222动物细胞融合与单克隆抗体学案

1、课题：动物细胞融合和单克隆抗体 【学习目标】1. 举例说出动物细胞融合的原理及应用2. 举例说出单克隆抗体的原理及应用。3. 单克隆抗体的制备过程。【重点难点】动物细胞融合技术的原理与应用。单克隆抗体的制备过程与应用。【学习流程】*自主预习区* 1、 动物细胞融合1.概念: 结合形成一个细胞的过程，也称 。2.诱导原理和结果(1)诱导原理： 。(2)诱导结果:形成 细胞。3.诱导因素: 、 、 等。4.意义:突破了 方法的局限，使 成为可能。5.动物细胞融合技术的应用:(1)成为研究 、 、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。(2)用于制备 。思考：（1）“细胞杂交”与“杂交细胞”有何区别？（2）

2、动物细胞融合与植物原生质体融合的诱导方法有何异同？（3）动物细胞融合完成的标志是什么？二、单克隆抗体1.制备原理(1)B淋巴细胞特点:一种B淋巴细胞分泌一种特异性抗体。(2)骨髓瘤细胞特点:能在体外大量 。(3)杂交瘤细胞特点:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞,既能 又能产生大量 。2.制备过程：3.单克隆抗体的优点： 、 、可大量制备。4.单克隆抗体的应用：（1）作为 ，具有准确、高效、简易、快速的优点。（2）用于 和 。思考：(1)制备单克隆抗体是，为什么要对小鼠注射抗原？(2)杂交瘤细胞有什么特点？(3)只考虑细胞的两两融合，融合后有几种细胞？(4)“生物导弹”的组成和优点是什

3、么？*课堂探究区* 探究点一 动物细胞融合问题导引：动物细胞融合与植物体细胞杂交主要有哪些区别？(1)从融合的过程看,首先是是A、B细胞膜融合,接着是 融合,最后完成 融合。(2)细胞膜融合的过程体现出细胞膜具有 .(3)融合后重组细胞的特点为融合形成的杂种细胞C具有两种细胞的 ，通过动物细胞培养,杂种细胞C表现出两个亲本细胞的特点。(4)诱导动物细胞融合和诱导植物原生质体融合都可使用的方法有 。(5)若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞,在两细胞融合前需用酶解法去掉 ,这种酶可能是 、 ，杂交细胞C经培养形成的高度液泡化、无定型的薄壁细胞团称为 。归纳提升植物体细胞杂交和动物细胞融合的的区别

4、植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后,诱导原生质体融合,形成杂种体细胞,再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法法、生物方法(灭活的病毒)结果形成杂种植株形成杂种细胞即时训练1.(2019西宁高二检测)下列关于动物细胞融合的说法,错误的是（ ）A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.动物细胞融合需要用纤维素酶处理C.动物细胞融合时需要人工诱导D.常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的病毒、电激等探究点一 单克隆抗体的制备问题

5、导引：如何进行单克隆抗体的制备？(1) 请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。(2)在单克隆抗体制备过程中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有 的特性。(3)由图中可以看出,在单克隆抗体制备过程中运用了 和 等动物细胞工程技术手段。(4)请写出图中的两次筛选目的。 归纳提升1.关键思路及操作依据a.克隆单一的的B淋巴细胞,形成细胞群(1)关键思路 b.将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞(2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,不同种类的的B淋巴细胞分泌的抗体不同。B淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖,

6、骨髓瘤细胞能够无限增殖。2.单克隆抗体制备过程中的筛选及原因(1)第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后,筛选出杂交瘤细胞,淘汰未融合细胞和同种细胞融合而成的细胞。(2)第二次筛选需先在多孔培养板上培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的,所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。 即时训练2. 根据单克隆抗体制备流程示意图判断,下列叙述正确的是( ）A.单克隆抗体技术的原理包括细胞增殖、细胞膜的流动性、细胞的全能性等B.根据培养基的物理性质分类,图中HAT培养基属于选择培养基C.在制备单

7、克隆抗体的过程中有两次筛选,第一次是筛选杂交瘤细胞,第二次是筛选能够产生高特异性抗体的杂交瘤细胞D.小鼠骨髓瘤细胞染色体数是40,B淋巴细胞的染色体数为46,融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86高考命题点·模块交汇交汇点 免疫调节（1） 免疫类型：人体的免疫分为 和特异性免疫；特异性免疫又包括 和 。（2） 抗原：能够引起机体产生 的物质。（3） 免疫过程:体液免疫：B淋巴细胞接受抗原刺激后增殖、分化，大部分分化为 细胞，产生抗体，小部分分化为 细胞。细胞免疫：T细胞接受抗原刺激后，分化形成 ，然后与被抗原入侵的 细胞密切接触，使其裂解死亡。*课时检测区* 基础达标1.动物细胞融

8、合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是（ ）诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞A. B. C. D.2.科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是（ ）A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞C经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞3.(2019贵阳高二检测)下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述,不正确的是（ ）A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞C.需要从杂交细胞中筛选出能产生特异性抗体的细胞D.利用生物导弹治疗

9、癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞4.(2019光湖高二检)将特定药物与单克降抗体相结合制成的”生物导弹”,能够用于杀死人类某些癌细胞。其过程如图所示。下列有关叙述错误的是A.过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B.经形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并产生特定相同C.过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞D.抗体的靶向作用使过程具有高度特异性5.利用细胞工程方法,以埃博拉病毒核衣売蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列有关单克隆抗体的叙述,正确的是A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体B.体外培养单个浆细胞可以获得大量针对埃博拉病毒的单克隆抗体C.将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D.利用该单克隆抗体与埃博拉病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出块博拉病毒感集者能力提升6. 下面是单克隆抗体的制备示意图，请分析回答：(1)细胞融合在生物工程中属于 工程的范围，用这种方法所得的杂交瘤细胞具有的主要特征是 ； 。（2）杂交