非试管繁殖-基础

1、一母本培养是植物非试管克隆的基础植物非试管克隆技术体系的建立与在生产上的运用,与常规的各种育苗方法有很大的不同,在于它能把各种差异性较大的植物种类或品种能够统一到一种标准化操作模式上。不会像传统扦插与组培一样存在较多的配方,它主要是依靠植物自身的自养能力来完成生根发育过程,一切外源药剂的处理,只作为一种辅助措施被运用,而传统的人工扦插或组培,全凭于人工药剂或配方,导致生产上出现技术操作繁琐性与结果的不一致性。而非试管克隆技术主要发挥材料自身的自养能力,主要发挥离体材料本身存在的本能,来完成生根发育过程,通过母本的培育把材料统一起来,再通过计算机的控制,把多变的环境统一起来,这样就可以大大缩小母

2、本材料差异及配方的差异,而引起生根与发育上的差异。可以把许多不同种类与品种的植物,运用相同的一种模式进行快繁,可以达到一致而整齐的育苗效果。运用母本幼化技术诱导童性,激发本身所存在的强大无性繁殖本能,来实现生产上的快速繁育。所以母本的建设是实现材料一致性与生理状态最优化的首要环境,一切不利生根的因子,都可以在母本管理时得以纠正,使母本的发育从依赖药剂配方转为母本管理的优化着手。1.母本园建设与管理是实现生根一致性的关键植物非试管克隆技术是植物离体材料利用自身营养器官叶片的光自养能力,为切口根原基的发育,提供所需的天然激素与营养,这是成活的机理与关键所在,在繁殖生根过程中,叶片充当了组培技术中培

3、养基的作用,也就是说叶片提供了碳源矿质营养与激素,是根原细胞启动发育的能量源与营养源,叶片的生理机能及所含的营养,对于生根起到关键性的调控作用。作为天然培养基的叶片,它的生理功能受母本植株的生长发育影响是最大的,如太幼嫩的叶片,光合面积小,光合产物积累少,会出现碳源的不足,从而影响生根。另外,过于幼嫩的材料C/N小,矿质营养含量不齐全或不平衡,也会影响根源基的发育。过于幼嫩的材料虽然有高的生长激素含量,但细胞分裂素含量却过低,也对于切口部位细胞的分裂受到影响,它与组培一样要求有适宜的生长激素与细胞分裂素间的合理比例,当碳源充足,矿质营养齐全,内源激素比例合理时,根源基的发育就能正常进行,与组培

4、生根培养的原理一样。在生产中,选择具有含量适宜,活性较强的叶片作为天然培养基是极为关键的。但是,生产中涉及的品种很多,不同的品种它生根培养所需的营养与激素又不相同,就像组培一样,基本培养基相似,但不同的植物间还要靠适当的调节才能适合不同植物的生长,这种调节方法有两种路径来实现,就是母本植株生长发育的人工调控,另外就是快繁时外源营养与激素的补充与调节。如太幼嫩、碳源低的离体材料,或进行补糖处理,但它在操作过程中,常会造成切口病菌的滋生,实际运用效果受到影响。对于过老的或衰弱母本上所取的材料,常会出现内源生长激素匮乏,及矿质营养成分的固定,难以在快繁过程中发挥作用,所以要进行切口的处理,以补充内源

5、激素的不足,越老化的材料,生长激素或其它活性物质处理的时间相对就要延长,而且这种处理是要通过多次科研试验才能获取,否则也会造成盲目性,虽然处理了但药剂种类浓度、时间不适合也影响生根成活。所以在生产上,依靠植物叶片自身所含的最佳营养与激素是快繁基础的基础,只有调控好母本的适合生长状态,使叶片所含的成分适合,活性代谢旺盛,就能使难以把握的药剂处理得以简化,提高快繁的成活率与可操作性。否则在快繁过程中,因不同植株或不同部位、不同叶龄的离体材料要进行分类处理,否则难以达到理想的效果,而这种操作在生产上是存在一定难度的。解决这种材料不一致性给生产带来的问题,可以通过对母本的规范化、标准化管理来实现,如对

