化妆品中有毒有害物质的检验方法研究

1、化妆品中有毒有害物质的检验方法研究    1美白祛斑产品中糖皮质激素的测定方法美白祛斑产品中7种糖皮质激素(包括地塞米松磷酸钠、氢化可的松、地塞米松、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、丁酸氢化可的松)非法添加的分离测定(HPLC-DAD)研究。规范中其为禁用物质,但是却没有卫生化学检验方法。文献报道中有6种糖皮质激素或糖皮质激素与其他激素成份的同时测定,但系统的研究和方法的制定还需开展。第一阶段我们采用HPLC-DAD,以梯度洗脱的方式成功地分离测定了7种物质。第二阶段我们采用快速液相色谱(RPLC)-DAD在10分钟内实现了7种物质的快速分离分

2、析。色谱条件和系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(使用C18预柱),以0.025mol/L磷酸二氢钾(含0.25%的三乙胺,磷酸调pH至3.4)-甲醇(4732)为流动相A,以乙腈为流动相B,检测波长为240nm。分离度应大于1.5。色谱条件2:以0.025mol/L磷酸二氢钾(含0.25%的三乙胺,磷酸调pH至3.4)-甲醇(4732)为流动相A,以乙腈为流动相B,检测波长为240nm。混合标准储备溶液:分别准确称取地塞米松磷酸钠、氢化可的松、地塞米松、醋酸氢化可的松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、丁酸氢化可的松各50.00mg,至50ml量瓶中,用适量甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,配成

3、各组分质量浓度为1.00mg/mL的混合标准溶液。标准曲线的制备:准确移取不同体积的混合标准溶液于10mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。在设定色谱条件下,分别取10L进行分析。以标准系列质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。供试品溶液的制备:准确称取样品约1g于20mL量瓶中,加甲醇适量,振摇,超声提取20min30min,放冷,加甲醇稀释至刻度,摇匀。经0.45m滤膜过滤,滤液作为待测溶液备用。测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10ul,分别注入液相色谱仪,按标准曲线法以峰面积计算。2美白祛斑产品中11种磺胺类化合物残留量的的测定方法2.1仪器与试药:Agilent12

4、00高效液相色谱仪,电子天平,超声仪,涡旋振荡器。磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶对照品,甲醇为色谱纯,冰醋酸为分析纯。2.2样品来源:化妆品共67批,来自市场抽验。2.3色谱条件:色谱柱:AgilentSB-C18(1.8m,4.6mm×50mm),AgilentTechnologies;柱温:50。流动相A:甲醇-冰醋酸溶液(0.25100)(15:85),流动相B:甲醇,梯度洗脱:06min,流动相A为100%;69min,流动相A为40%。流速:1.5mLmin-1

5、;检测波长:270nm;进样量:10L。2.4线性关系试验:分别称取一定量的磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶对照品,用流动相A溶解并配制成100gmL-1的溶液,作为标准储备液。吸取标准储备液适量,用流动相A稀释制成浓度分别为0.1、0.3、1.0、4.0、10.0、30.0、80.0、100.0gmL-1系列浓度的工作溶液。按上述色谱条件用高效液相色谱仪测定,以测得峰面积Y为纵座标,标准品溶液浓度X为横座标进行线性回归,色谱峰面积与浓度呈良好线性关系。磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、

6、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶的相关系数均为1.000。2.5加样回收率试验:取未测出上述11种磺胺的化妆品作为空白样品,混匀后取样1.00g,分别向样品中添加一定量11种磺胺的标准储备液,加流动相A同样品处理,离心后取上清液过滤即得。结果平均回收率均为93%104%之间,RSD在0.3%2.4%之间。结果表明,该残留检测方法可靠,重现性好,精密度和准确度均能达到残留分析的要求。2.6实际样品分析:称取1.00g样品,加适量流动相A混匀,超声处理20分钟,高速离心。转移上清液过滤,进样测定。所得色谱图见图1、图

7、2。在67批样品中均未检测出11种磺胺。2.7最低检测限度试验:将标准储备液分别加入空白样品中,按样品处理方法处理后检测,磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异噁唑、磺胺-6-甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺二甲氧嘧啶的最小检测浓度分别为1.0gg-1,1.0gg-1,1.1gg-1,1.1gg-1,2.7gg-1,2.6gg-1,2.5gg-1,2.5gg-1,2.5gg-1,5.10gg-1,1.1gg-1。3结语以上化妆品中四大类系物质的快速液相测定法完善和填补了化妆品卫生规范(2007年版)只有限度没有方法的空白,而且是针对市场监测的需求有的放矢进行的方法研究。另外我们还进行了化妆品中丙烯酰胺残留的LC/MS/MS的研究,化妆品中限用禁用物质的研究是一个系统工程,我们将在已完成工作基础上这项研究持续进行下去。