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文档简介
1、第一章1、简述微生物及其主要类群微生物:一大类微小生物的总称。是对所有形体微小、单细胞、或简单多细胞、甚至没有细胞结构的低等生物的总称。微生物的主要类群:原核类(细菌、放线菌、蓝细菌/蓝藻、支原体)、真核类(酵母菌、霉菌、大型真菌)、非细胞类(病毒与亚病毒)、原生生物类(原生动物、单细胞藻类)2、试述微生物的共同特征及其对人类的利弊答:特征:体积小,比面值大;结构简单、进化地位低等;吸收多,转化快: 适应强,易变异。优点:育种潜力大:青霉素生产菌的培育。缺点:菌种退化(多向变异);耐药性;新型病原菌的出现。生长旺,繁殖快,有用菌:发酵周期短,生产效率高。病原菌:瘟疫爆发、农牧渔业损失、微生物武
2、器。分布广,种类多:3、列举在微生物学开创和奠基中有突出贡献的3位科学家及其主要贡献 答:1676年荷兰科学家列文虎克制造了简单的显微镜,描述了细菌,找到了微生物存在的直接证据;法国科学家巴斯德微生物学奠基人,主要贡献:否定生物自生说,创立了胚种说。建立发酵的微生物原说。建立传染病的微生物原说。发明巴氏消毒法。德国科学家 罗伯特 科赫,病原细菌学的奠基人和开拓者。发明了固体培养基的细菌纯培养法。证实了炭疽病因,分离纯化了炭疽杆菌,发现了结核杆菌。制定了科赫原则(此种病原微生物是从患者身上分离的,能人工培养得到纯化物。纯化物人工感染敏感动物出现相同症状)4、试述微生物学发展史上的主要阶段及其主要
3、特点 答:感性认识阶段,未见个体,具有利用和控制经验。 形态学发展阶段,列文虎克描述了细菌,找到了微生物存在的直接证证据。生理学发展阶段,建立了一系列研究微生物的独特方法和技术,开创了寻找病原微生物的黄金时期,把微生物研究从形态描述推进到了生理学研究。生理生化和代谢研究。微生物发展的第二个黄金时期,寻找各种有益微生物及其产物分子生物学技术水平研究,微生物学发展史上的第三个黄金时期,微生物工程,其特点有:微生物学成为十分热门的前沿基础科学。微生物成为生物学研究中的最主要对象。生物工程中发酵工程是最成熟的应用技术。5、简述微生物学发展史上的3次黄金时期及其主要特点 答:生理学的发展阶段,寻找病原微
4、生物。生理生化和代谢研究阶段,寻找有益的微生物及其代谢产物。分子生物学技术水平研究阶段,微生物学成为热门的前沿基础科学,微生物成为生物学研究的主要对象,生物工程中发酵工程是最成熟的应用技术。6、微生物学及其主要任务 答:微生物学:研究微生物的形态结构,生理代谢,遗传变异,生态分布等生命活动规律,并将其应用于工农业生产、医药卫生、环境保护、生物工程等领域的科学。基本任务是:认识、发掘、利用和改善有益微生物,控制、消灭和改造有害微生物。第二章 原核微生物1 简述细菌的主要形态类型.答:三大类:球菌(coccus) :单球菌 双球菌 四联球菌 八叠球菌 葡萄球菌 链球菌.杆菌(bacillus):杆
5、状、棒状、丝状,单个或成链。杆菌短径(粗细)稳定,但长度变化大。螺旋菌(spirillum): 螺菌 弧菌 (vibrio):弧状,靠鞭毛运动.2 试述肽聚糖化学组成和结构.答:N乙酰葡萄糖胺和N乙酰胞壁酸交替以-1,4糖苷键相连成骨架,由短肽把骨架连成多层网状结构。3 试述细菌基本结构和特殊结构及其功能.答:基本结构:所有细胞具备的结构,细胞壁、细胞膜、细胞质、核糖体、细胞核、简单内膜系统如简体、载色体等;功能:可以保证细菌能进行正常的生命活动。特殊结构:某些细菌才有的结构,鞭毛、纤毛、荚膜、芽孢、质粒;功能:是细菌分类鉴定的重要依据。附:细胞壁的功能是固定细胞外形,保护细胞免受外力的损伤,