6、母本进行大肥大水管理,提高叶片的生理活性与营养物质的含量,通过母本幼化与修剪来提高母本材料的生理整齐度,只有生理状态相似,材料整齐的母本材料,才可用相同的药剂与相同的时间进行处理,这样就有利于生产操作,也有利于整齐地生根与移栽。生产上母本园的管理,一定要围绕叶片的生理调控而展开,如定期的追肥管理,合理的配方施肥,土壤的科学灌溉,或者母本园的适当遮荫管理,以及叶片的营养液喷施和激素的调控,母本树修剪及三园配套等技术措施,这些措施的实施都是为了使离体材料的叶片有最佳的天然培养基成份。只有叶片本身具有最佳的天然培养基成分,再通过科学的环境控制及药剂调节与养分补充,才可以使根原基因启动发育成完整的植株

7、。母本园是快繁时用于采集离体材料的植株,在快繁工程启动培育第一批第一代苗时,往往因母本的生长不一致,以及采集材料时离体材料在母本植株上位置的不一致性,导致快繁时,材料的发育不一致,表现为生根及长势参差不齐,或成活率不稳定现象。为了获取整齐而且有活力的离体材料,要求母本园的建立需采用“三园配套轮流采集”的模式建园。而且要对母本园实施配方施肥复壮速生栽培,培养出活力强而营养充足的快繁材料。具体实施时可以这样操作:第一代快繁成活的小苗,不宜急于作为商品苗出售,而是把它作为母本苗进行栽植建立母本园,并且把母本园划分为三个区,我们叫三园配套,即三园轮流采集材料。移栽后的小苗最好栽培在肥水条件较好的地片,

8、或栽植于人工配制的营养土中,也可栽于土壤而且结合营养液滴灌(也叫土耕养液栽培,这样可使苗木多发新枝,健壮枝,在管理中还需加强病虫害的防治,每间隔1015天进行一次农药防治,也可结合根外追肥进行。对于肥水的管理,一般母本园每隔1015天进行一次土壤追肥或滴灌施入。萌芽力差的品种或长势弱的还可用40ppm的920喷施,以促进植物茎的生长,也可使一些处于休眠状态的芽快速萌发生长。这样可大大加快苗木生枝长叶的速度,也可使植物的童性得到诱发,使离体材料的细胞活性增强,切口愈合与生根都会加快。技术操作时,可对三园进行人为标定,分别设一区、二区、三区,第二批苗快繁时可从一区取材,并且采集材料后要追施还阳复壮

9、肥,第二批快繁时可从二区取材,同样采集后要施复壮肥,第三批从三区采集快繁,这样周而复始轮流进行,让每一个区都有相当长的一段时间处于生长复壮阶段,以免同一区上边续采集,造成营养积累不足,造成快繁苗长势衰弱,成活低的营养退化现象。采用这种三园配套轮流取材的模式,才能实现每次取材快繁的材料,都是营养充实生长旺盛的离体材料,这样快繁生根既整齐而成活率高。采用三园配套,也是实现以苗繁苗实现多代循环,达到种苗数量几何级扩增的最理想方法,通过以苗繁苗的方式进行扩繁,会启发植物的童性,让生根越来越快,时间越来越短,即使一些平时较难生根快繁的品种,运用以苗繁苗的多代循环技术后,也可以达到很理想的生根效果。2.活

10、化母本基因促发强大生根能力的管理方法不管是组培育苗还是扦插育苗,大多在过程中找配方求方案,这样难以达到良好的效果,如果在取材前就对母本进行特殊管理,以活化激发母本内与生根相关的基因,培育形成具有强大生根能力与活性的离体材料,才是解决众多植物难生根问题的根本技术途径。前面已提及任何植物无具有强大无性繁殖之本能,是因环境的变化与不适气候的影响,使它向有有性繁殖的进化,只需创造适合的环境与最适的生理状态,所有植物都可恢复它的无性繁殖能力。其中环境的创造可以由计算机模拟控制技术得以实现,而材料自身生理状态的调节者,全赖于母本园的科学管理,现从各种管理措施,对母本生理生化调节的影响与生产上所要采取的田间

11、措施,作些介绍。(1母本幼化技术:在快繁工程启动时,每一步要做的工作就是母本幼化,可以利用一年生的苗建立母本园,或用第一代快繁苗建立,这些年龄小的植株,具有较易生根的潜能,许多难繁殖生根的品种,从幼苗上取材后,都可达很高的成活率。(2大肥大水管理:肥水充足是旺盛生长的保障,只有让植株处于旺长期,才可以使材料内的生长素含量大大提高,酶的活性大大加强,细胞分裂分化能力才得以强化。但苗的管理,要遵循薄肥勤施的原则进行,还经进行配方施肥,防止元素缺乏症的产生,以有机肥为底肥,以速效化肥为追肥的配方施肥技术,通常在底肥充足条件下,每隔1015天进行追肥,看苗势用肥,促进生长可用尿素,促进壮实可用复合肥。

