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文档简介

1、第六章1、同步生长:是通过获得同步培养物的手段。使微生物细胞群体内的各个个体都处于同一细胞分裂周期的特殊生长状态。2、连续发酵:当微生物以单批培养的方式培养到指数期后期时一方面以一定速度连续流入新鲜培养基和通入无菌空气并立即搅拌均匀,另一方面利用溢流的方式以同样的流速不断流出培养物的培养方法。3、专性好氧菌:是一类必须在较高浓度分子氧(约20千帕)的条件下才能生长有完整的呼吸链,以分子氧作为最终的氢受体,具有SOD和过氧化氢酶的微生物。4、兼性厌氧菌:是一类主要生长在有氧条件下又可在无氧条件下的微生物,特点是在有氧下借呼吸产能,而在无氧条件下可借发酵或无氧呼吸产能。5、微好氧菌:是一类只能在较

2、低氧分下(13000帕)下才能正常生长的微生物。6、耐氧菌:是一类可在有氧条件下正常生长却不需要氧而仅借发酵和底物水平磷酸化产能的微生物。7、厌氧菌:一类对分子氧高度敏感的微生物,有氧情况下不能生存。8、巴氏消毒法:是由巴斯德发明的一种低温湿热灭菌法,一般在6085下处理30min至1.5s,主要用于牛奶、果酒等液态风味食品的消毒。9、间歇灭菌法:一种适用于不耐热培养基的灭菌方法。一般将培养基放在100蒸煮15min,然后置37下过夜(诱使残留芽孢发芽),次日再重复蒸煮、过夜,如此重复3d即可。10、加压蒸气灭菌法:一种利用100以上的高温(而非压力)蒸气进行湿热灭菌的方法,用特制的耐压灭菌锅

3、进行。广泛应用于培养基和各种物件灭菌。11、什么叫典型生长曲线?它可分几期?定量描述液体培养基中,微生物群体生长规律的实验曲线,称为生长曲线。分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期。12、延滞期有何特点?如何缩短延滞期?a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃;e.对外界不良条件的反应敏感。方法:第一 用对数期的菌种接种  第二 接种量适量增大 第三 发酵培养基成分和种子培养基的成分尽量接近。13、指数期有何特点?处于此期的微生物有何应用?生长速率常数最大 细胞进行平衡成长 酶系活跃,代谢旺盛是用作代

4、谢、生理等研究的良好材料,是增殖噬菌体的最适宿主,也是发酵工业中用作种子的最佳材料。15、何为连续培养?连续培养有何特点?为何连续时间是有限的?第一流入新鲜培养基和无菌空气的同时,以同样的流速流出培养物 第二,微生物长期保持在指数期的平衡生长状态和稳定的生长速率上因为菌种长期处于最高生长速率状态,突变严重,易使菌种退化。16、高密度培养:指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上的生长状态或培养技术。17、试比较灭菌、消毒、防腐和化疗的异同。灭菌是指采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。消毒是指采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对

5、人体或动、植物有害的病原菌而对被消毒对象基本无害的措施。防腐是指利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖的措施。化疗是指利用对病原菌具有高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体体内病原微生物的生长繁殖,借以达到治疗该宿主传染病的一种措施。比较项目 灭菌 消毒 防腐 化疗 处理因素 强理化因素 理化因素 理化因素 化学治疗剂处理对象 任何物体内外 酒、乳 有机质物体内外 宿主体内微生物类型 一切微生物 有关病原菌 一切微生物 有关病原菌对微生物作用 彻底杀灭 杀死或抑制 抑制或杀死 抑制或杀死实例 加压蒸气灭菌 巴氏消毒法 冷藏、糖渍 抗生素、磺胺药18、利用加压蒸气对培养基进行灭菌

6、时,常易带来哪些不利影响?如何避免?答:不利影响:形成沉淀物、破坏营养,提高色泽、改变培养基的pH、降低培养基浓度;避免:对易破坏的、易形成沉淀的组分分别灭菌;易被高温破坏的组分低压灭菌;或过滤除菌;其他的有加络合剂、气体灭菌剂。19、抗菌谱:指一种或一类抗生素(或抗菌药物)所能抑制(或杀灭)微生物的类、属、种范围。20、什么叫抗药性(耐药性)?其产生途径有哪些?答:又称耐药性,指生物(尤指病原微生物)对抗生素等药物产生的耐受和抵抗能力。抗药性主要通过遗传途径产生,例如基因突变、遗传重组或质粒转移等。1.简述配制培养基的原则和步骤配制培养基的原则:目的明确;营养协调;理化适宜;经济节约。配制培

