药物分析第六章芳酸类非甾体抗炎药物的实际分析

1、药物分析第六章芳酸类非甾体抗炎药物的实际分析2结构结构性质性质鉴别鉴别杂质检查杂质检查含量测定含量测定体内药物分析体内药物分析3芳酸类非甾体药物芳酸类非甾体药物药理作用：药理作用：抗炎、抗风湿、止痛、 退热、抗凝血应用应用：关节炎、发热、各种慢性疼痛4分类分类水杨酸邻氨基苯甲酸邻氨基苯乙酸芳基丙酸吲哚乙酸苯并噻嗪甲酸5第一节第一节 典型药物的结构与性质典型药物的结构与性质一、典型药物与结构特点一、典型药物与结构特点 苯环苯环各种取代基各种取代基 羧基羧基游离、盐、酯游离、盐、酯 氨基氨基酰胺酰胺6水杨酸类水杨酸类COOHORR7典型药物：典型药物：8邻氨基苯甲酸类邻氨基苯甲酸类COOHHNRC

2、OOHHNCH3CH3甲芬那酸典型药物：典型药物：9邻氨基苯乙酸类邻氨基苯乙酸类HNRORO典型药物：双氯芬酸钠典型药物：双氯芬酸钠10芳基丙酸类芳基丙酸类HOCH3ORR典型药物：布洛芬、酮洛芬、萘普生典型药物：布洛芬、酮洛芬、萘普生11吲哚乙酸类吲哚乙酸类NRCOOHCH3R典型药物：吲哚美辛典型药物：吲哚美辛12苯并噻嗪甲酸类苯并噻嗪甲酸类SNOHNHROOOCH3典型药物：吡罗昔康、美洛昔康典型药物：吡罗昔康、美洛昔康13其他非甾体抗炎药其他非甾体抗炎药OHNSOOCH3NO2尼美舒利NCH3OHO对乙酰氨基酚14二、主要理化性质二、主要理化性质（一）酸性（一）酸性 游离羧基酸性较强游

3、离羧基酸性较强 芳酸芳酸芳取代脂肪酸芳取代脂肪酸 可用酸碱滴定法测定含量可用酸碱滴定法测定含量15（二）水解性（二）水解性 酯键、酰胺键能水解酯键、酰胺键能水解 水解产物可用于鉴别水解产物可用于鉴别 水解反应可用于定量测定水解反应可用于定量测定16（三）光谱特征（三）光谱特征 红外：鉴别红外：鉴别 紫外：鉴别、含量测定、均匀度、溶出度紫外：鉴别、含量测定、均匀度、溶出度（四）基团或元素特性（四）基团或元素特性 酚羟基、二苯甲酮、芳伯胺基、硫元素酚羟基、二苯甲酮、芳伯胺基、硫元素17第二节第二节 鉴别试验鉴别试验一、与三氯化铁反应一、与三氯化铁反应 1.水杨酸反应水杨酸反应 与三氯化铁反应生成紫

4、堇色配合物与三氯化铁反应生成紫堇色配合物 +FeCl3+H2OOHOHOOOOFeOH18注意：注意： 1.反应条件：反应条件：pH46 ，强酸性环境产物分解，强酸性环境产物分解 2.反应灵敏，在稀溶液中进行反应灵敏，在稀溶液中进行 3.不同药物产物颜色略有差异不同药物产物颜色略有差异 4.阿司匹林阿司匹林紫堇色紫堇色19+FeCl3NHCOCH3OH3NHCOCH3O-Fe3+3HCl2.酚羟基反应酚羟基反应 对乙酰氨基酚加三氯化铁显蓝紫色对乙酰氨基酚加三氯化铁显蓝紫色20二、缩合反应二、缩合反应 1.酮或醛结构与肼基缩合酮或醛结构与肼基缩合 OOCH3HONO2NO2HNNH2+H2SO4

