临床生化检验室分析项目作业指导书

1、临床生化检验室分析项目作业指导书临床生化检验室目 录文件编号名称页码回顾和修订页1-4LAB-SH-XMSOP-001血清总蛋白测定标准操作规程5-9LAB-SH-XMSOP-002血清白蛋白测定标准操作规程10-14LAB-SH-XMSOP-003血清总胆红素测定标准操作规程15-19LAB-SH-XMSOP-004血清结合胆红素测定标准操作规程20-24LAB-SH-XMSOP-005血清总胆汁酸测定标准操作规程25-29LAB-SH-XMSOP-006血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程30-34LAB-SH-XMSOP-007血清天门冬氨酸氨基转移酶标准操作规程35-40LAB-SH-

2、XMSOP-008血清碱性磷酸酶测定标准操作规程41-45LAB-SH-XMSOP-009血清-谷氨酰转移酶测定标准操作规程46-50LAB-SH-XMSOP-010乳酸脱氢酶测定标准操作规程51-55LAB-SH-XMSOP-011血清肌酸激酶测定标准操作规程56-60LAB-SH-XMSOP-012血清肌酸激酶同工酶测定标准操作规程61-66LAB-SH-XMSOP-013血清-羟丁酸脱氢酶测定标准操作规程67-71LAB-SH-XMSOP-014淀粉酶测定标准操作规程72-76文件编号名称页码LAB-SH-XMSOP-015葡萄糖测定标准操作规程77-82LAB-SH-XMSOP-016

3、尿素测定标准操作规程83-87LAB-SH-XMSOP-017肌酐测定标准操作规程88-93LAB-SH-XMSOP-018尿酸测定标准操作规程94-98LAB-SH-XMSOP-019血清总胆固醇测定标准操作规程99-104LAB-SH-XMSOP-020血清甘油三酯测定标准操作规程105-109LAB-SH-XMSOP-021血清高密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程110-114LAB-SH-XMSOP-022血清低密度脂蛋白胆固醇测定标准操作规程115-119LAB-SH-XMSOP-023血清载脂蛋白A1测定标准操作规程120-124LAB-SH-XMSOP-024血清载脂蛋白B测定标准

4、操作规程125-128LAB-SH-XMSOP-025钙测定标准操作规程129-133LAB-SH-XMSOP-026血清无机磷测定标准操作规程134-138LAB-SH-XMSOP-027血清镁测定标准操作规程139-143LAB-SH-XMSOP-028血清铁测定标准操作规程144-148LAB-SH-XMSOP-029血清不饱和铁结合力测定标准操作规程149-153LAB-SH-XMSOP-030血清电解质测定标准操作规程154-159LAB-SH-XMSOP-031糖化血红蛋白测定标准操作规程160-162回 顾 页回 顾 人回 顾 日 期修 订 页页码条目原内容修订后内容修订者批准者

5、修订日期页码条目原内容修订后内容修订者批准者修订日期页码条目原内容修订后内容修订者批准者修订日期一、血清总蛋白测定标准操作规程1 检验申请 单独检验项目申请：血清总蛋白测定(缩写TP)；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，置含分离胶的真空采血管（黄盖管）。 采用电子检验申请单，血标本试管粘贴附患者信息的条形码。 标本采集后，通过LIS及标本条形码管理系统记录标本采集时间。 标本采集后及时运送至医学检验中心。由标本处理中心负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 不合格标本.1 标本量不足：少于0

6、.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。.2 无法确认标本与申请单对应关系的。.3 其他如标识涂改、标本试管破裂等。注：严重溶血或脂浊的标本，应在检验报告中标注标本状况，并建议复查，并在工作日志中记录。2.2 标本保存 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 标本保存时间：室温（2025）下可稳定一周，普通冰箱中（48）稳定一个月，-20保存可稳定1年。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置28冰箱内保存7d。2.3 标本采集注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛状态。不建议采集抗凝血标本，如果必须

7、使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理双缩脲法。碱性溶液中的铜离子和蛋白质或多肽分子中的肽键反应，生成紫蓝色络合物，络合物在波长540nm处的吸光度和蛋白质的浓度成正比。4 试剂及其他用品4.1 试剂：双缩脲法测定总蛋白试剂盒，由贝克曼公司出品。4.2 试剂盒保存：避光保存于225，不开盖情况下至标签的失效期。开盖后放于仪器的试剂仓冰箱中可至少稳定30天。变质指示：正常试剂是清澈的蓝色溶液，当试剂浑浊或有黑色沉淀物时，表明已经变质，不能继续使用。4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。5 校准品与校准模式5.1 5.2 校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3 校