12、还可结合根外追肥,叶面喷施尿素、磷酸二氢钾或硼砂,这些元素叶面吸收快,对提高叶片光合效率效果明显。也可结合土耕养液技术,通过滴灌向土壤施入全价营养液肥,生长还会更快更好,只有好的长势才有好的生根效果。(3病虫管理:得了病虫害的植物枝叶,体内脱落酸的含量会骤升,生长素含量明显降低,这样的材料快繁是极为不利的,虽然在取材时可能不会取病虫害的材料,但得病虫危害的植株,总体的内源生长激素会下降,甚至还有信息传导现象,也就是一些植物一株得了病虫病,它会把这个信号传递给周围环境的植物,从而也使周边植物体内产生抗逆生理的变化,而抗逆产生的因子中,脱落酸是种最为关键的激素,而脱落酸是抑制生根的一种主要物质。在

13、管理时要做到整个母本园病虫害的有效控制,才可保障取得的材料有较好的生根发育效果。在生产中要做到以防为主,每隔半月进行一次全面的病虫害防治,防病以喷施电功能水中的酸水为主,防虫以相应的杀虫剂喷施。喷施时注意药害的产生,最好以浓度偏低,喷水量增多为好,发生药害的植株,对快繁成活也会带来很大的影响。在使用电功能水进行杀菌防病时,最好采用与碱水结合交替喷洒较好,这样可避免一些对酸敏感品种的药害,而在使用酸水或碱水时,不能与碱性或酸性农药混合,否则酸碱反应而影响防效。(4整形修剪以壮梢:母本园管理上常用的整形修剪技术有:修剪整形、重截促萌,还可结合疏枝与摘心方法进行促壮。对于母本园采用修剪技术,可以让每

14、株母本抽发新梢的部位高度一致,有利于获取更多生理性状一致的离体材料,同时修剪后会萌发更多的营养枝,可以提高扩繁系数。像道路两傍的绿篱,越剪抽发量越多而越整齐,是促进营养生长的一种好方法,另外对于树龄渐大的母本园,可阶段性地进行重截,有利于植株的更新,与降低发枝部位,幼化生理年龄,更利于生根。对于伸长生长过快,不利于木质化的枝条,可于繁殖前进行摘心,有利于半木质化与木质化的速度,而且使营养更多地积累于叶与芽茎中,更利于快繁时生根与壮苗。对过密纤弱枝进行疏枝,以达到枝壮而旺的效果。通过上述方法,结合培育的枝梢,生理状态上会得到大大的改善,对生根发育来说具有很大的促进。(5母本园的更新与激素调控:对

15、于木本植物母本园,一般3年一更新,或者生长快速的品种一年一更新,利用快繁的小苗进行以苗繁苗的循环增殖,让每一代苗的育苗材料年龄与枝龄都不超过一年,这样植物的童性才能更大的发挥,生根培育才有利。对于开花结果的品种可以采用人工摘蕾去花,以维持营养生长状态,或者用各种生长激素或赤霉素处理,抑制花芽的形成。木本植物可于花芽分化期喷施40100ppm的赤霉素,可大大抑制花芽的形成,让植株维持在营养生长阶段,对于草本植物可以进行摘花去蕾。开花的植株一方面会消耗大量的营养,另一方面会使植株产生大量的脱落酸而抑制生根。也可以通过喷施外源生长素,以提高内源激素水平,这对于一些难生根植物的促根效果也是较明显的,一

16、般可用10ppm左右的IBA进行叶面喷施,上述激素喷施可与根外追肥结合效果更佳。(6设施栽培,周年繁育:在有条件的地方,最好把母本植株栽于设施大棚内,可大大延长营养生长期,或者不休眠周年生长,这对于提高种苗产量,促进生根来说也是非常重要的,大多数植物一旦进入休眠或半休眠状态,体内就会合成大量的抑制生根物质脱落酸。所以母本园的设施化栽培,滴灌结合的营养液施肥,对于种苗工程与产业化发展来说是极为重要的,在设施条件下可减免自然恶劣环境与灾害天气对于生长的影响,而且还可结合设施技术与控制技术,优化环境创造最利于营养生长的气候条件,让植株长得更快更好更壮,这样生根率与种苗的商品率都会得以大大提高。现在对

