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文档简介
1、常用缓冲溶液的配制方法1.磷瞬二钠韦檬酸缓冲液22 柠檬酸韦檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L ) 23 .甘氨酸一盐酸缓冲液(0.05 moVL ) 34邻苯二甲酸一盐酸缓冲液(0.05 mol/L ) 35 .乙酸一乙酸钠缓冲液(0.2 moVL ) 36 磷酸盐缓冲液37.磷酸二氢钾氧化钠缓冲液(0.05M ) 48巴比妥钠盐酸缓冲液(18°C ) 49 .硼酸-硼砂缓冲液(0.2M硼酸根)510甘氨酸一氢氧化钠缓冲液(0.05M ) 511 碳酸钠碳酸氢钠缓冲液(0.1M ) 512 Tris盐酸缓冲液(0.05M , 25°C ) 613 .硼砂氢氧化钠缓冲液(0.
2、05M硼酸根)614PBS缓;中液615. ER缓冲溶液配制 716. 常用pH缓冲溶液的配制和pH值72.柠檬酸-柠檬酸钠1.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液PH0.2moLLNa2HPO4(mL)O.lmoVL柠檬酸(mL)pH0.2molLNa2HPO4 (mL)O.lmolL柠樣酸(mL)2.20.4019605.210.729.282.41.2418.765.411.158.852-62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.097.913.04.1115.896012.637373.24 9415.066.213.226.783.45.7014306.4
3、13.856.153.66.4413.566614.555.453.87.1012.906 815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510657.61&731.274.89.8610.147.819.150.855.010309.708.019.450.55Na2HPO4 分子量=14.98, 0 2 moVL 溶液为 28.40 克/升。Na2HPO4 2H2O 分子量=178 05, 0.2 moVL 溶液含 35.01 克/升。C4H2O7 H2
4、O 分子量=210.14, 0 1 moVL 溶液为 21.01 克/升。PH0.1 mol/L 柠椽酸(mL)0.1 mol/L柠椽酸钠(mL)PH0.1 mol/L 柠椽酸(inL)0.1 mol/L柠椽酸钠(mL)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.41604.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.1696.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.4&66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89 210
5、S冲液(0.1 moVL)柠檬酸C田sO? H:O:分子m 210.14, 0.1 mol/L溶液为21.01克/升。柠檬酸钠Na3 CgHsO? 2H2O:分子量294.12, 0.1 moVL溶液为29.41克/毫升。柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液PH钠离子浓度(mol/L)柠椽酸(克)C6HsO7H2O氢氧化钠(克)NaOH 97%盐酸(mL)HC1 (浓)最终体积(升)220 2021084160103.10.2021083116103.30.2021083106104.30.20210834510530.3524514468105.80.45285186105106 50 >s2
6、661"126103.甘孰酸-盐酸缓冲液(0.05 moVL)X亳升0.2 niol/L甘氨酸+Y亳升0.2 moVL HCL再加水桶释至200亳升PHXYPHXY2.05044.03.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.450642.85016.83 6505.0甘氨酸分子量=75.07, 0.2 moVL甘氨酸溶液含15.01克/升。4.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(005mol/L)X毫升0 2 moVL邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 moVL HCL再加水稀释到20毫升pH(20C)XYpH(20°C)XY2.254.0703.251.4702
7、.453.9603.450.9902.653.2953.650.5972.852.6423.850.2633.052.022邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23, 0 2 moVL邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升5.乙酸-乙酸钠缓冲液(0.2 moVL)pH(18°C)0.2 mol/LNaAc(inL)0.3 mol/LHAc(mL)pH(18*C)0.2 mol/LNaAc(inL)03 mol/LHAc(mL)2.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003 004.01.808.205.27.902.104.22.657355.48.601.
8、404.43.706.305.69.100.904.64 005.105.89 400 60Na2Ac 3H:O 分子量=136.09, 0.2 mol/L 溶液为 27.22 克/升。6.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠锄酸二氢钠缓冲液(02)PH0.2 mol/LNa2HPO4(mL)0.3 mol/LNaH2PO4(mL)PH0.2 mol/LNa2HPO4(mL)0.3 mol/LNaH2PO4(mL)5.88.092.07.061.03905.91009007.167 033.06.012.387.77.272.028.06.115.085.07.377.023.06.21&58
9、1.57.481.019.06 322.577.57.584.01606.426.573.57.687.013.06.531.56&57.789.510.56637.562 57.891.58.56.743.556.57.993.07.06.849.551.0&094.75.36.955.045.0Na2HPO4 2H2O 分子量=178.05, 0.2 moVL 溶液为 85.61 克/升。Na2HPO4 12H2O 分子量=358.22, 0.2 moVL 溶液为 71 64 克/升。Na2HPO4 2H2O 分子量= 156.03, 0 2 moVL 溶液为 31.21
10、克/升。(2)磷酸氢二钠皿酸二氢钾缓冲液(l/15mol/L)PHmoL/L/15Na2HPO4mol/L/15KH2P04PHmol/L/15Na2HPO4mol/L/15KH2P04(inL)(mL)(inL)(inL)4.920.109.907.177.003.005.290.509.507.388 002.005.911 009.007.739 001.006.242.008.008.049.500.506.473 007.008.349.750 256 644.006.008.679 900 106 815 005.008.1810.0006.986.004.00Na2HPO4 2H
