9、载脂蛋白B标准操作规程(APOB)

1、 标准操作程序项 目：载脂蛋白B方 法：免疫比浊法前 言为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISO 15189医学试验室关于质量和力量的特殊要求及WS/T 227-2002临床检验操作规程编写要求的有关规定并结合产品实际状况制订，作为本产品的标准操作程序。本规程从2007年5月2日起实施，每2年复审1次。本规程由浙江伊利康生物技术有限公司编制。本规程起草单位：伊利康生物技术有限公司技术部。本规程主要起草人：蒙 凯、蔡其浩。本规程首次起草。 目 录1 检验申请32 标本采集与处理33 试剂及成份 44方法原理.45

2、仪 器.46 校准液及校准模式47质控品与室内质控规章 48标本检测步骤.59 结果计算510 操作性能 511试剂使用的留意事项.512参考范围及医学打算水平.513检验结果的报告及范围.514临床意义.615结果审核分析以及相关项目的联系.616威逼生命的“紧急值”及报告规定. .617有关引用程序与文件.618参考文献附录A XXX型全自动生化分析仪参数载脂蛋白B测定标准操作规程1.检验申请单独检验项目申请：血清载脂蛋白B（Apolipoprotein B；,缩写ApoB）测定；组合项目申请：血脂测定，血清载脂蛋白测定。临床医生依据需要提出检验申请。2.标本采集与处理 2.1 受检者的预

3、备： 采血前2周保持平常的饮食习惯，3d内避开高脂饮食，24h内不饮酒，空腹12h后采集标本。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。留意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，由于样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做猛烈运动。2.2标本采集2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后马上松开止血带，不抗凝，置一般试管中。或接受含分别胶的黄色盖子SST真空采血管，

4、如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。 2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。 2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4标本采集后与检验申请单一起准时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.2.5下列标本为不合格标本 2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严峻溶血、黄疸和浑浊的标本。 2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。 2.2.5.4其他如标识涂改、标本试管裂开等。 2.3标本处理 2

5、.3.1接收标本在室温放置30min45min后离心分别血清或血浆。吸出血清/血浆。处理样品时要将其当成生物污染品。2.3.2标本保存时间：室温（1525）下可稳定1d，一般冰箱中（28）稳定7d。-20可保存数月；-70至少保存半年；避开反复冻溶。为避开标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或掩盖湿巾。2.3.3已完成测试的标本保持完整的识别名，置28冰箱内保存7d。 2.4标本的留意事项 2.4.1不建议采集抗凝标本，假如必需使用血浆，推举的抗凝剂是肝素。 2.4.2妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。 2.4.3采血前最好停

6、用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药状况。2.4.4血清标本消灭溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰状况参见抗干扰力量。3.试剂及成份3.1试剂本科使用的载脂蛋白B检测试剂盒，由浙江伊利康生物技术有限公司生产，产品货号为:XXX，试剂为液体双试剂，其组份如下：试剂组成主要成份浓度R1三羟甲基氨基甲烷缓冲液100mmol/L聚乙二醇40g/LR2羊抗人APOB抗体适 量叠氮钠适 量 3.2试剂盒保存及效期未启封试剂盒在28保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定30d。开盖后避开污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变

7、质，不能连续使用。新打开试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。3.3试剂盒预备液态试剂型，即开即用，无特殊预备。4.方法原理4.1测定方法：终点法。4.2原理：样品中ApoB抗原与试剂中相应的ApoB抗体在溶液中相遇，马上形成抗原抗体复合物，并形成肯定浊度。该浊度的凹凸在肯定量抗体存在时与抗原的含量成正比。通过与同样处理的校准液比较，计算样品中的ApoB含量。5.仪器XXX型全自动生化分析仪器。6.校准品与校准模式 6.1校准品：使用试剂盒附送的同批号APOB标准液。其中包含APOB的定值。6.2标准类型和校准点数目：多点非线性模式(Logit-4P或Spline)，5个

8、校准点。6.3校准周期：全点定标：更换试剂批号或消灭质控漂移时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。 7.质控品与室内质控规章7.1质控品接受由XXX公司供应的两个不同水平定值质控血清。7.2质控液重建方法：用XXX.00ml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。7.4质控规章：接受Westgard多规章质控规章，由计算机程序进行检索与推断。7.5如消灭失控状况，按室内质控标准操作程序实行各种有效的订正措施准时订正，并在确认重新回复到把握状态后开头标本检测。8.标本检测步骤 装载试剂 进行校准进行质控

9、输入标本检测项目加载标本标本测定结果复核报告。9.结果计算ApoB（g/L）= CS AT/AS（g/L）式中：AT以空白管吸光度作对比的样品管吸光度值AS以空白管吸光度作对比的校准管吸光度值C S 校准液中ApoB的浓度10.操作性能10.1精密度：批内CV 4.0，批间相对极差CV8.0。 10.2 精确度：测量结果在质控血清靶值2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持全都。10.3线性范围：0.052.00 g/L10.4方法的有限性及干扰因素：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度598mol/L，血红蛋白浓度5.00g/

10、L，甘油三酯浓度22.6 mmol/L时对测定结果有干扰。11.试剂使用的留意事项11.1本试剂仅应用于体外诊断。11.2扔弃废物应符合当地的法规要求。12.参考范围及医学打算水平 参考范围： 0.61.1 g/L。13.检验结果的报告及范围13.1结果的报告13.1.1结果经审核确认精确无误后发出报告。13.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。13.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。13.2报告范围：血清与试剂用量之比为1:100时，测定上限为2.0g/L。超过此范围的结果报告时必需附有证明该

11、结果精确牢靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。14.临床意义 14.1血清中的apoB绝大部分存在于低密度脂蛋白LDL中，在IDL、VLDL和脂蛋白（a）中也各有一分子apoB，故血清apoB水平主要反映LDL水平，与LDL-C呈明显的正相关。 14.2流行病学与临床争辩结果已确认，高浓度apoB是冠心病的危急因素，且apoB是各项血脂指标中较好的动脉粥样硬化标志物。 14.3冠心病高apoB血症的药物干预试验结果表明，降低apoB水平可以削减冠心病发病及促进粥样斑块的消退。目前的争辩结果表明：冠心病患者一般具有比较低的APO A1水平和比较高的APO B水平。15.结果审核分析以及相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的牢靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与血脂其他指标和载脂蛋白等的关系，apoB一般与LDL-C呈正相关。如消灭与临床不符甚至相悖的状况，应分析与查找缘由。16.威逼生命的“紧急值”及报告规定通常无威逼生命的“紧急值”。17.有关引用程序与文