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文档简介

1、实 验 一一、淋巴细胞的分离二、 细胞抗原片的制备三、人血清分离 杜联峰外外周周血血细细胞胞淋巴细胞淋巴细胞单核单核-巨噬细胞巨噬细胞粒细胞粒细胞红细胞红细胞血小板血小板 原理：原理：根据淋巴细胞与血液中的其他细胞存在密密度度 差差 异（比重差异）异（比重差异），利用密度与淋巴细胞相 近且近于等渗的分离液（ficoll液）作密度梯度离心进行分离。 方法：方法：聚蔗糖聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心泛影葡胺密度梯度离心法法 （Ficoll分离液法）分离液法）目的：目的：将淋巴细胞从外周血细胞中分离出来分离液要求：分离液要求： 对细胞无毒对细胞无毒 基本等渗基本等渗 有一定比重有一定比重 （根据所分离

2、物质选择分离液）（根据所分离物质选择分离液）实验材料：实验材料：淋巴细胞分离液，离心管，刻度吸管，毛细淋巴细胞分离液，离心管，刻度吸管，毛细吸管，抗凝管等。吸管，抗凝管等。 实验步骤：实验步骤： 1、无菌采外周静脉血2ml加入抗凝管混匀、5分钟后加入Hanks液2ml稀释血液。 2、将抗凝血沿管壁缓慢加入沿管壁缓慢加入分离液中。 3、配平配平，放入水平离心机2000rpm离心10分钟 4、用毛细吸管吸取毛细吸管吸取血浆与分离液处淋巴细淋巴细胞胞，放入刻度离心管中。 5、加入Hanks液至5ml,，2000rpm离心5分钟。弃去上清，沉淀为淋巴细胞血浆血浆淋巴细胞淋巴细胞分离液分离液粒细胞粒细胞红细胞红细胞2000r/min20min稀释的抗凝血淋巴细胞分层液 淋巴细胞血浆 分层液稀释液 红血球二、淋巴细胞抗原片制备二、淋巴细胞抗原片制备吹铺冷风吹干冷丙酮固定515min冷风吹干，密封置30以下低温保存三、人血清

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