5、ONCH3HOHNO2NNO221ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄猩红色萘酚OH-NH2R三、重氮化三、重氮化偶合反应偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 OH22 直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、直接：对氨基水杨酸钠、盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺 间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋间接：对乙酰氨基酚（扑热息痛）、醋氨苯砜、贝诺酯氨苯砜、贝诺酯 23四、氧化反应四、氧化反应 甲芬那酸甲芬那酸+硫酸硫酸+重铬酸钾重铬酸钾深蓝色深蓝色 棕绿色棕绿色 吲哚美辛吲哚美辛+硫酸硫酸+重铬酸

6、钾重铬酸钾紫色紫色 吲哚美辛吲哚美辛+盐酸盐酸+亚硝酸钠亚硝酸钠绿色绿色 黄色黄色2423Na CO 硫酸阿司匹林水杨酸钠醋酸钠水杨酸（白色） 醋酸臭气五、水解反应五、水解反应 NaOH 稀盐酸双水杨酯水杨酸白色 （测定熔点）， 可溶于醋酸铵25六、特征元素的反应六、特征元素的反应 1.氯元素的鉴别氯元素的鉴别 两种鉴别方法两种鉴别方法 2.硫元素的鉴别硫元素的鉴别26七、光谱法七、光谱法 （一）紫外（一）紫外-可见分光光度法可见分光光度法 1.最大吸收波长发最大吸收波长发 2.最大与最小吸收波长法最大与最小吸收波长法 3.吸光度法吸光度法 4.吸光度比值法吸光度比值法（二）红外分光光度法（二

7、）红外分光光度法27八、色谱法八、色谱法 （一）（一）TLC 对照品与供试品斑点位置一致对照品与供试品斑点位置一致 （二）（二）HPLC 对照品与供试品保留时间一致对照品与供试品保留时间一致28第三节第三节 特殊杂质及其检查法特殊杂质及其检查法一、阿司匹林和双水杨酸酯一、阿司匹林和双水杨酸酯 杂质来源：杂质来源： 原料残存（生产过程中乙酰化不完全）原料残存（生产过程中乙酰化不完全） 水解产生（贮存过程中水解产生）水解产生（贮存过程中水解产生） 29ONaCO2ONaCOONaOHCOOHH+(CH3CO)2OOCOCH3COOHOCOOHOOH（一）合成路线：（一）合成路线：30（二）阿司匹林

8、中游离水杨酸及有关物质（二）阿司匹林中游离水杨酸及有关物质 1.1.水杨酸水杨酸 来源：原料、水解产物来源：原料、水解产物 酚羟基酚羟基有色醌类杂质有色醌类杂质检查方法检查方法HPLCHPLC法法 固定相：固定相：ODSODS 流动相：乙腈流动相：乙腈- -四氢呋喃四氢呋喃- -冰醋酸冰醋酸- -水水 按照外标法以峰面积计算按照外标法以峰面积计算312.2.有关物质的检查有关物质的检查OHOCOCH3(CH3CO)2OOHOHCOOH+COOOCOCH3COOHOCOCH3+COO醋酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯32检查方法检查方法HPLCHPLC法法 固定相：固定相：ODSODS 流动相：流

9、动相：A A 乙腈乙腈- -四氢呋喃四氢呋喃- -冰醋酸冰醋酸- -水水 B B 乙腈乙腈 对照液：对照液：0.5%0.5%供试品溶液供试品溶液 要求：供试品溶液杂质峰面积和不得大要求：供试品溶液杂质峰面积和不得大于对照液峰面积于对照液峰面积33（三）双水杨酸酯中游离水杨酸的检查（三）双水杨酸酯中游离水杨酸的检查 水杨酸水杨酸+Fe3+显色显色 测定测定530nm吸光度吸光度 要求：供试品溶液吸光度小于对照液要求：供试品溶液吸光度小于对照液 原料药：原料药：0.5% 制剂：制剂：1.5%34二、甲芬那酸中二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺（一）合成工艺（一）合成工艺COOHClH3CC

