实验1直接凝集实验

1、实验室规则实验室规则 1. 1.必须穿白大衣、戴手套等。必须穿白大衣、戴手套等。 2.2.长发人员应将头发盘在脑后或戴工作帽，不允许穿拖鞋。长发人员应将头发盘在脑后或戴工作帽，不允许穿拖鞋。 3.3.实验室内不准吃东西、喝饮料、吸烟，不准把任何东西放入嘴中，实验室内不准吃东西、喝饮料、吸烟，不准把任何东西放入嘴中，也不要用手抚摸头脸等部位。也不要用手抚摸头脸等部位。 4.4.凡是废弃的细菌培养物、带菌材料，应放在指定地点等待灭菌处凡是废弃的细菌培养物、带菌材料，应放在指定地点等待灭菌处理，不得随便乱放或用水冲洗。理，不得随便乱放或用水冲洗。 5.5.一旦发生意外，造成污染，应立即报告老师进行处

2、理。一旦发生意外，造成污染，应立即报告老师进行处理。 实验室规则实验室规则 6. 6.实验室所有实验器材，未经处理一律不得带出实验室。实验室所有实验器材，未经处理一律不得带出实验室。 7.7.尽量保持安静，注意安全。不要随意调动实验室仪器。尽量保持安静，注意安全。不要随意调动实验室仪器。 8.8.自己的实验器材自己的实验器材( (试管、平皿等试管、平皿等) )注明日期、姓名、组注明日期、姓名、组. . 9. 9.离开实验室前，必须洗手。怀疑污染，应及时用消毒液泡手。离开实验室前，必须洗手。怀疑污染，应及时用消毒液泡手。10.10.每次实验后，用消毒液擦拭实验台，拖地等。每次实验后，用消毒液擦拭

3、实验台，拖地等。实验报告书写实验报告书写1.实验名称及实验目的 5分2.实验器材（仪器、试剂） 10分3.实验原理 10分4.实验方法 20分5.实验结果及计算 20分6.讨论（对结果的分析、自己的体会和收获、对教学的 建议）30分7.卷面 5分实验一实验一 直接凝集实验直接凝集实验目的和原理目的和原理 颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下发生颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下发生反应，出现肉眼可见的凝集小块。常见的操反应，出现肉眼可见的凝集小块。常见的操作方法有玻片（纸板）法和试管法作方法有玻片（纸板）法和试管法一一 玻片法：梅毒甲苯胺红不加热血清试验玻片法：梅毒甲苯胺红不加热血清试验 （tolu

4、lized red unheated serum test TRUSTtolulized red unheated serum test TRUST）原理原理: :梅毒患者血清中存在着能与梅毒患者血清中存在着能与VDRLVDRL（心磷脂、卵磷脂（心磷脂、卵磷脂和胆固醇）抗原发生凝集反应的反应素，本试剂采用和胆固醇）抗原发生凝集反应的反应素，本试剂采用VDRLVDRL抗原重悬于特制的甲苯胺红溶液中，当待测血抗原重悬于特制的甲苯胺红溶液中，当待测血清中存在反应素时，即与其发生凝集反应，出现肉眼清中存在反应素时，即与其发生凝集反应，出现肉眼可见的粉红色凝块。可见的粉红色凝块。40200l可调微量移液

5、器、10-50l可调微量移200-1000l可调微量移液器、200l移液移液吸头、1000l移液吸头小试管、试管架、反应板、振荡器、TRUST试剂盒、生理盐水试验试剂及器材试验试剂及器材1.1.将试剂盒在使用前放置室温（将试剂盒在使用前放置室温（23292329）平衡）平衡1010分钟。分钟。2.2.分别吸取梅毒阳性对照、阴性对照及待测血清样品分别吸取梅毒阳性对照、阴性对照及待测血清样品50l50l，均匀地铺加在纸卡的圆圈中。，均匀地铺加在纸卡的圆圈中。3.3.用专用塑料滴管吸取抗原，分别垂直滴加一滴（用专用塑料滴管吸取抗原，分别垂直滴加一滴（20l20l）于上述血清中。于上述血清中。4.4.

