大蒜素对肉鸡生产性能及消化道酶活性的影响

1、大蒜素对肉鸡生产性能及消化道酶活性的影响摘要:选取1日龄135羽AA鸡,随机分成3组,每组3个重复,每个重复15只鸡。第一组为对照组，饲喂基础日粮；第二组为抗生素组，在基础日粮中添加5 0mg/kg洛克沙胂和750mg/kg 10%金霉素；第三组为试验组，在基础日粮中添加160mg/kg大蒜素。分别于21，42日龄测定肉鸡十二指肠内容物淀粉酶、脂肪酶、总蛋白酶的活力，并且计算肉鸡的日增重，料重比等生产性能。试验结果表明：在21日龄和42日龄时，大蒜素组的平均体重和平均日增重均高于对照组，料重比均低于对照组，并且低于抗生素组；在21日龄和42日龄时，大蒜素组淀粉酶活力较对照组提高了122.87%

2、和68.07%，脂肪酶活力较对照组提高了89.99%和50.00%，总蛋白酶活力提高了10.29%和1.70%，这说明大蒜素对提高肉鸡生产性能有显著的作用，同时大蒜素具有显著提高十二指肠内容物的脂肪酶和淀粉酶的活力，对总蛋白酶活力影响较小。关键词：肉鸡; 大蒜素; 生产性能; 淀粉酶; 脂肪酶; 总蛋白酶自从20世纪中叶抗生素在饲料中广泛使用以来，使很多传染病的死亡率有了大幅度的下降，为临床治疗开辟了一条新的途径，对畜牧业的发展起到了巨大的推动作用，但其负面效应也日趋明显，如：抗生素的大量使用会使畜禽产生抗药性和耐药性，以及抗生素在畜禽体内的残留直接威胁人类的健康1。因此开发天然无害的植物和矿

3、物类且具有抗生素作用的添加剂已经成为热点。大蒜素作为一种中草药添加剂，因为其含有各种营养物质,微量元素和维生素,并且使用时不存在中毒问题,对于动物保健和提高生产性能有显著的作用因而倍受人们的关注。大蒜素是对多年生宿根草本百合科植物大蒜（allium sativum）中主要成分的总称,是大蒜的提取液或合成物,是一种广谱抗菌药1,大蒜素的分子式为C6H10S3,具有强烈的刺激味和蒜所特有的辛辣味,对动物有明显的诱食作用2,在体内有杀菌消炎,降血压,降血脂,抑制血小板积聚,减少冠状动脉硬化,抑制体内N-亚硝胺合成,防癌,治癌,抗病毒等多种功能。大蒜素用于医药对呼吸道,消化道,脑膜炎,肠道疾病有效率达

4、80%-95%。大蒜素还用于兽药,农药,食品添加剂等,在畜禽、水产和一些特种养殖动物中作为杀菌剂,调解剂,解毒剂,调味剂,动物保健增产剂及产品改善剂等被广泛的使用并且效果显著。莫棣华、袁志柱3等试验结果表明在试验鸡添加大蒜素，可显著提高肉鸡日增重，降低料重比，改善鸡肉风味；贾卫斌王文斌等4在鲫鱼饵料中添加大蒜素，可提高鲫鱼的日增重和饲料报酬；任培桃5在生长肥育猪饲料中添加5%大蒜素能增强猪的食欲，提高增重5%以上。 大量试验证明了大蒜素有提高畜禽生产性能的作用，但到目前为止关于大蒜素的作用机理的研究报道却很少，本是试验就是对大蒜素作为饲料添加剂替代抗生素对肉鸡生产能提高的验证，以及通过大蒜素对

5、不同日龄肉鸡消化道酶活性影响的研究来初步探讨大蒜素的作用机理。1 材料与方法11 材料111 试验动物健康的1日龄AA肉仔鸡，购于江苏新沂远大畜禽有限公司。 试验地点饲养试验地点：安徽科技学院畜牧科技园试验室工作地点：安徽科技学院分析测试中心113 药品、试剂和仪器 1.大蒜素(25%）：山东济南大华畜牧发展有限公司生产2.洛克沙胂(98.5%):浙江福原兽药有限公司3.金霉素(10%):内蒙古金河兽药厂4.淀粉酶测试盒：上海科欣生物技术研究所生产 5.脂肪酶测试盒：南京建成生物工程研究所生产 6.钨酸钠:广东汕头西拢化工厂生产 7.钼酸钠:SHANGHAI CHEMICAL REGENT C