10、H3NH2+COOHHNH3CCH3Cu35（二）检查方法（二）检查方法 GC程序升温法检查程序升温法检查2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺 限度：限度：0.01% 供试品溶液、对照品溶液供试品溶液、对照品溶液 36三、二氟尼柳中有关物质的检查三、二氟尼柳中有关物质的检查FFNH2FF+偶合Cu乙酰化FFCOCH3FFOCOCH3氧化H2O2FFOH水解FFOH羧化COOH371.有关物质有关物质A高低浓度对比法高低浓度对比法 方法：方法：S 溶剂溶解稀释供试品溶液一定量供试品溶液对照溶液38供试品对照品39判断：判断： 控制杂质斑点个数，控制杂质种类控制杂质斑点个数，控制杂质种类 供试品溶液所显杂

11、质斑点不得深于对供试品溶液所显杂质斑点不得深于对照溶液的主斑点（或荧光强度）照溶液的主斑点（或荧光强度）40优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不优点：以供试品的稀溶液作为对照液，不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液；几种限量的对照溶液；缺点：不同物质，不同缺点：不同物质，不同R Rf f值比较，准确度值比较，准确度差、直观性差。差、直观性差。 412.有关物质有关物质B HPLC法法 固定相：固定相：C18 流动相：水流动相：水-甲醇甲醇-乙腈乙腈-冰醋酸冰醋酸 检测波长：检测波长：254nm 要求：杂质峰面积和小于对照液主要求：杂质峰面

12、积和小于对照液主 峰面积峰面积42NaOHSsol 中性乙醇酚酞滴定终点第四节第四节 含量测定含量测定一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法 1. 直接滴定法直接滴定法43阿司匹林阿司匹林 ChP（2010） 取本品约，精密称定，加中性乙醇（对酚酞取本品约，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（）滴定。每滴，用氢氧化钠滴定液（）滴定。每lml的氢氧的氢氧化钠滴定液（）相当于的化钠滴定液（）相当于的C9H8O4。44COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O45（1 1）测定方法及计算）测定方法

13、及计算 反应摩尔比为反应摩尔比为11 11 （2 2）讨论）讨论 中性乙醇中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯键水解。溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性中性”是对中和法所用的指示剂而言是对中和法所用的指示剂而言46 优点：简便、快速优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸）酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分 析，只能用于合格原料药的含量测定析，只能用于合格原料药的含量测定472. 水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法 酯的一般含量测定方法酯的一般含量测定方

14、法阿司匹林阿司匹林:COOHOCOCH3+ 2NaOH水解COONaOH+CH3COONa2NaOH（过量）（过量）H2SO4Na2SO42H2O水解：水解：剩余滴定：剩余滴定：48USPUSP方法方法：取本品约，精密称定：取本品约，精密称定, ,加入氢氧化钠滴加入氢氧化钠滴定液（），混合，缓缓煮沸定液（），混合，缓缓煮沸10min10min，放冷，加酚酞，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（）滴定剩余的氢氧化钠，指示液，用硫酸滴定液（）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每并将滴定结果用空白试验校正。每1ml1ml的氢氧化钠的氢氧化钠滴定液（）相当于的滴定液（）相当于的C C9 9

15、H H8 8O O4 4。 49 反应摩尔比为反应摩尔比为1212 优点：消除了酯键水解的干扰优点：消除了酯键水解的干扰 缺点：酸性杂质干扰缺点：酸性杂质干扰50 取本品取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶匹林），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化滴，滴加氢氧化钠滴定液（）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（）钠滴定液（）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（）40m

16、1，置水浴上加热，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每硫酸滴定液（）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（）相当于的的氢氧化钠滴定液（）相当于的C9H8O4。 3.两步滴定法两步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林肠溶片阿司匹林片、阿司匹林肠溶片 氯贝丁酯氯贝丁酯 51COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O第一步第一步 中和中和52第二步第二步 水解后剩余滴定水解后剩余滴定 COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）水解：水解： 2NaOH（过量）（过量）H2SO4Na2SO42H2O 药物与氢氧化钠反应摩尔比为药物与氢氧化钠反应摩尔比为1 1 本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰本法消除了酸性杂质的干扰，降低了酯键水解的干扰 53片剂含量测定结果的计算片剂含量测定结果的计算 %100%100%/gggg每片含量标示量标示量测得量（ ）平均片重（ ）供试品重（ ）标示量（片）54二、紫外可见分光光度法二、紫外可