6、协助鞭毛运动,为正常细胞分裂所必需,阻拦有害物质进入细胞,与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性密切相关。4 简述述革兰氏染色的步骤及其可能机理.答:步骤:(细胞涂片、干燥固定后)结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色沙黄/番红复染。在染色过程中,细胞内形成了深紫色的结晶紫-碘的复合物。这种复合物可被酒精从G-细胞内浸出,而G菌则较困难:G菌:细胞壁肽聚糖层厚,网格结构紧密,含脂量低,当它被酒精脱色时,肽聚糖层网格孔径缩小甚至关闭,从而阻止了结晶紫-碘的复合物的逸出,故而成深紫色;G-菌:细胞壁肽聚糖壁层薄,网格结构稀疏,酯类含量又高,当它被酒精脱色时,酯类物质溶解,细胞壁通透性增大,结晶紫-碘的复合物
7、被抽提出来,紫色退去,细胞被复染成红色。5 试述G+、G-细菌细胞壁结构和化学组成的异同.答:革兰氏阳性菌(G+):厚的肽聚糖层,2080nm,多层(约40层),网格紧密;含磷壁酸;无外壁层革兰氏阴性菌(G):肽聚糖层薄,23nm,单层,网格疏松;不含磷壁酸;肽聚糖层外还有较厚的由脂多糖和脂蛋白构成的外壁层。6 简述溶菌酶、青霉素、链霉素的杀菌机理.答:a.溶菌酶: 主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。b. 青霉素药理作用是干扰细菌细胞壁的合成。青霉素的结构与细胞壁的成分粘肽结构
8、中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似,可与后者竞争转肽酶,阻碍粘肽的形成,造成细胞壁的缺损,使细菌失去细胞壁的渗透屏障,对细菌起到杀灭作用。c. 链霉素是一种氨基糖苷类药,经主动转运通过细菌细胞膜,与细菌核糖体30S亚单位的特殊受体蛋白结合,干扰信息核糖核酸与30S亚单位间起始复合物的形成,抑制蛋白合成。使DNA发生错读,导致无功能蛋白质的合成;使多聚核糖体分裂而失去合成蛋白的功能,使大量氨基糖苷类进入菌体,细菌细胞膜断裂,细胞死亡。 7 试述芽孢的结构特点、形成过程、功能及其萌发条件.答:a.结构特点:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含有吡啶2,6二羧酸钙(DPA-C
9、a),含水量极低、抗逆性极强的休眠体;由于一个营养细胞内仅生成一个芽孢,无繁殖功能;芽孢是生物界中抗性最强的生命体,尤其抗热,高压蒸气灭菌121 最少要12 min;芽孢在普通条件下可保持几年至几十年的生活力;芽孢种类: 不膨大/膨大;位于中间/端生。b.形成过程:当营养缺乏导致生长停止时可形成芽孢,大致可分为七个阶段。形成芽孢前,菌体往往先出现两个核区。轴丝的形成。营养细胞内复制的两套人色提DNA聚集在一起形成一种丝状物即轴丝。隔膜形成。在细胞的一端由细胞膜内陷形成芽孢膈膜,将细胞分为大小两部分,同时轴丝也被分为两部分。前芽孢形成。小细胞被大细胞的细胞膜包在里面形成前芽孢,这时抗辐射性提高;
10、皮层形成。双层膜间合成并充填芽孢肽聚糖后,合成DPA,积累钙离子,产生DPA-Ca复合物,形成皮层,再经脱水,使折射光率增高。部分芽孢细菌开始形成孢外壁;芽孢衣形成。在皮层外进一步形成以特殊蛋白质为主的芽孢衣;芽孢成熟。芽孢合成过程全部完成,此时芽孢具有很强的抗热性和特殊结构;芽孢释放。芽孢囊裂解,释放出成熟的芽孢。c.功能:有助于产芽孢细菌度过困境;芽孢的有无及形态是细菌分类鉴定的重要指标。d.萌发条件:营养物质丰富时,适温下吸水膨胀,孢子壁溶解,逐渐成为营养细胞,进入繁殖周期。8 试述间歇灭菌法的原理和用途.答:间歇灭菌法:常压下煮沸(100)1530min(杀死营养细胞),室温过夜(芽孢