17、于一些高档品种的母本园栽培,大多采用无土养液栽培,或者采用土耕营养液法,这两种方法比传统土壤栽培生长更快,母本材料的生理状态更佳,细胞活性更强,更利于快繁取材。母本的科学管理是提高种苗扩繁系数与成活率商品性的关键,可以结合现代设施技术、栽培技术、生理生化调控技术,让其处于最佳的,最利于无性繁殖的生理状态,是现代种苗快繁工程中最为关键的一个技术环节,也是实现种苗工厂化生产最为基础与重要的一步,与传统种苗生产只重视育苗操作环节的理念相比是一大创新与突破。二按标准操作是实现种苗工厂化生产的关键母本园管理的标准化与计算机控制的智能化结合后,就像组培技术中的MS基本培养基配方,把植物对营养的需求进行了统

18、一,而组培室环境控制,对离体材料发育环境进行了统一,这样就可以避免了传统生产凭经验判断的盲目方式,也避免不可控因素对于离体材料生根发育的影响。只要在对离体材料处理环节进行标准化,如材料制作及药剂处理的标准化,就形成了一项具有较大适普性的实用操作技术,不管是什么品种材料全都按这个标准操作,形成了母本园管理、材料制作到智能化管理的一整套生产流程与规范,把传统生产方式存在的因植物种类繁多、季节多变、经验丰缺而存在的操作差异行到有效的统一,让传统众多的药剂处理配方或者材料制作方法都统一到一个标准上来,为种苗生产技术真正走向工厂化、普及化开辟了一条崭新的路径。1.离体材料制作离体材料的制作因植物种类不同

19、而有所差异,但不管属于哪类植物都可按以下标准操作。即像组培的茎尖培养一样,只需取细胞分生能力强的茎尖即可。非试管克隆也是同样的道理,都是为了让所取得的离体材料有较好的生理状态,具有活力更强的细胞组织,具有更多的光合面积与营养积累,具有更适的内源激素含量,从这些原理出发来制作离体材料。(1首先从取材的时间上,一般以一天的上午为好。因植株内源激素动态变化的趋势一般是810点前的上午,枝叶内会有更多的内源生长激素存在,更利于生根。特别是夏季高温天气下,中午植株会出现午休现象,植株内的脱落酸会骤然升高,气孔关闭,光合下降,此时如取材快繁,肯定会影响成活。另外运输途中不宜过长或失水,离体材料运输中一定要

20、注意保湿,一旦失水后,体内的内源生长激素也会降低,而使抗逆的脱落酸大量形成,另外还要防止层层堆积造成发热,长距离运输最好把枝条成捆,整齐地插入水桶中,让其保持吸水状态。另外,防止枝叶揉捏挤压损伤,这些因素都会导致离体材料内源激素的不利变化,如脱落酸及乙烯的大量形成,对生根抑制影响较大。所以,母本园就地建设是较为重要的,最好做到边取材制作边处理快繁,让生理状态最佳的材料,以最短的时间进入智能化管理的快繁苗床。如植物中的绿化品种红栌,取材后1小时快繁与立即快繁成活率就相差很大。特别是快繁草本植物时,失水更快,甚至在夏季高温天气下,几分钟就开始失水萎蔫,最好能做到以最好的生理状态枝,以最短的时间处理

21、快繁。(2利用经电功能水或者酒精消毒的剪刀或者刀片,作为切制离体材料的工具,切制时要求动作利索不起毛边保证光滑,这样有利于切口的愈合。操作时针对不同的材料,制作成不同类型的离体材料,针对茎节明显的植物,可以采用一叶一芽法或者一叶两芽法,也可以是两叶两芽。切制是从芽的对面紧靠节的部位开始以45°角呈马耳形下切,这样比平切具有更大的表面积,生根量更大,也会产生更多的创伤激素,对防止外界细菌感染起保护作用。另外,紧靠节的部位,营养贮藏比节间要多,而且形成层细胞也较活跃,根原基细胞丰富更利于生根成苗。上切口于芽的稍上部位平切,不能破芽剪,留小段茎节保护芽的生长,这个芽往往成苗后就成为植株的主