8、准液l蒸馏水复溶，无需特殊准备。5.4 校准周期：更换试剂批号或出现质控结果指示需重建标准曲线时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。6 质控品与室内质控规则质控液：Beckman Coulter AU 血清质控液Control Sera，货号ODC0003和ODC0004。6.3质控品测定：在每一测试批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4 质控规则：采用。6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器适用BECKMAN COULTER AU5800全自动生化分析仪。8 标本检测步

9、骤装载试剂进行校准进行质控输入标本检测项目加载标本标本测定结果复核报告。 9 主要分析参数GeneralLIHISERange 测试名称 1.TP 634类型血清6操作是 6 样品体积3.0mL稀释0mL OD区间预稀释率1稀释瓶外侧最小OD最大OD 试剂体积R1（R1-1） 25mL稀释65mL 试剂OD区间R1-2 mL稀释mL 最初低-2.0000 高2.0000R2（R2-1）25mL稀释10mL最后低-2.0000高2.0000共同试剂类型无名称无动态范围低30.0高120.0相关系数A1B0波长 主要540 6nm次要6606nm 制造商因子 A1B0方法END6反应斜率+6在线稳

10、定期天小时测量点1最初0最后27测量点2最初0最后10线性区间%滞后时间检查10 结果计算公式：仪器根据此公式自动给出每个标本的测定结果。11 检验结果的报告及范围11.1 结果报告 结果经审核确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、检验者和审核者，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：2290g/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.1 13 参考范围及医学决定水平参考范围：14 临床意义14.1 血浆

11、总蛋白包括血浆中所有蛋白质，其中主要有白蛋白和球蛋白两大类。血浆蛋白主要的生理功能是维持血浆胶体渗透压和pH值，作为载体运送多种物质，参与凝血和抗凝，免疫作用和营养作用等。14.2 TP-ALB球蛋白（含量），并可由此得出A/G比值。14.3 血清TP增高：多见于高免疫球蛋白症，由于肝脏合成蛋白质增多所致，如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、冷沉淀球蛋白血症等。各种原因失水所致血液浓缩时TP也增高。14.4 血清TP降低（60g/L）：多反映蛋白合成减少或丢失增加，主要见于各种慢性肝病，肾病综合征，急性肾炎和慢性肾炎伴有大量蛋白尿时，长期蛋白质摄入不足而致营养缺乏等情况。15 结果审核以及分析与相关

12、项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的可靠性负责。15.3 相关项目：审核与白蛋白、血清蛋白电泳等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析并查找原因。16 有关引用程序与文件16.1BECKMAN COULTER AU5800生化分析仪仪器标准操作规程。16.2生化检验室室内质量控制管理程序。16.3检验结果审核程序。16.4标本送检和接收程序。17 参考文献17.1 陆永绥, 张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.17.2 贝克曼总蛋白测定试剂盒说明书。17.3 Kaplan L

13、.A. and Pesce A.J. Clinical Chemistry: Theory, Analysis, Correlation, 2nd Edition. C.V. Mosby Co., 1989.二、 血清白蛋白测定标准操作规程1 检验申请 单独检验项目申请：血清白蛋白测定(缩写ALB)；组合项目申请：肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，置含分离胶的真空采血管（黄盖管）。 采用电子检验申请单，血标本试管粘贴附患者信息的条形码。 标本采集后，通过LIS及标本条形码管理系统记录标本采集时间。 标本采集后及时运送至医

14、学检验中心。由标本处理中心负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 不合格标本.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。.2 无法确认标本与申请单对应关系的。.3 其他如标识涂改、标本试管破裂等。注：严重溶血或脂浊的标本，应在检验报告中标注标本状况，并建议复查，并在工作日志中记录。2.2 标本保存 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 标本保存时间：室温（1525）下可稳定一周，普通冰箱中（28）稳定一个月，-20保存可稳定3个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。 已完成测试的标本保持完整的识

15、别号，置28冰箱内保存7天。2.3 标本采集注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛状态。不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。 方法原理溴甲酚绿法。在pH 4.2的溶液中，溴甲酚绿与白蛋白立即反应形成蓝绿色复合物，此复合物在波长600nm处的吸光度与白蛋白的浓度成正比。4 试剂及其他用品4.1 试剂：溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由贝克曼公司出品。4.2 试剂盒保存：避光保存于28，不开盖情况下至标签的失效期。开盖后放于仪器的冰箱中可至少稳定30天。开盖后避免污染。变质指示：当试剂有浊度时，不能继续使用。4.3 试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4 试剂盒