11、2O 分子量=178.05, 1/15M 溶液为 11.876 克/升。KH2PO4 分子量=136 09. 1/15M 溶液为 9.078 克/升。7.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05M)X亳升0.2MK2PO4 + Y亳升02NNaOH加水稀释至29亳升pH(20°C)X(mL)Y(mL)pH(20r)X(mL)Y(inL)5.850.3727 052 9636.050.5707.253.5006.250.8607.453.9506.451.2607.654.2806.651.7807.854.5206.852.3658.054.6808.巴比妥钠-盐酸缓冲液(189)PH0
12、.04M巴比妥钠 溶液0.2V盐酸PH0.04M巴比妥 钠溶液(mL)0.2N 盐酸(mL)6.81001848.41005.217.010017.8&61003.827.210016.7S S1002.527.410015.39.01001.657.610013.49.21001.137.810011.479.41000.708.01009.39961000358.21007.21100酸曲砂缓冲液(0.2N硼酸根)巴比妥钠盐分子ft=206.18;0.04M溶液为8.25克/升PH0.05M 硼砂(111L)0.2M 硼砂(mL)PH0.05M 硼砂(mL)0.2M 硼酸(inL)
13、7.41.0908.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07 09.08.02.09.硼砂Na2B4O7 H2O,分子量=381.43;0.05M溶液(=0.2M硼酸根)含19.07克/升。 硼酸H1BO3,分子量=61 84,0.2M溶液为12.37克/升。硼砂易失去结晶水.必须在带塞的瓶中保存。10甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05M)X亳升0 2M什氨酸+Y亳升0.2NnaOH加水稀释至200亳升PHXYPHXY8.6504.09.65022.48.8506.09.85027.29050&81005032.09.25012
14、.010.45038.69.45016.810.65045.5甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。11碳酸钠碳酸氢钠缓冲液(0.1M)Ca2 Mg*存在时不得使用PH0 lMNa2CO3(mL)0.1MN2HCO3(niL)2or37'C9.168.77199.409.12289.519.40379.789 50469.909.725510.149.906410.2810.0871310.5310288210.8310.5791Na2CO2 10H:O 分子量-286.2;0.1M 溶液为 28.62 克/升N2HCO3分子量=84.0;0 1M溶液为&4
15、0克/升。12. Tris-盐酸缓冲液(0.05M, 259)50毫升0.1M三起甲基氨基甲烷(Tns)溶液与X亳升0.1N盐酸混匀后,加水稀释至100毫升。PHX(mL)PHX(mL)7.1045.78.1026.27.2044.78.2022.973043.48.3019.97.4042.08.4017.27.5040 38.5014.77.603&58.6012.47.7036.68.7010.37 8034.58.808.57.9032.08.907.08.0029.2三疑甲基氨基甲烷(Tns)分子量=121.14; CAS77-86-l分子式:C4H11NO3 化学名称:(T
16、ns(hydroxy methyl)ammo metliane外观(Appearance):白色结晶体 含量(Count):99%min熔点HOCH2/CH2OHhoch2z xnh2(MP): 168-171 °C0.1M溶液为12.114克/升。Tns溶液町从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。13.硼砂氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根)X亳升0 05M硼砂+Y亳升0.2NNaOH加水稀释至200亳升PHXYPHXY9.3506.09.85034.09.45011.010.05043.0965023.010 150460硼砂NaBCh 10H2,分子量=381.43;0.05
17、M溶液为19.07克/升。14PBS缓冲液PBS:Phosphate Buffered Saline:含0.05%吐温-20的pH7 4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法 为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4 12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KC1),吐温20 , 加水。PBS1L配方pH7.4:确酸二氢W(KH2PO4):0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,氯化钠(NaCl):8g, 氯化钾(KCl)0.2g,加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L 。高温高压灭菌后室温保存。PBS 缓冲液
18、(pH7.27.4): NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 lOmmol/L, KH2PO4 2mmokLPBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,只体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上 就有了更好的效果。lxPBS缓冲液就是使用0.1M (磷酸根浓度)的PBS配置,町直接使用,2xPBS就是2倍浓度,使用时柿释一倍使用。0 01M的PBS 般不用来配員缓冲液,用于具它用处。PH7.67.47.27.0H:O100010001000100mlNaCl8.58.58.5&5gNa2HPO42.22.22.222gNaH2PO40.10.20
19、304g15. B-R缓冲溶液配制Britton-Robinson Buffer Solution (伯瑞坦罗比森缓冲溶液)在100 ini三酸混合液(磷酸、乙酸、砌酸,浓度均为0.04 moVL沖,加入表中指定体积的0.2 mol/LNaOH,即得表中相应PH值的缓冲溶液。PHNaOH(ml)PHNaOH(ml)PHNaOH(ml)1.810.005.3337.59.6275.01.892.55.7240.09.9177.51.985.06.0942.510.3880.02.097.56.3745.010.8882.52.2110.06.5947.511.285.02.3612.56.850
20、.011.487.52.5615.07.0052.511.5890.02.8717.57.2455.011.792.53.2920.07.5457.511.8295.03.7822.57.9660.011.9297.54.1025.08.3662.54.3527.58.6965.04.5630.08.9567.54.7832.59.1570.05.0235.09.3772.516.常用pH缓冲溶液的配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1氯化钾盐酸13.0 nil 0.2 mol/L HC1 与 25.0 ml 0.2 mol/L KC1 混合 均匀后,加水稀释至100ml1.72氨基乙酸盐酸在500 ml水中溶解奴基乙酸150 g,加480 ml浓盐酸, 再加水稀释至1L2.33一氯乙酸氢氧化 钠在200 ml水中溶解2g 氯乙酸后,加40g NaOH, 溶解完全后再加水稀释至1L2.84邻苯二甲酸氢钾盐酸把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0 ml0.1 moVLHCl
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