22、干。对于留叶多少、大与小,一般长度超过810cm的大叶,可以适当地剪去三分之一或一半,有些羽状复叶的可仅留基部12张小叶为好,过大过长的叶片,不仅没促进作用还会加大营养物质呼吸消耗及水份失衡,或因营养积累而产生光合抑制现象。对于茎叶莲生或者丛生类的植物,可以取基部的萌蘖芽枝作为材料,这些大多是一些草本植物;对于地下茎类与块茎类的植物,可以进行棋盘状或放射星状,进行纵或横向切块,如半夏、百合、贝母等;对于一些茎节类没有芽眼的植物,如金钱树,薯蓣带茎的叶片进行快繁,在发育过程中它会在基部形成具有小芽的块茎,发育后就成为繁殖体小苗。还有一些仅用一张叶或半张叶进行快繁,比如虎皮兰、多花筋骨草,一张叶可

23、繁育出几株或几十株小苗。对于休眠期落叶的木本植物,取23节的枝段作为快繁材料,切口制作与带叶离体材料制作相同。材料的大小要适宜,过大繁殖系数低,过小繁殖系数虽高,但材料对外界环境的抗逆性会有所降低。2.离体材料处理离体材料的处理,在植物非试管克隆技术体系中不是主导因素,它只起到调节促进与辅助的作用,对于一些难生根的植物种类或者第一代苗启动培养时,却可起到极为重要的促进作用,也是快繁过程中不容疏忽的一个重要环节。也就是对于内源激素比例含量的调节,对于糖的调节,对于生长素激活剂的调节,对于抑制障碍物质清除的调节,这里就常用的几种进行介绍。(1生根阻碍物质的清除:对难以生根的植物,在处理离体材料时,

24、应首先考虑清除生根的有害物质,其生根能力往往能够得到显著提高。离体材料中含有阻碍生根的物质有单宁、树胶、松节油、香脂及其他树脂,具有挥发性的特殊成分和氧化酶等,但主要是除去离体材料中的单宁和其他特殊成分如氧化酶,减轻其有害作用。在处理时一般是将离体材料的基部,放进处理液中浸泡,要根据不同植物和母本年龄,选择适当的溶液,才能显示其效果。例如,樟树、一品红、冬青、卫矛等离体材料,用清水浸泡都能取得良好效果,用1%3%的酒精溶液处理杜鹃花科植物或洋蔷薇6h,以及用0.05%0.1%的硝酸银处理杨梅、栗等,用高锰酸钾的0.1%1%的水溶液对水蜡、女贞等许多树种的处理一般都有效果。上述各种处理,不仅清除

25、妨碍生根的物质或消除其有害作用,而且有的还能起到促进生根的作用。由于在清除妨碍生根物质的同时,离体材料中的生根所必需的物质,在一定程度上渗出而散失掉,因而有必要对生根所必需的物质进行补充。特别是生根困难的树种或品种,应对离体材料进行植物生长激素、维生素、糖类、氮素化合物等的补充处理,主要方式是浸泡法或叶面喷施法。(2生根促进物质处理:对于离体材料中含量不足,而且又是生根所必需的物质进行补充,以提高离体材料的生根能力。这类处理中,除了以植物生长激素处理为主体外,还有用维生素、糖类和含氮化合物等进行处理。在这些生根物质促进处理中,以植物生长激素的应用最广泛,对许多生根不良的植物,处理效果都很显著,

26、可单独进行,也可和其他药剂或处理方法并用,更能增强处理的效果。植物生长激素的种类很多,作为生根促进剂常在生产上应用约有吲哚丁酸、吲哚乙酸、萘乙酸以及萘乙酰胺等。在实际应用中都具有显著效果,但是随着植物种类乃至品种的不同,药剂的效果往往有很大的差异,如果植物生长激素的种类选用不当,反而会引起药害,降低快繁成活率。例如,大叶蔷薇用吲哚丁酸处理具有促进生根的效果,用萘乙酸处理就没有效果;而相反,水蜡树用萘乙酸处理有效果,用吲哚丁酸却没有效果,无刺槐用萘乙酸处理,促进生根的效果非常显著;从柳杉、松类来看,萘乙酸处理的效果却比较差,而且不稳定。因此,在进行处理时,应注意植物生长激素的种类,不要用错。为了