16、主要成分：柠檬酸盐缓冲液（pH 4.2）30mmol/L，溴甲酚绿0.26mmol/L，适量表面活性剂。5 校准品与校准模式5.1System Calibrator，货号OE66300。定标品白蛋白的值可溯源到IFCC（国际临床化学联合会） 标准品CRM470。校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3 校准液水复溶，无需特殊准备。5.4 校准周期：更换试剂批号或出现质控结果指示需重建标准曲线时；仪器进行全面保养后；仪器的重要零件更换后；均须进行一次校准。6 质控品与室内质控规则在Beckman Coulter AU 生化分析仪上测定Control Sera，货号ODC0003和ODC0004。

17、6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器适用BECKMAN COULTER AU5800型全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂进行校准进行质控输入标本检测项目加载标本标本测定结果复核报告。9 主要分析参数GeneralLIHISERange 测试名称 2.ALB 634类型血清6操作是 6 样品体积1.1mL稀释0mL OD区间预稀释率1稀释瓶外侧最小OD最大OD 试剂体积R1（R1-1） 32mL稀释 133mL 试剂OD区间R1-2 mL稀释 mL 最初低-2.0000 高2.0000R2（R

18、2-1） 0mL稀释 0mL最后低-2.0000高2.0000共同试剂类型无名称无动态范围低 15.0高 60.0相关系数A1B0波长 主要 6006nm次要 8006nm 制造商因子 A1B0方法END6反应斜率+6在线稳定期天小时测量点1最初0最后1测量点2最初最后线性区间%滞后时间检查10 结果计算计算公式：白蛋白浓度（g/L）仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11 检验结果的报告及范围11.1 结果报告 结果经审核确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、检验者和审核者，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在

19、报告单上指出。11.2 报告范围：1052g/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能13 参考范围及医学决定水平13.1 参考范围：13.2 医学决定水平：13.2.1 20g/L：低于此值，肝病患者提示严重预后不良。还应测定尿蛋白，以查明有无过多的蛋白丢失。13.2.2 35g/L：此亦为参考值下限，凡低于此值时，各种引起白蛋白降低的因素均应列入考虑范围，如肾病 57g/L：在此值以上的，应考虑脱水的可能性，并进行红细胞比积测定，以检查其是否增高。14 临床意义14.1血浆白蛋白的生理功能很多，包括营养、维持渗透压

20、、是血管内多种物质的运输载体等。白蛋白在肝脏中合成，是监测肝脏疾病的一个重要指标。14.2肝脏疾病使白蛋白的合成减少表现为血清白蛋白浓度降低，并与肝脏病变的严重程度成比例，白蛋白是肝功能分级的评价指标之一。14.3血清白蛋白降低还见于严重的吸收不良、肠梗阻、风湿热、恶病质以及多种全身性疾病。14.4当有蛋白质丢失过多的情况，如大面积烧伤、肾病综合征、慢性肾炎、糖尿病、慢性肠炎、肿瘤、充血性心力衰竭等，血清白蛋白也常降低。14.5白蛋白15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的可靠性负责。15.3 相

21、关项目：审核与总蛋白、血白蛋白电泳、丙氨酸氨基转移酶等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 有关引用程序与文件16.1 BECKMAN COULTER AU5800系列自动生化分析仪仪器标准操作规程。16.2生化检验室室内质量控制管理程序。16.3检验结果审核程序。16.4标本送检和接收程序。17 参考文献17.1 陆永绥, 张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.17.2 贝克曼白蛋白测定试剂盒说明书。17.3 Kaplan L.A. and Pesce A.J. Clinical Chemistry: Theory, Analys

22、is, Correlation, 2nd Edition. C.V. Mosby Co., 1989.三、血清总胆红素测定标准操作规程1 检验申请 单独检验项目申请：血清总胆红素测定(缩写TBIL)；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，置含分离胶的真空采血管（黄盖管）。 采用电子检验申请单，血标本试管粘贴附患者信息的条形码。 标本采集后，通过LIS及标本条形码管理系统记录标本采集时间。 标本采集后及时运送至医学检验中心。由标本处理中心负责标本的接收并记录标本状态，对不合格标本予以拒收。 不合格标本.1 标本量不足：少