11、萌发)。如此重复3次,可以杀灭所有营养细胞和芽孢9 试述细菌质粒的特点及其功能.答:质粒的特性:不同质粒间、质粒与染色体间可以发生基因重组质粒可以自行消失,也可通过结合、转化从一个细菌传给另一个细菌质粒可以自我复制,稳定遗传;也可携带外源基因,一起复制、遗传;还可以完全整合到染色体上,与之一起复制、遗传。功能: R因子(抗药性因子): 与抗药性有关F因子(致育因子):与有性接合有关其他质粒:与抗生素、色素合成有关基因工程中作为目的基因载体。10 什么叫菌落特征?细菌的菌落特征包括哪些方面?l 答:菌落特征:一个微生物细胞在固体培养基上生长繁殖形成的肉眼可见的细胞群落的特征。细菌的菌落特征:湿润
12、,较光滑,多半透明,易用接种环挑起;有腐臭味,有荚膜菌,菌落十分光滑、透明、蛋清样、较大;有鞭毛菌的菌落扁平、边沿不规则。11 简述细菌菌落的主要特征。答:细菌的菌落特征:湿润,较光滑,多半透明,易用接种环挑起;有腐臭味,有荚膜菌,菌落十分光滑、透明、蛋清样、较大;有鞭毛菌的菌落扁平、边沿不规则。第三章 真核微生物1 什么是真菌、酵母菌、霉菌?真菌: 单细胞或多细胞异养真核微生物,无光合色素,细胞壁含几丁质和纤维素。酵母菌: 一、单细胞真菌的通称 二、分属于子囊菌纲及半知菌类三、多数出芽繁殖少数裂殖或产子囊孢子四、细胞壁含匍聚糖和甘露聚糖喜含糖量高、酸性的水生环境生长霉菌: 凡在基质上长成绒毛
13、状,蛛网状,或棉絮状菌落的真菌通称为霉菌。2 真菌的繁殖方式有哪些?(一)酵母菌的繁殖方式: 无性繁殖 芽殖:不等二分裂 裂殖:均等二分裂 产无性孢子掷孢子等有性繁殖 产子囊孢子(有有性生殖的叫真酵母)(二)霉菌的繁殖方式:无性繁殖:无性孢子、段殖( 孢囊孢子、分生孢子、厚垣孢子、节孢子)有性繁殖:两性细胞结合、质配、核配、形成合子、减数分类形成单倍体细胞或孢子(卵孢子、接合孢子、子囊孢子) (三)大型真菌(覃菌)(一)无性繁殖 芽殖 菌丝断裂 分生孢子 节孢子 粉孢子(二)有性繁殖 担子菌的有性繁殖是形成担孢子。 担孢子着生于棍棒状的担子上。担子起源于双核菌丝的顶端细胞,经过锁状联合之后,顶
14、端细胞逐渐膨大,双核进行核配, 经减数分裂后产生4个单倍体核。4 试列表比较根霉、毛霉、曲霉和青霉的菌落特征和产孢结构形态根霉毛霉曲霉青霉菌落特征生长迅速,菌落很松疏,蛛网状,有色泽。菌丝无隔多核,有葡匐菌丝和假根生长迅速,菌落大而松疏,绒毛状,有色泽。菌丝无隔多核有隔菌丝。菌落棉絮状有隔菌丝,营养菌丝体无色、淡色或具鲜明颜色。产孢结构以胞囊孢子做无性繁殖为主,有性繁殖为接合孢子以胞囊孢子做无性繁殖为主,有性繁殖为接合孢子分生孢子序头状,分生孢子梗基部为一足型细胞分生孢子梗亦有横隔,光滑或粗糙有少数种产生闭囊壳,内形成子囊和子囊孢子,亦有少数菌种产生菌核。3 细菌、放线菌、酵母菌和霉菌各有何特
15、点,试列表比较其细胞结构、菌落特征5 图示酵母菌3种生活史类型(以核型表示)6 名词解释:菌丝、菌丝体、真酵母、芽殖、单细胞蛋白菌丝:单条管状细丝,为大多数真菌的结构单位,一些原核生物也有菌丝,如放线菌可分为无隔菌丝和有隔菌丝两类。菌丝体:由许多菌丝连结在一起组成地营养体类型叫菌丝体。真酵母:有性生殖的酵母菌叫做真酵母。芽殖:是酵母菌最常见的无性繁殖方式。就是在成熟的酵母细胞上长出一小芽,芽细胞长到一定程度,脱离母细胞继续生长,而再出芽产生新个体的繁殖方式。单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物