6、O .LTD.生产8.磷酸:上海建成试剂厂生产 9.盐酸:上海东懿化学试剂公司生产 10.硫酸锂:中国医药(集团)化学试剂公司生产 11.溴水: 中国医药(集团)化学试剂公司生产 12.酪氨酸:中国医药(集团)化学试剂公司生产13.酪蛋白:上警后天山化工厂生产 14.三氯乙酸:上海凌峰化学试剂有限公司 15.碳酸钠:宜兴市第二化学试剂厂生产 16.电子分析天平:上海精密科学仪器有限公司生产 17.快速混匀器:江苏省金坛市金成国胜实验仪器厂生产 18.高速电动匀浆器: 江苏省金坛市金成国胜实验仪器厂生产 19.高速冷冻离心机: 上海安亭科学仪器厂生产20.超低温冰柜:日本 三洋生产 21.恒温水

7、浴锅:. 江苏省金坛市金成国胜实验仪器厂生产 22.754紫外可见光光度计: 上海精密科学仪器有限公司生产 23.石英自动双重纯水蒸馏器: 江苏省金坛市金成国胜实验仪器厂生产1.2 方法1.2.1 试验方案135羽1日龄AA鸡随机分成3组,每组3个重复,每个重复15羽鸡。对照组1，饲喂基础日粮；对照组2，饲喂基础日粮+50mg/kg洛克沙胂+750mg/kg 10%的金霉素；试验组，按每千克饲料中添加160毫克的大蒜素。饲喂6周。基础日粮的配方及成分见表1。表1 基础日粮配方及营养水平日粮组成（%）0-3周3-6周营养水平0-3周3-6周玉米（%）59.8864.87ME（MJ/）12.181

8、2.39豆饼（%）34.0030.40CP（%）21.7018.80进口鱼粉（%）3.001.50Ca（%）0.960.90磷酸氢钙（%）1.401.65P（%）0.700.64石粉（%）1.201.10Lys（%）1.100.94蛋氨酸（%）0.110.04Met（%）0.450.36肉鸡多维（%）0.030.03食盐（%）0.280.31微量元素（%）0.100.10食盐（%）0.280.311.2.2 饲养管理方法将135羽1日龄AA实验肉仔鸡按照分栏饲养于三间密闭式鸡舍中，采用厚垫料平面饲养，自由饮水，自由采食，鸡舍内的温度在1日龄的时候在34，以后每周逐渐降低1-2，饲养期间按常规程

9、序进行新城疫，法式囊，传支病的免疫接种以及鸡舍内外的消毒工作。1.2.3 样品的采集分别在20日龄，41日龄晚18：00停食。待空腹12小时后于次日早晨6：00，从每个重复组随机取两只鸡（雌雄各一只），称重后屠宰（采用心脏采血处死），取出小肠。前部从肌胃与十二指肠结合部位剪断，后部至回肠头部剪断，用镊子将其内容物挤入封口袋中，于-50超低温冰柜中储存。以备试验处理。1.2.4 样品的处理准确称取十二指肠内容物1g，按W/V=5，加4预冷双蒸水，快速匀浆30S（保持低温环境，防止酶失活），匀浆液在16000转/分，0-4条件下离心15分钟，并且离心两次，将上清液，然后再等分于三个青霉素瓶中于-5

10、0超低温冰柜中保存，待测。1.3 测定指标及测定方法1.3.1 肉鸡生产性能的测定试验鸡按重复逐日记录耗料量，分别于21，42日龄逐只称重，然后计算日增重，料重比。1.3.2 肉鸡消化道酶活性的测定1.3.2.1 十二指肠内容物中的淀粉酶活力的测定测定前将底物缓冲液在37预温5分钟，然后按下表顺序加入试剂。步骤空白管测定管37底物缓冲液(ml)1.01.0肠匀浆液(ml)/0.02立即混匀,37水浴7.5分钟碘应用液(ml)1.01.0蒸馏水(ml)6.06.0然后将空白管和测定管利用紫外可见光度计测定光密度。1.3.2.2 十二指肠内容物中的脂肪酶活力的测定试验步骤:(1)将分光光度计于42

