第二章 实验 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质_第1页
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文档简介

1、检测生物组织中的糖类、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质实验实验原理原理实验实验步骤步骤实验实验结果结果实验原理:实验原理:多糖:淀粉遇碘变蓝色糖类的鉴定还原糖: 葡萄糖、果糖等+斐林试剂 砖红色沉淀2. CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH + Cu2O(砖红色)(砖红色)+ 2H2O1. NaOH + 2CuSO4 (蓝色)(蓝色) Cu(OH)2(蓝色)(蓝色)+ Na2SO4斐林试剂斐林试剂甲液甲液乙液乙液成分及浓度质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液使用方法甲乙两液等量混匀后立即使用

2、实验步骤:实验步骤:含糖量较多,白色或近于白色含糖量较多,白色或近于白色(排除色素对显色的干扰)(排除色素对显色的干扰)显色反应显色反应 实验现象:实验现象: 选材:选材:50506565. .C C,2min2min制备组织样液:制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨(制浆:去皮、切块、研磨(SiO2)过滤:单层纱布过滤:单层纱布取样:取样:2mL(另取(另取2mL作对照)作对照)刚配置好刚配置好的的斐林试斐林试剂剂2mL2mL浅蓝色 棕色 砖红色实验结果:实验结果:实验原理:实验原理:脂肪的鉴定脂肪 + 苏丹 染液 橘黄色脂肪 + 苏丹 染液 红色实验步骤:实验步骤:方法1: 花生种子匀浆

3、+ 3滴苏丹(IV) 染液 橘黄色(无须用显微镜观察)实验步骤:实验步骤:方法2:花生种子花生种子(浸泡过浸泡过)子叶削成子叶削成薄片(利用镊子刮取薄片(利用镊子刮取放置到玻片上)放置到玻片上)制片:制片:取最理想的取最理想的薄片(玻片)薄片(玻片)染色:染色:2323滴苏丹滴苏丹染染3min3min, ,或或2323滴苏丹滴苏丹染染1min1min去浮色:体积分数为去浮色:体积分数为50%的酒精溶液的酒精溶液观察:观察:实验现象:实验现象: 取材:取材:制成临时装片制成临时装片先低倍镜,再高倍镜先低倍镜,再高倍镜脂肪微粒脂肪微粒实验结果:实验结果:实验原理:实验原理:蛋白质的鉴定蛋白质 +

4、双缩脲试剂 紫色双缩脲双缩脲试剂试剂A A液液B B液液成分及浓度质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液使用方法先加A液,再滴加B液含肽键的化合物碱性条件碱性条件CuCu2+2+紫色络合物紫色络合物实验步骤:实验步骤:黄豆组织样液黄豆组织样液 或或 鸡蛋蛋清鸡蛋蛋清稀释液稀释液(另取(另取2mL作对照)作对照)显色反应显色反应 实验现象:实验现象: 选材制备:选材制备:摇匀摇匀摇匀摇匀双缩脲试剂双缩脲试剂B B液液4 4滴滴斐林试剂斐林试剂双缩脲试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分及其浓度0.1g/mL0.1g/mL的NaOH溶液0.05g/mL0.05g/mL的CuSO4溶液0.1g/mL0.1g/mL的NaOH溶液0.01g/mL0.01g/mL的CuSO4溶液鉴定物质还原糖蛋白质添加顺序 (现配现用)甲乙两液等量等量混合后立即立即使用使用先加A液1mL,摇匀,后加B B液液4 4滴滴,摇匀反应条件5065.

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