27、解决这个问题,使药剂能适用于多种树种或品种,可以将药剂混合使用。有的树种的离体材料,进行一次处理不能完全达到目的,需要进行再处理才能取得显著效果。ABT生根粉是一种复合型植物生根促进剂,具有高效和广谱性。处理的容器避免用金属制品,因金属制品容易降低药效,可用玻璃、聚氯乙烯或磁制的清洁容器。处理场所最好选择阴凉而不太干燥的地方,在这样的条件下温度较低,能取得持续稳定的效果。离体材料应保持洁净和含水饱满的状态,基部切口朝下,不可颠倒,大致插入处理液中24cm深。处理后不要再浸水或用水冲洗,应直接进行快繁。如果进行大规模快繁育苗时,要采用大型容器,可将离体材料每2050根一捆,再进行药剂处理。在进行

28、生长素处理时,药剂的配制是首要环节,配制时可用母液法,先配成高浓度母液,使用时再稀释成适宜浓度的生产液。操作时将生根素1g粉剂,先溶于500g95%的酒精中,再加500g凉开水,即成为 1000mg/kg浓度的原液,使用时可根据不同植物种类离体材料生根要求加水稀释,对当时用不完或不用的原液,应用棕色玻璃瓶装好,放在5以下,避光处保存。对多数植物的快繁,一般用50100mg/的药液,对带叶嫩枝的离体材料浸泡约0.52 小时。如用ABTI号生根粉处理难生根植物离体材料时,应迅速放入浓度为50mg/的溶液中,深为24cm,阔叶树浸泡0.5l小时,针叶树浸泡12小时,成熟的老枝材料需浸泡46小时。采取

29、低浓度浸泡法的效果比较稳定,是植物非试管克隆技术普遍采用的离体材料处理办法,如赤松用,1OOmg/kg的吲哚乙酸,浸泡离体材料基部约l小时;日本落叶松用100mg/kg的吲哚丁酸浸泡4h生根率可达75%;香柏和沙地柏用50mg/的吲哚丁酸浸泡15h生根率有90%;青梅、山楂和银杏用吲哚丁酸 50300mg/浸泡2h其生根率都在80%以上。由于萘乙酸比较价廉,无论针叶树还是阔叶树,使用都比较普遍,如紫杉、刺槐、山茶、水蜡等树种,用奈乙酸处理,一般效果较好,没有发现药害。用速蘸法进行离体材料处理,在植物非试管克隆技术工作中,一般不易采用,因为嫩枝离体材料的表皮一般都比较光滑,采用速蘸法使其基部表面

30、上附有药物,在快繁时容易被擦掉,同时在智能间歇喷雾中,也很容易被流动的水冲刷掉。而采用浸泡法,能使药液吸收入离体材料体内,所以多采用低浓度的浸泡法处理离体材料,其效果也比较稳定。用生长素处理能提高离体材料生根能力,但必须指出,植物离体材料的生根,是一个极为复杂的生理过程,是植物本身的生物、生态、遗传学特性及与快繁时的环境条件 (温度、湿度、光照、空气有着密切的关系,是诸多生根内外因子综合作用的结果。而生长素的处理,是在上述条件作用的基础上,才能对离体材料不定根的形成起到促进作用。是离体材料进行生理调节的一种补充措施,在生产中通常采用100200ppm的生长激素处理12小时,对于难生根的品种可以

31、是500 1000ppm高浓度处理12小时,极难生根品种可以更长达1224小时,这些可因品种不同而选择不同浓度与时间,但上述两种浓度经实践证明,还是较为通用的浓度与处理时间,可以被绝大多数植物快繁上借鉴引用。(3营养物质处理:采用维生素、糖类、氮素化合物等物质,对离体材料进行处理,也是植物离体材料生根的必要因素。维生素处理:维生素类中的维生素H,就是生根所必需的物质生物素,但一般在离体材料处理中,用的是和维生素H作用相同的维生素B l。有人先用20200mg/吲哚丁酸溶液,对柠檬、山茶进行20h的处理,然后再用lmg/kg的维生素B1,稀释溶液进行l2h处理,取得了显著的效果;将维生素Bl和植