11、0nm处以Trise缓冲液6调零。(2)在待测试管中加入4ml底物缓冲液,编号并放入37预温5分钟(3)往相应编号已装有底物缓冲液的试管加入0.05ml肠内容物匀浆上清液,迅速用冰箱保鲜薄膜盖住管口,再用拇指摁住,立即颠倒混合5次(切勿用力振荡)。(4)迅速倒入比色皿中，在分光光度计于420nm处比色，读取吸光度值（A1值）。 (5)将此比色液倒入原试管中置于37准确水浴中10分钟,再按照上面相同的方法比色,读取吸光度值(A2值)。 (6)求出两次吸光度差值(A=A1-A2) 1.3.2.3 十二指肠内容物中总蛋白酶活力的测定.酪氨酸标准曲线的绘制。精确称取烘干的酪氨酸50mg，加入少量的0.

12、2mol/L的盐酸溶液溶解，定容至100ml。分别配置0、20、40、60、80u/ml的酪氨酸溶液，各取不同浓度的酪氨酸1ml，分别加入0.5%酪蛋白2ml，于37水浴中反应，然后加入10%三氯乙酸3ml，离心取上清液1ml，加入0.55mol/L碳酸钠5ml，再加入福林-酚试剂（制备方法6）1ml，于37水浴中显色15分钟，在680nm波长下比色，测光密度值（OD），以光密度值为纵坐标，酪氨酸浓度为横坐标，绘制标准曲线图。.用肠道内容物匀浆上清液来替代上述的酪氨酸，测定样品的吸光度。1.4 数据计算原理1.4.1肉鸡生产性能的计算日增重=（试验末平均体重-初期平均体重）/试验天数平均日采食

13、量=食入饲料总重/试验天数料重比=平均日采食量/日增重1.4.2 淀粉酶活力的计算淀粉酶活力(u/g食糜)=(空白管光密度-测定管光密度)800/(空白管光密度肠内容物重)1.4.3 脂肪酶活力的计算脂肪酶活力(u/L)=(A1-A2)因数/10求因数的方法:取底物缓冲液4ml加0.9%氯化钠50l,420nm比色,读取吸光度AS值,此AS值相当于标准管(454mol/L)的浓度的吸光度值,得出因数=36320/AS。1.4.5 蛋白酶活力的计算用样品的吸光度在赖氨酸标准曲线上查出相应的酪氨酸的浓度。我们以37，30分钟水解蛋白产生1g酪氨酸的酶量为1个酶活力。2 结果分析数据均以平均数标准误

14、（Se）表示,采用OFFICE软件包中的Excel2000软件对试验组间数据进行单因数方差分析和描述性统计2.1 大蒜素对肉鸡的生长性能的影响表2 大蒜素对肉鸡生长性能的影响项目对照组抗生素组大蒜素组只数45454521日龄平均重(g)544.0210.99535.143.82546.744.9742日龄平均重（g）1757.0013.501863.7033.741810.9975.20-3周平均日增重（g）23.620.8023.380.1823.860.524-6周平均日增重（g）40.840.3243.320.8042.051.790-3周料重比1.540.011.530.011.535

15、0.044-6周平均料重比2.550.222.440.112.370.04以上数据采用Excel2000单因素方差分析得出P0.05，差异均不显著。通过上表中的数据得出如下的结果：分析：通过表2和图1，图2，图3，我们可以直观的看出大蒜素对肉鸡的生产性能有一定的促进作用，在21，42日龄时大蒜素组的肉鸡平均体重和平均日增重均高于对照组，但抗生素组在21日龄时的平均体重和平均日增重均低于对照组，在42日龄时大蒜素组对肉鸡的增重效果没有抗生素好；大蒜素组和抗生素组的料重比均比对照组低，且在21日龄时三组的料重比相差不大，但到42日龄时，大蒜素组肉鸡的料重比明显低于抗生素组和对照组肉鸡料重比，以上结

16、论说明大蒜素可以替代抗生素添加到肉鸡基础日粮中。2.2 大蒜素对肠道淀粉酶活性的影响表3 大蒜素对肠道淀粉酶活性的影响肠道淀粉酶(u/g 食糜)组别只数21日龄42日龄对照组61325.17114.52a2671.10278.94a抗生素组61894.49124.98a4175.37597.06ac大蒜素组62953.45138.40c4489.43268.00c注:相邻字母表示P0.05,非相邻字母表示P0.05将对照组，抗生素组，大蒜素组分别在21，42日龄的肠道淀粉酶活力的数据利用EXCEL绘制折线图如下：分析:从表3和图4我们可以看出与对照组相比较,添加大蒜素的试验组对十二指肠中酶活性