7、养基的步骤:原料称量、溶解(加琼脂)(过滤) 定容 调 pH 分装 加棉塞、包扎 灭菌(摆斜面)无菌检查2. 防止菌种衰退的措施有哪些? 控制菌种传代次数; 创造良好的培养条件; 利用不易衰退的细胞移种传代; 采用有效的菌种保藏方法; 讲究菌种选育技术; 定期进行分离纯化。3. 青霉素抑制G的机理是什么。答:青霉素抑制肽聚糖的合成过程,形成破裂的细胞壁,代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成,因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制:青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转态作用。4.什么是质粒?其特点是什么?质粒 是存在于细菌染色体外或附加于染色体上的遗传物质。其特点: 绝大多数由共价闭合环状

8、双螺旋 DNA 分子所构成,分子量较细菌染色体小。每个菌体内有一个或几个,也可能有很多个质粒。质粒可以从菌体内自行消失,也可通过物理化学手段,将其消除或抑制;没有质粒的细菌,可通过接合、转化或转导等方式,从具有质粒的细菌中获得,但不能自发产生。质粒存在与否,无损于细菌生存。但是,许多次生代谢产物如抗生素、色素等的产生、以至芽孢的形成,均受质粒的控制。质粒既能自我复制、稳定遗传,也可插入细菌染色体中或携带的外源 DNA 片段共同复制增殖;它可通过转化、转导或接合作用单独转移,也可携带着染色体片段一起转移。质粒已成为遗传工程中重要的运载工具之一。5.微生物生长繁殖的主要方法及原理有哪些?答:(1)

9、采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施成为灭菌,例如各种高温灭菌措施等。灭菌实质上是杀菌和溶菌两种,前者指菌体虽死,但形体尚存,后者则是菌体杀死后,其细胞发生溶化,消失现象。  (2)消毒 从字面意思看,消毒就的消除毒害,这里的毒害就是指传染源或者致病源的意思。所以,消毒是一种采用教温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病源菌,而对消毒的物体基本没害的措施。  (3)防腐 防腐就是利用某种理化因素完抑制霉菌微生物的生长繁殖,从而达到防止食品等发生霉腐的 措施,措施很多,主要由:低温。利用低于4度以下的低温以保藏食品,药品。

10、 缺氧。采用密闭容器中加入除氧剂来有效的防止食品和粮食的霉变。变质,并达到保鲜的目的。干燥。采用晒干或红外线干燥等方法对粮食,食品等进行干燥保藏是最常见的防止霉变的方法。此外,在密闭条件下,用石灰,无水氯化钙,五氧化二磷,农硫酸,氢氧化钠也可达到食品药品和器材等长期防腐霉的目的。高渗。通过盐腌和糖渍措施来保存各种食物,是在民间流传已久的防腐方法。 (4)高酸度。 用高酸度也可达到到防腐的目的。泡菜是利用乳酸菌厌氧发酵使新鲜蔬菜产生大量乳品,借以达到抑制杂菌和长期保存的目的。 防腐剂。在有些食品。调味品,饮料和器材中,可以加入适量的防腐剂以达到防霉变的目的。如化妆品可加入山梨酸,脱氢醋酸等来防腐

11、等。6细菌生长曲线分哪几个时期?各时期有何特征及在工业发酵中的应用。延滞期,指数期,稳定期,衰亡期(1)延迟期:菌数没有增加,细胞大量合成细胞物质,准备分裂。生产上要尽量缩短该时期,如应用处于对数期的菌体接种,适当增大接种量,培养基成分尽量与种子培养基一致;(2) 对数期:菌数以指数增加。是研究微生物生理、遗传的好材料,是作菌种的好材料,是噬菌体的适当宿主;(3)稳定期:菌体生长速度和死亡速度相等,菌体量达到最大。以培养菌体为目的时,可结束培养;开始积累次级代谢产物,以生产次级代谢产物为目的时,应通过调pH值,补加新鲜培养基等方式,延长该时期;(4)衰亡期:菌数以指数下降。要及时放罐