23、于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。.2 无法确认标本与申请单对应关系的。.3 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 注：严重溶血或脂浊的标本，应在检验报告中标注标本状况，并建议复查，并在工作日志中记录。2.2 标本保存 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标本注意避光保存。室温（1525）下可稳定2h，普通冰箱中（28）稳定2天。-20度可以稳定1个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭并覆盖湿巾。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置28冰箱内保存7天。2.3 标本采集注意事项 采血前使受检者保持

24、平静、松弛状态。不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理钒酸氧化法。 在pH 3附近时使样品中的表面活性剂与钒酸互相作用，则样品中的总胆红素会被氧化为胆绿素。这时胆红素特有的黄色就会减少，因此只要测定钒酸作用前后的吸光度差，即可求得样品中的总胆红素的浓度。4 试剂及其他用品4.1 试剂：总胆红素试剂盒，4.2 试剂盒保存：保存于235，试剂未启封情况下可稳定至标签的失效期。启封试剂在仪器的试剂仓冰箱中可至少稳定30天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，或空白吸光度0.5时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3 试剂盒准备：液体双试剂，开盖即用

25、。4.4试剂盒主要成分：R1. 缓冲液 柠檬酸缓冲液 pH 2.9 0.1mol/L， 含有表面活性剂R2. 钒酸溶液 磷酸缓冲液 pH 7.0 10mmol/L； 钒酸钠 4mmol/L5 校准品与校准模式5.1 校准品5.4 6 质控在Beckman Coulter AU 生化分析仪上测定Control Sera，货号ODC0003和ODC0004。6.3质控品测定：在每一测试批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4 质控规则：采用。6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器适用BECKMAN CO

26、ULTER AU5800全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂进行校准进行质控输入标本检测项目加载标本标本测定结果复核报告。9 主要分析参数GeneralLIHISERange 测试名称 3.TB634类型血清6操作是 6 样品体积3.5mL稀释0mL OD区间预稀释率1稀释瓶外侧最小OD最大OD 试剂体积R1（R1-1） 80mL稀释 0mL 试剂OD区间R1-2 mL稀释 mL 最初低-2.0000 高3.0000R2（R2-1） 20mL稀释 0mL最后低-2.0000高3.0000共同试剂类型无名称无动态范围低 0高 400.0相关系数A1B0波长 主要 4506nm次要 5406

27、nm 制造商因子 A1B0方法END6反应斜率+6在线稳定期天小时测量点1最初10最后27测量点2最初最后线性区间%滞后时间检查10 结果计算计算公式：总胆红素浓度（mol/L）×校准液总胆红素浓度(mol/L)仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11 检验结果的报告及范围11.1 结果报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、检验者和审核者，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：5200mol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说

28、明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。13 参考范围及医学决定水平参考范围：020mol/L 14 临床意义14.1 血清总胆红素和结合胆红素多用于黄疸的诊断和黄疸性质鉴别。由于胆红素和肝脏功能密切相关，总胆红素是重要的常规肝功能指标。14.2 各种原因引起的黄疽都有血清总胆红素增高，如胆汁性肝硬化、胆道梗阻、阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸，如肝炎、肝硬化，溶血性黄、新生儿黄疽或输血错误。14.3 血清总胆红素可作为暴发型肝衰竭（FHF）和自体免疫性肝炎（AIH）预后死亡的独立危险因子，TBIL255µmol/L预测FHF预后死亡的敏感性为77.5%，特异性为46.8%。15 结果审核

29、以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的可靠性负责。15.3 相关项目：审核与直接胆红素（DBil）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、g-谷氨酰转移酶(GGT)的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析并查找原因。16 需引起重视的“警戒值”及报告规定16.1 大于255µmol/L为应引起临床重视的警戒值，可能有较严重的肝细胞坏死或暴发型肝衰竭的情况。16.2 处理程序 检测人员立即报告审核者。 审核者首先根据审核程序，分析质控、定标、试剂的情况是否正常，当天其他已做标本本项目

30、的总体情况有无异常，确认实验有关的基础是在正常状态中。 出现警戒值的标本有无异常，该标本其他相关项目有无异常，尤其是该患者其他肝功能的情况。 对该标本进行一次重复测定，确认警戒值是否重现。 如结果重现警戒值，并达到中心规定的“危急值”水平，及时与临床方面联系，再次确定该警戒值是否受到非实验因素的影响，同时告知临床方面引起注意，并做好电话接听记录。 如认为实验结果很可能存在非实验因素的影响，可以要求对病人重新采样进行复查。如认为警戒值出现与病人临床表现相关，具有合理性，及时签发正式检验结果报告。可以备注请临床方面注意病人状况，建议复查等。17 有关引用程序与文件17.1 BECKMAN COUL