17、有显著的提高,尤其在21日龄的时候,大蒜素较对照组提高了122.88%（P0.05）,在42日龄的时候,大蒜素组较对照组提高了68.07%（P0.05）。通过试验结果可判断在饲料中添加大蒜素对肠道淀粉酶活性的提高显著高于抗生素。从这一方面可知大蒜素替代抗生素的可行性。2.3 大蒜素对肠道脂肪酶活力的影响分析：从表4和图5可以看出，添加大蒜素的试验鸡较抗生素组和对照组的十二指肠脂肪酶活性都提高了，在21日龄的时候，大蒜素组较对照组提高了89.99%（P0.05），较抗生素组提高了111.62%（P0.05）；在42日龄的时候，大蒜素组比对照组提高了50.00%（P0.05），比抗生素组提高了20

18、.87%（P0.05）；42日龄时各组的脂肪酶活性均比21日龄时低。从下表可见大蒜素对肠道脂肪酶活性的作用显著高于抗生素组和对照组。表4 大蒜素对肠道脂肪酶活性的影响肠道脂肪酶(u/L食糜)组别只数21日龄42日龄对照组627.6410.79a13.822.76a抗生素组624.874.14a17.151.92a大蒜素组652.5214.03a20.734.15a注:相邻字母表示P0.05,非相邻字母表示P0.05利用对照组，抗生素组，大蒜素组在21，42日龄肠道脂肪酶活力的数值分析得出以下结论。2.4 大蒜素对肠道总蛋白酶活表5 大蒜素对肠道总蛋白酶活性的影响肠道总蛋白酶(u/L)组别只数2

19、1日龄42日龄对照组64846.111084.08a4634.32964.08a抗生素组62957.55701.20a6227.08515.88a大蒜素组65344.6741399.10a4713.215854.11a注:相邻字母表示P0.05,非相邻字母表示P0.05利用上表对照组，抗生素组，大蒜素组在21，42日龄的肠道总蛋白酶活力的数值可分析得出以下结论。分析：从表5和图6我们可以看出，添加大蒜素的试验组在21日龄和42日龄肠道总蛋白酶活性都提高了，尤其是在21日龄，比对照组提高了10.29%（P0.05），在42日龄时较对照组提高了1.702% （P0.05），没有抗生素组的效果明显，

20、抗生素组比对照组提高了34.37%（P0.05）。但在21日龄的时候大蒜素对总蛋白酶的作用效果明显好于抗生素。3 讨论与小结3.1 讨论3.1.1 大蒜素对肉鸡生产性能的影响大量试验证明大蒜素作为非药物类促生长剂，对提高动物生产性能有明显的效果。曾虹等（1997）试验结果表明：50mg/kg大蒜素可改善饲料转化率11%，黄玉德等（1996）试验表明：0.08%大蒜素能提高罗非鱼增重10%，广三保在断乳15-24天仔猪日粮中添加100mg/kg大蒜素能提高仔猪日增重6.97%，降低料重比4.89%4。又有报道表明：属于中草药中的大蒜素是重要的富硒产品，兼有营养和药物的双重作用，它能改善机体各系统

21、的组织，促进胃肠蠕动，调节体内酶的分泌，从而提高增重和饲料利用率7。本试验在肉鸡的基础日粮中添加160mg/kg大蒜素，其结果表明：虽然对照组、抗生素组和大蒜素组三组肉鸡生产性能各个指标相比较差异均不显著，但大蒜素能明显提高肉鸡的日增重，降低料重比，使肉鸡的平均体重在21日龄比对照组高2.72g，在42日龄高达53.99g，这与前人报道相一致。312 大蒜素对十二指肠内容物的消化酶活性的影响家禽对饲料的消化可以分为物理，化学和微生物作用，其中通过消化酶进行的化学性的消化起了决定作用8，但由于肉仔鸡生长快速的特点，使其自身常处于高度生理紧张，高度应激状态，容易受饲料，饲养管理和环境的影响而导致消