12、,避免菌体自溶,不利后处理。2pH值对微生物生长有何影响?环境中的酸碱度通常以氢离子浓度的负对数即pH值来表示。环境中的pH值对微生物的生命活动影响很大,主要作用在于:引起细胞膜电荷的变化,从而影响了微生物对营养物质的吸收;影响代谢过程中酶的活性;改变生长环境中营养物质的可给性以及有害物质的毒性。每种微生物都有其最适pH值和一定的pH范围。在最适范围内酶活性最高,如果其他条件适合,微生物的生长速率也最高。大多数细菌、藻类和原生动物的最适pH为6.5-7.5,在pH 4-10之间也可以生长;放线菌一般在微碱性即pH7.5-8最适合;酵母菌、霉菌则适合于pH5-6的酸性环境,但生存范围在pH1.5

13、-10之间。有些细菌甚至可在强酸性或强碱性环境中生活。微生物在基质中生长,代谢作用改变了基质中氢离子浓度。随着环境pH值的不断变化,微生物生长受阻,当超过最低或最高pH值时,将引起微生物的死亡。为了维持微生物生长过程中pH值的稳定,配制培养基时要注意调节pH值,而且往往还要加入缓冲物以保证pH在微生物生长繁殖过程中的相对稳定。强酸和强碱具有杀菌力。无机酸杀菌力虽强,但腐蚀性大。某些有机酸如苯甲酸可用做防腐剂。强碱可用作杀菌剂,但由于它们的毒性大,其用途局限于对排泄物及仓库、棚舍等环境的消毒。强碱对革兰氏阴性细菌与病毒比对革兰氏阳性细菌作用强。基因突变的特点:随机性、稀有性、独立性、可逆性、稳定

14、性。基因突变的机制P175P179转化:受体菌直接吸收自供体菌的DNA片段,通过转换将其整合到自己的基因组中,从而获得供体菌部分遗传性状的现象。转导:通过缺陷噬菌体将供体菌的DNA片段携带到受体菌中,使后者获得前者部分遗传性状的现象。接合:遗传物质通过细胞间的直接接触而进行的转移和重组。菌种的衰退:-因外界环境条件与苗种内在因素的矛盾,引起某些形态和生理性能逐渐向不利于生产方面发展的变化。菌种的衰退防止的方法:减少传代次数,创造优良环境条件,利用不同类型细胞进行接种(孢子);采取有效的保藏方法。菌种复壮的方法:纯种分离;通过寄主进行复壮;淘汰已衰退的个体。原生质体融合:通过人工方法使遗传性状不

15、同的两细胞的原生质体发生融合,并产生重组子的过程。溶源转变:当温和噬菌体感染寄主细胞,而使之发生溶源化时,因噬菌体加入寄主细胞的基因组。营养缺陷型:指通过诱变产生的,在某些营养物质(如氨基酸,维生素,和碱基等)的合成能力上出现缺陷,必须在基本营养基中加入相应的有机营养成分才能生长的变异菌株栓选步骤:诱变处理;淘汰野生型;检出营养缺陷性;鉴定缺陷性。常见的菌种保藏方法有:低温保藏法、隔绝空气保藏法、干燥保藏法和寄主保藏法四大类。传染:指病原微生物侵入机体后,在一定的部位生长、繁殖,并引起明显病理反应的过程。原病菌的毒力主要取决于病原菌的侵染力和产生毒素的能力。一.侵袭力:指病原菌突破机体的防御机

16、制,侵入组织并在机体内生长、繁殖和扩散的能力决定侵袭力的因素有:1、粘附作用:主要是菌体表面的菌毛,丝状体等粘附因素与宿主细胞的特异性受体结合2、亲器官性:指病原菌对它们所感染或侵染的组织具有高度的选择性3、抗吞噬细胞因子:荚膜:抵抗吞噬细胞的吞噬;抵抗机体体液杀菌物质。有荚膜,毒力强,无则弱。某细胞外寄生菌的表面具有荚膜或其它表面结构等抗吞噬因子。4、胞外酶类1)透明质酸酶:分解透明质酸(细胞间质),使细胞间隙扩大,结缔组织松驰,有利于细菌在组织中扩散。2)胶源酶:水解肌肉的胶源蛋白,便于在组织中扩散。3)血浆凝固酶:加速血浆凝固成纤维蛋白屏障,保护病原菌4)链激酶:葡萄球菌激酶,促使纤维蛋