6、室温下以每分钟室温下以每分钟100100转振荡或摇动卡片，转振荡或摇动卡片，8 8分钟后立即分钟后立即用肉眼观察记录结果用肉眼观察记录结果 操作步骤：操作步骤：操作步骤：操作步骤： 5.对样本分别作如图稀释： 6.滴度判断：以出现凝集的最高稀释度为检测滴度报告。管 号1234生理盐水05050505原倍血清05稀释血清051号管混匀后052号管混匀后053号管混匀后终稀释度1：21：41：81：16结果判定：结果判定：1.阳性反应（R）：可见中等或较大块的粉红色凝块。2.弱阳性反应（RW）：可见较小的、明显的粉红色凝块。3.阴性反应（N）：可见粉红色均匀的沉淀物无凝集物。实验数据记录表格式实验

7、数据记录表格式 检测结果检测结果样本号样本号原倍血清1：2稀释1：4稀释1：8稀释1：16稀释稀释滴度稀释滴度 注意事项：注意事项：1.1.试验应在室温试验应在室温23292329条件下进行。条件下进行。2.TRUST2.TRUST抗原在使用前必须充分摇匀。抗原在使用前必须充分摇匀。3.3.做定量试验，可将待测血清用在生理盐水做倍比系做定量试验，可将待测血清用在生理盐水做倍比系列稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明列稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。4.4.本试验为梅毒非特异反应素试验，对阳性

8、者应结合本试验为梅毒非特异反应素试验，对阳性者应结合临床及特异性密螺旋体试验再做判断。临床及特异性密螺旋体试验再做判断。二二 试管法：血型抗体效价滴定试管法：血型抗体效价滴定 实验目的实验目的 了解试管凝集反应方法；掌握凝集效价的判了解试管凝集反应方法；掌握凝集效价的判 定及其意义。定及其意义。实验器材实验器材 40200L40200L可调微量移液器、可调微量移液器、10-50l10-50l可可 调微量移液器、调微量移液器、200-1000200-1000可调微可调微量移液器量移液器 200l200l移液吸头、移液吸头、1000l1000l移液吸移液吸头、头、 记号记号 笔、笔、A A或或B

9、B型试者血清、型试者血清、 生理盐生理盐水、水、 A A或或B B 型红细胞悬液、型红细胞悬液、 小试管、试管架、小试管、试管架、吸管、吸管、 3737恒温箱等。恒温箱等。步骤步骤 ：1.1.先观察生理盐水对照管（第先观察生理盐水对照管（第7 7管），应不发生凝管），应不发生凝集，液体混浊，管底沉淀呈圆形，边缘整齐。集，液体混浊，管底沉淀呈圆形，边缘整齐。此沉淀物为红细胞悬液静置时因重力作用自然此沉淀物为红细胞悬液静置时因重力作用自然下沉形成。然后自第下沉形成。然后自第6 6管开始依次观察管内液管开始依次观察管内液体的混浊程度及管底凝集块的大小。体的混浊程度及管底凝集块的大小。结果观察结果观察

10、孔底凝块观察及结果判定：孔底凝块观察及结果判定：+ + + + 凝集物凝集物 上清液上清液 凝集凝集程度程度 全部凝集全部凝集 澄清澄清 +（最强凝集）（最强凝集） 大部份凝集大部份凝集 基本透明基本透明 + + （强凝集）（强凝集） 有明显凝集有明显凝集 半透明半透明 + + （中度凝集）（中度凝集） 很少凝集很少凝集 基本混浊基本混浊 + + （弱凝集）（弱凝集） 不凝集不凝集 混浊混浊 （不凝集）（不凝集）注意事项：注意事项：1 1）凝集反应只有在抗原、抗体比例适当时，才能出现肉）凝集反应只有在抗原、抗体比例适当时，才能出现肉眼可见的反应。当抗体浓度过高时，常无凝集出现，眼可见的反应。当抗体浓度过高时，常无凝集出现，此