22、化道微生物群平衡紊乱和消化酶的分泌量或活性的不足910。本试验通过添加160 mg/kg大蒜素能不同程度地提高肉鸡消化道淀粉酶，脂肪酶和总蛋白酶的活力,尤其是对肠道淀粉酶活力的影响更为明显（P0.01）。这可能是因为大蒜素的添加使肉鸡肠绒毛增多，变长并且排列整齐，肠壁增厚，有增强胃液分泌和胃肠蠕动，刺激食欲，有利于消化酶的分泌，促进营养物质的吸收11。从酶的变化趋势来看，对照组和抗生素组淀粉酶活力是升高的，而大蒜素组中肉鸡肠道淀粉酶活力是呈下降趋势；肠道脂肪酶活力均呈下降趋势，这于前人的报道:脂肪酶活力在21日龄时达到最大值，以后呈下降趋势12是一致的。大蒜素组中的肉鸡肠道脂肪酶的活力的下降幅

23、度大于抗生素组，但总的来说大蒜素对脂肪酶活力的增强效果是最好的，而在总蛋白酶活力的变化来看，对照组和大蒜素组肉鸡总蛋白酶活力呈下降趋势，但大蒜素组总是大于对照组的总蛋白酶活力，抗生素组肉鸡肠道的总蛋白酶活力是呈上升趋势的，并且从21日龄的不及大蒜素组变化到42日龄超过大蒜素组，这可能与大蒜素的浓度较低有一定的关系，总的来说大蒜素对肉鸡肠道酶活力有明显的提高，这与肉鸡生产性能也是对应的。从而说明大蒜素是通过提高肉鸡肠道淀粉酶、脂肪酶、总蛋白酶活力来提高肉鸡肠道的消化水平进而提高肉鸡的生产性能的。 32小结饲料中添加大蒜素能显著提高肉鸡的生产性能，能提高十二指肠脂肪酶，淀粉酶和总蛋白酶的活力，可以

24、作为抗生素替代品。参考文献1程美玲，高士争.几种新型安全抗生素类饲料添加剂J.饲料世界,2001,10(88):4.2邢攸荷,孟宪生.高温季节添加大蒜素对肉仔鸡增重效果试验J.饲料世界,2001,(7):17.3陈名庚.绿色饲料添加剂-大蒜素J.饲料研究.2003,(6):21-23.4武书庚,郑君杰,任二军.大蒜素及其在畜牧业上的应用J.饲料世界,2001,(1)5-7.5市场扫描.专家预测-大蒜素大有可为J.饲料世界,2000,(5):17.6中山大学生物系生化微生物学教研室.生化技术导论M.北京:人民教育出版社.1979,411-412.7陈红平,温小洋,万绍贵,等.大蒜素及其功效研究J

25、.中国饲料,2002(4):13-14.8姚建国,周岩民,李如治.外源酶对家禽内源消化酶活性影响的研究进展J.粮食与饲料工业,2002,(7):32-34.9孔路军,郑雅文,赖长华,等.EM和酸化剂配合添加对肉仔鸡消化酶活性和血液生化指标及钙磷代谢的影响J.山东家禽,2003,6.10郑腾,李昂.家禽消化道酶发育及分泌规律的研究进展J.饲料工业,2004,25(11):41,43. 11Ya mazaki M,zhangyi-yi.1982.A note on the effect of temperature on true and apparent metabolizable energy

26、 valuesofa layer dietJ.Br.Poult.sci,23:447-450.12安永义,周毓平,呙于明.0-3周肉仔鸡消化道酶发育规律的研究J.动物营养学报,1999,11(1):17,22. 致 谢值此论文完成之际，由衷的感谢我的指导教师.教授,谨此向导师致以最崇高的敬意。感谢分析测试中心的.老师在课程完成过程中给予的指导。感谢.在试验鸡饲养阶段给予的帮助和指导，感谢试验组的几位同学在试验过程中给予的帮助。The Effect of Allicin on the Enzymes in the Digestive Tract and Performance of the Br

27、oilersAbstract:135 one day-old AA broilers were randomly divided into three groups, with three replicates each group, and 15 birds each replicates. The first group was control group, which was fed with basic diet. The second group was antibiotic group, which was fed with basic diet added to 50mg/kg roxarsone and 750mg/kg 10% chlortetracycline. The third group was trial group, which was fed with basic