31、TER AU5800系列自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生化检验室室内质量控制管理程序。17.3检验结果审核程序。17.4标本送检和接收程序。18 参考文献18.1 Tietz N.W. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd Edition, , 1987.18.2 陆永绥, 张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004. 18.3 和光总胆红素试剂盒说明书。四、血清结合胆红素测定标准操作规程1 检验申请 单独检验项目申请：血清结合胆红素测定(缩写DBIL)；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2

32、 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，置含分离胶的真空采血管（黄盖管）。 采用电子检验申请单，血标本试管粘贴附患者信息的条形码。 标本采集后，通过LIS及标本条形码管理系统记录标本采集时间。 标本采集后及时运送至医学检验中心。由标本处理中心负责标本的接收并记录标本状态，对不合格标本予以拒收。 不合格标本 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 无法确认标本与申请单对应关系的。 其他如标识涂改、标本试管破裂等。注：严重溶血或脂浊的标本，应在检验报告中标注标本状况，并建议复查，并在工作日志中记录。2.2 标本保存 接收标本后在30min内将标本离心分

33、离出血清。 标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标本注意避光保存。室温（1525）下可稳定2h，普通冰箱中（28）稳定2天。-20度可以稳定1个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭并覆盖湿巾。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置28冰箱内保存7天。2.3 标本采集注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛状态。不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3 方法原理钒酸盐氧化法。 在pH 3附近使样品中的胆红素与钒酸相互作用，则样品中的直接胆红素就会被氧化为胆绿素，这时，胆红素特有的黄色就会减少，因此，通过测定钒酸作用前后的吸光度变化，就可以求出

34、样品中的直接胆红素浓度。4 试剂及其他用品4.1 试剂：直接胆红素试剂盒，由日本和光公司出品。4.2 试剂盒保存：保存于210，试剂未启封情况下可以稳定至失效期。启封试剂在仪器的试剂仓冰箱中至少可稳定30天。4.3 试剂盒准备：即开即用，无特殊准备。4.4 试剂盒主要成分：R1. 缓冲液 酒石酸缓冲液 pH 2.9 0.1mol/L 含有表面活性剂R2. 钒酸溶液 磷酸缓冲液 pH 7.0 10mmol/L； 钒酸钠 4mmol/L5 校准品与校准模式5.1 校准品5.4 校准周期：6 质控品与室内质控规则在Beckman Coulter AU 生化分析仪上测定Control Sera，货号O

35、DC0003和ODC0004。7 适用仪器适用BECKMAN COULTER AU5800全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂进行校准进行质控输入标本检测项目加载标本标本测定结果复核报告。 9 主要分析参数GeneralLIHISERange 测试名称 4.DB 634类型血清6操作是 6 样品体积3.5mL稀释0mL OD区间预稀释率1稀释瓶外侧最小OD最大OD 试剂体积R1（R1-1） 80mL稀释 0mL 试剂OD区间R1-2 mL稀释 mL 最初低-2.0000 高3.0000R2（R2-1） 20mL稀释 0mL最后低-2.0000高3.0000共同试剂类型无名称无动态范围低

36、0高 171.0相关系数A1B0波长 主要 4506nm次要 5406nm 制造商因子 A1B0方法END6反应斜率+6在线稳定期天小时测量点1最初10最后27测量点2最初最后线性区间%滞后时间检查10 结果计算计算公式：结合胆红素浓度（mol/L）仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。11 检验结果的报告及范围11.1 结果报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、检验者和审核者，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：2mol/L143.9mol/L。超过此范围的结

37、果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能14 临床意义14.1 血清结合胆红素常和总胆红素一起用于黄疸的诊断和黄疸性质鉴别。结合(直接)胆红素是重要的常用肝功能指标。14.2 肝炎、肝硬化时肝细胞受损引起的肝细胞性黄疸和胆汁性肝硬化、胆道梗阻等所致的梗阻性黄疸，均有结合胆红素增高的情况。15 结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的可靠性负责。15.3 相关项目：审核与总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、g-谷

38、氨酰转移酶(GGT)的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16 有关引用程序与文件16.1 Beckman Coulter AU5800型全自动生化分析仪标准操作规程。16.2生化检验室室内质量控制管理程序。16.3检验结果审核程序。16.4标本送检和接收程序。17 参考文献17.1 Tietz N.W. Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd Edition, , 1987.17.2 陆永绥, 张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.17.3 和光结合胆红素试剂盒说明书。五、血清总胆汁酸测定标准操作

