鉴别上、下尿路感染的鉴别l连续检测法连续检测法l肾脏受损的早期诊断：肾小管炎症肾脏受损的早期诊断：肾小管炎症l肾小球肾炎的疗效观察肾小球肾炎的疗效观察l肾癌的标志物肾癌的标志物l肾移植排异反应观察指标肾移植排异反应观察指标l速率法速率法l各种肾脏疾病诊断的辅助指标各种肾脏疾病诊断的辅助指标l肾移植术后排异反应的观察肾移植术后排异反应的观察l肾毒性损害的早期诊断肾毒性损害的早期诊断l急性胰腺炎急性胰腺炎l慢性胰腺炎慢性胰腺炎l其他其他l测定方法：连续检测法、免疫法测定方法：连续检测法、免疫法l参考值：阴性参考值：阴性

21、l质量控制：采样时间质量控制：采样时间 抗原抗体比例抗原抗体比例 结果判断结果判断l临床意义：急性胰腺炎阳性临床意义：急性胰腺炎阳性 胰腺癌阴性胰腺癌阴性l一、尿葡萄糖定量测定一、尿葡萄糖定量测定 l二、乳糜尿定性检查二、乳糜尿定性检查 l三、尿绒毛膜促性腺激素检查三、尿绒毛膜促性腺激素检查 l四、尿含铁血黄素定性检查四、尿含铁血黄素定性检查 l五、尿卟啉定性检查五、尿卟啉定性检查 l六、尿苯丙酮酸定性检查六、尿苯丙酮酸定性检查 l测定方法及评价：己糖激酶法测定方法及评价：己糖激酶法 邻甲苯胺法邻甲苯胺法 葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法l质量控制：立即检测质量控制：立即检测l参考值参考值 2.8mmol/d(0.5g/d)l临床意义临床意义l乳糜尿含有大量脂肪颗粒，与蛋白质组乳糜尿含有大量脂肪颗粒，与蛋白质组成的乳糜状浑浊尿。脂肪可溶于乙醚，成的乳糜状浑浊尿。脂肪可溶于乙醚，加乙醚萃取后乳糜尿变澄清，即为乳糜加乙醚萃取后乳糜尿变澄清，即为乳糜试验阳性。乳糜尿中脂肪小滴可用脂溶试验阳性。乳糜尿中脂肪小滴可用脂溶性染料使之着色，在显微镜下观察识别。性染料使之着色，在显微镜下观察识别。 l乳糜尿常