17、白溶解,使病原菌和毒素扩散。5)卵磷脂酶二.毒素可以分为内毒素和外毒素。生理屏障:1.皮肤和粘膜(表面屏障):机械屏障,各种分泌物-抑制,杀灭病原菌。2.局部屏障:血脑屏障、胎盘屏障。3.共生菌群:竞争营养和空间或产生抑制代谢物抑制周围病原菌。吞噬作用:趋化作用:病原菌感染组织的产物,补体活化的产物以及活化淋巴细胞的产物等趋化因子,吸引吞噬细胞聚集到产生趋化因子的感染部位调理作用:体液物质被激活,覆盖于病菌表面,便于吞噬吞入作用:吞噬体的形成(食物泡)溶酶体吞噬溶酶体水解消化排出。杀灭作用:完全、不完全,有些细胞内寄生物(如结核杆菌,布鲁氏菌)不但不被杀死,还能在吞噬细胞中长期生存,免受其它免

18、疫机制的影响。疾病的复发和转移抗原:凡能引起机体产生特异性的细胞免疫反应或机 体免疫反应,并能与相应的致敏淋巴细胞或相应的抗体进行特异性结合的物质。抗原分为完全抗原和半抗原。完全抗原:既有免疫原性、也有反应原性,如:大多数的蛋白质、细菌细胞、细菌外毒素。半抗原:只有反应原性,没有免疫原性,如:某些药物、脂类、多糖等,只与蛋白质载体结合后才有抗原性。抗原的性质:1.异物性;2.分子量大;3.化学组成与结构复杂;4.特异性(抗原决定簇抗原分子表面特殊的化学基团)免疫细胞:1. 干细胞:造血干细胞:具自我增殖分化能力,淋巴细胞及血细胞的总体来源。2. 淋巴细胞:全身循环,具有特异地识别外来异物的能力

19、。T细胞:长寿细胞(分化情况)。B细胞抗原吞噬细胞T细胞B细胞浆细胞抗体(特异性免疫细胞)。K细胞杀伤细胞,抗体依赖性细胞毒性淋巴细胞,非特异性杀伤靶细胞作用 ,杀伤寄生虫和肿瘤细胞免疫N细胞:无标记细胞,有杀伤作用。D细胞:双标记细胞NK细胞:自然杀伤细胞3. 巨噬细胞:具很强吞噬能力和杀伤微生物能力的细胞;摄取、处理、储存和传递抗原信息免疫球蛋白:IgG:占免疫球蛋白的80-85。在自然感染或人工注射抗原后,出现较迟,但维持时间较长,可达数年以上。是唯一能通过胎盘的Ig,对保护新生婴儿出生数周内的抗感染起很大作用。临床上使用的胎盘球蛋白、丙种球白以及抗毒素血清等生物制品主要含IgG。作用:

20、1.结合补体2.能通过胎盘3.抗菌、抗毒素、抗病毒。IgA:占13左右。血清型85、外分泌型15(唾液,泪液,初乳等)。在机体粘膜,局部发挥抗感染免疫作用。IgM:占6,分子数最大,主要在于促进巨噬细胞对颗粒性抗原的吞噬,是血液中抗菌能力最强。作用:1.结合补体2.凝集作用IgD:1,血清中,可能与变态反应性疾病有关IgE:0.002,血清中,与I型变态反应有关,过敏反应患者如哮喘血清中IgE含量高于正常人5-8倍特异性免疫:1.自然免疫:自然自动免疫:患传染病或隐性传染后获得,如:自然状态下患过天花、麻疹、白喉等自身产生了免疫.自然被动免疫:从胎儿通过胎盘或婴儿通过初乳获得.2. 人工免疫:

21、人工自动免疫:注射抗原而获得,如:注射乙肝疫苗、卡介苗(结核病)、破伤风类毒素. (免疫力出现慢,保持时间久,用于预防)人工被动免疫:注射抗体或转移因子获得,如:注射破伤风抗毒素应急治疗(免疫力出现快,保持时间短,用于治疗或紧急预防)特异性免疫应答过程:免疫淋巴细胞对抗原的识别及自身活化、增值、分化并产生免疫效应的过程称免疫回答。应答过程分三个阶段:感应阶段、反应阶段、效应阶段。15、 细菌,放线菌,酵母菌和霉菌四类微生物的菌落有何不同?为什么?答:细菌:菌落一般呈现湿润、较光滑、较透明,较粘稠、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致等。放线菌:菌落能产生大量分枝和气生菌丝,干燥、不透明、表面呈致密而小的丝绒状,粉末状或颗粒状,难以挑取,菌落的正反面颜色不一致。酵母菌:菌落一般较细菌菌落大且厚,表面湿润,粘稠,较不透明,易被挑起,多为乳白色,少数呈红色。霉菌:菌落形态较大,质地疏松,

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