32、物生长素并用,处理茶树、果树的离体材料,生根都有良好作用。用维生素B2、B6、B l2和维生素C,处理植物离体材料都有助于生根,如杜鹃离体材料用B l处理,已成为常用的方法。由于维生素的适用范围有限,在实践中一般不单独使用,而需要和植物生长素并用。糖类处理:糖类中蔗糖的效果最好,在园艺植物上一般用2% 10%的蔗糖溶液浸泡离体材料基部,时间1024h左右,但要注意浸泡糖液的清洁和离体材料的消毒,以防止病原菌在快繁离体材料上繁殖,用2%蔗糖液对柳杉和扁柏离体材料进行 1024h处理,效果显著;用糖液处理紫杉、水蜡、黄杨等,也可取得促进生根的效果。在柳杉高龄树离体材料的快繁中,先用5%蔗糖液浸泡,

33、然后再用0.05%萘乙酸溶液浸泡,生根率有明显的提高;用蔗糖和吲哚丁酸处理柠檬、山茶等都具有较好的效果。蜂蜜对葡萄枝条快繁生根,有显著的促进作用,以浓度为100倍的效果最佳。矿质营养物处理:许多不同的植物加入含氮物质后,显然促进了离体材料生根,如加入有机或无机含氮化合物,能使杜鹃离体材料生根;对高龄的柳杉和生根不良品种,用尿素在叶面喷洒,可起到促进生根的作用。对于养分含量不足的离体材料,除氮素外,还应补充磷、钾等肥,并应考虑研制一种综合性的包括植物生长素以及其他养分在内的、专门用于叶面喷洒的促进生根营养液。硼能刺激离体材料生根,将硼与吲哚丁酸配合使用,使冬青离体材料生根百分率提高,增加根的长度

34、、数目及生根速度。用硫酸铵、蔗糖和生长素并用处理木槿,能显著地刺激根的孕育。应用高锰酸钾与硝酸银处理,还有除去抑制物质的作用,使杨梅与栗子有利于不定根的形成。有的树种用二氧化锰、硫酸锰、氯化铝、二氧化铁、硫酸亚铁、硼酸等处理,可取得较好的效果。(4刻伤处理:用锋利的刀尖在离体材料基部刻划几条纵伤口,深达木质部,为了获得最好效果,在刻伤后用生根促进剂处理伤口,这对生根更有利。有很多难生根树种的离体材料,在皮层外面生不定根的部位有一层纤维细胞组成的厚壁组织,根不易穿透,经过刻伤可以切透这些细胞,使不定根容易穿到外面。这是由于在伤口部位自然积累生长素和碳水化合物,增强了细胞的呼吸率,刺激细胞分裂,同

35、时产生根原基,促进不定根的形成。例如杜鹃、槭、木兰和冬青等,针叶树种的快繁也可以采用刻伤。3.苗床接种与管理离体材料经上述的处理后,接下去就是接种工作,为什么叫接种而不叫插苗呢?因为用于快繁的离体材料比扦插的要小而且材质脆嫩,不宜扦插操作,只适合如组培似的轻轻接种入以珍珠岩为基质的苗床中。苗床是种苗生根发育及环境调控的重要场所,在快繁前需进行一次彻底消毒与整平工作。用PH 值小于3的强氧化酸水进行全面喷施或浇灌,可有效在杀死残留在苗床地的细菌、真菌及病毒,这对于减少离体材料的初感染可大大降低。对于喷洒酸水后最好1小时后,再喷一次电功能碱水,这对于中和PH值起到调节作用。经消毒整平操作后,就可进

36、行接种工作,接种时要求做到轻剖基质,轻置材料,浅埋平填,直成线横成井,达到均匀整齐叶不叠的效果,最好做到叶向一致,这样可以提高密度。一般带叶的离体材料每平方米可接种4001000株,无叶的材料或者块茎、鳞茎类还可以更密。在接种鳞茎、块茎类等颗粒或块状的离体材料时,可以用均匀撒播,尔后用木板轻拍整平方式进行,让材料轻轻地陷入基质中。在接种操作时,为了能保证离体材料不失水,要做到分段接种,及时喷雾,完成一段弥雾一段的方法。也就是说要在计算机控制的环境下接种,但生产中会因弥雾喷淋而影响操作,可以用这样方法解决,用一次性杯把需接种区段上方的喷头先用杯扣住,不让其喷水,待完成一个区段后,再把杯及时拿走。接种工作完毕后,苗床的环境管理,就全赖计算机自动控制