39、规程1 检验申请 单独检验项目申请：血清总胆汁酸测定(缩写TBA)。组合项目申请：肝功能测定加选本项目。临床医生根据需要提出检验申请。2 标本采集与处理2.1 标本采集 常规静脉采血约2ml，置含分离胶的真空采血管（黄盖管）。 采用电子检验申请单，血标本试管粘贴附患者信息的条形码。 标本采集后，通过LIS及标本条形码管理系统记录标本采集时间。 标本采集后及时运送至医学检验中心。由标本处理中心负责标本的接收并记录标本状态，对不合格标本予以拒收。 不合格标本.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。.2 无法确认标本与申请单对应关系的。.3 其他如标识涂改、标本试管

40、破裂等。注：严重溶血或脂浊的标本,应在检验报告中标注标本状况，并建议复查；并在工作日志中记录。2.2 标本保存 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 标本保存时间：标本在冰箱中（28）稳定一周，-20可保存1个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。 已完成测试的标本保持完整的识别号，置28冰箱内保存7天。2.3 标本采集注意事项 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。 各种抗凝固剂一般用量时对测值无影响。3 方法原理循环酶法。胆汁酸被3a-羟基类固醇脱氢酶（3a-HSDH）及-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）氧化，生成3

41、酮类固醇及-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。生成的3酮类固醇在3a-羟基类固醇脱氢酶及-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）存在下，生成胆汁酸及-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）。如此进行循环反应，最后测定生成的-硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）的吸光度，求得胆汁酸浓度值。4 试剂及其他用品4.1 试剂：酶循环法测定总胆汁酸试剂盒，由日本第一化学株式会社出品。4.2 试剂盒保存：保存210，试剂未启封情况下可稳定至标签的失效期。启封使用后在仪器的试剂仓冰箱中可以稳定30天。4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备

42、。4.4 试剂盒主要成分：TBA底物液：-硫烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型(Thio-NAD)； 缓冲液TBA 酶 液：-烟酰胺腺苷二核苷酸还原型(NADH)；3-羟类固醇脱氢酶（3-HSD）；缓冲液5 校准品与校准模式5.1 校准品：与试剂盒配套的TBA标准液。5.2 校准类型和数目：线性模式，1个校准点。5.3 校准液重建方法：即开即用，无需特殊准备。5.4 注：更换试剂批号或出现质控结果指示需重建标准曲线时；当仪器进行全面保养后；重要零件更换后；均须进行一次校准。6 质控品与室内质控规则在Beckman Coulter AU 生化分析仪上测定Control Sera，货号ODC0003和ODC

43、0004。6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4 质控规则：采用Westgard多规则质控规则。6.5 如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7 适用仪器适用OLYMPUS AU5800系列全自动生化分析仪。8 标本检测步骤装载试剂进行校准进行质控输入标本检测项目加载标本标本测定结果复核报告。 9 主要分析参数GeneralLIHISERange 测试名称 5.TBA634类型血清6操作是 6 样品体积2.0mL稀释0mL OD区间预稀释率1稀释瓶外侧最小OD -2.0000最大OD 3.0

44、000 试剂体积R1（R1-1） 135mL稀释 0mL 试剂OD区间R1-2 mL稀释 mL 最初低-2.0000 高3.0000R2（R2-1） 45mL稀释 0mL最后低-2.0000高3.0000共同试剂类型无名称无动态范围低 0.0高 80.0相关系数A1B0波长 主要 4106nm次要 6606nm 制造商因子 A1B0方法RATE6反应斜率+6在线稳定期天小时测量点1最初15最后22测量点2最初最后线性区间30%滞后时间检查否10 结果计算计算公式：胆汁酸浓度（mol/L）（测定管A/校准管A）×校准液TBA浓度（mol/L） 仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。1

45、1 检验结果的报告及范围11.1 结果报告 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、检验者和审核者，并有与申请单相同的医学信息。 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：2.5mol/L100mol/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12 操作性能12.1 精密度： CV<5%。12.2 线性范围：2mol/L50mol/L。12.3 方法的有限性及干扰因素： 胆红素（50mg/dL），乳糜(Formazine浊度为3000），血红蛋白500mg/dL，抗坏血酸100mg/dL为止，对测值几乎无影响。 进餐后血清中胆汁酸浓度上升，请注意采血时间。不进行负荷实验时，请早晨空腹采血。13 参考范围及医学决定水平参考范围：14 临床