16、、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。7 真菌在分类学上分为哪三纲一类?藻状菌纲:无隔菌丝,产无性胞囊孢子,如,如毛霉、根霉等子囊菌纲:有隔菌丝,产有性子囊孢子,如啤酒酵母担子菌纲:有隔菌丝,产有性担孢子,如伞菌半知菌类:有隔菌丝,未发现有性期;无性分生孢子繁殖。如青霉、曲霉、木霉第四章 病毒1 病毒是一类什么样的生物,有什么特点?病毒是亚显微的可滤过的大分子生物,约10100nm,形态有杆状、颗粒状、蝌蚪状、丝状、砖状、盘状等1.形态极其微小(100nm),必须在电镜下才能观察,一般都具过滤性 亚显微的可滤过的感染因子2.没有细胞构造,故也称分子生物;3.其主要成分仅是核酸和蛋白质两种
17、;4.每一种病毒只含一种核酸,不是DNA就是RNA;5.既无产能酶系,也无蛋白合成系统;6.在宿主活细胞内营专性寄生,利用宿主细胞的原料、酶系、能量和设备进行增殖,不存在个体生长、发育、二均分裂,以复制繁殖7.在离体条件下,能以无生命的化学大分子状态存在,并可行成结晶; 8.对抗生素不敏感, 对干扰素敏感.2 试述病毒的化学组成(一) 病毒化学组成概述 1 大多数病毒粒子只有蛋白质和核酸构成2 具囊膜病毒粒子还含有生物膜 3 有点噬菌体含脂肪4 绝大多数种类病毒粒子只含一种核酸,但有发现含多条的5 有些病毒粒子含金属离子等(二) 病毒的蛋白质1.构成病毒外壳,保护病毒核酸免受核酸酶及其他理化因
18、子的破坏2.决定病毒感染的特异性,与易感细胞表面存在的受体具特异亲合力,促使病毒粒子的吸附3.决定病毒的抗原性,并能刺激机体产生相应的抗体4.少数病毒衣壳中含有一些专用酶,如噬菌体带溶菌酶,流感病毒带神经氨酸酶,劳氏肉瘤病毒带逆转录酶(三)病毒的核酸1.DNA,RAN之一2.单双链(single strand,ss/double strand,ds)之分 3.环状,线状之分(闭合,开放) 4.正负链之分。(正链:与mRNA同序的链)5.基因组是单分子、双分子、三分子、多分子(多组分体系)6.多数DNA病毒为开链双链DNA病毒7.多数RNA病毒为单链开链RNA病毒8.多数植物病毒为 RNA病毒9
19、.多数噬菌体为DNA病毒10.动物病毒DNA、RNA均常见(四)其它化学成分脂类糖类金属离子3 图示并说明具囊膜病毒粒子的结构病毒粒子:一个成熟的、具有侵染性的、结构和功能完善的病毒个体基本结构:为核衣壳,核酸处于中心,被由蛋白质构成的衣壳包裹。衣壳由蛋白质颗粒(衣壳粒)按一定的方式排列而成)具囊膜病毒:有些病毒粒子外面还有一层囊膜( envelope )(来源于寄主细胞膜,上有病毒编码的蛋白颗粒膜粒)。4 试以E. cili T4为例图示并说明噬菌体的繁殖过程l吸附:病毒表面的结合蛋白与细胞的受体蛋白形成专一结合。病毒有较严格的宿主专一性l侵入与脱壳:病毒粒子进入细胞并蜕去衣壳,关键是病毒核
20、酸进入细胞。囊膜和衣壳脱去,核酸释放,病毒粒子解体l生物合成:病毒核酸转录、复制、蛋白合成。由病毒遗传信息“指挥”,细胞执行,合成出多套病毒核酸和衣壳蛋白l装配:生物合成的多套病毒核酸和衣壳蛋白组装成很多完整的病毒粒子。依靠生物大分子间的分子作用力自动完成l释放:病毒粒子从细胞中释放,(再去侵染周围的其它细胞)。裂解式:细胞破裂,病毒粒子一起释放,出现一步生长;温和式:细胞不死不破,病毒粒子逐步释放,囊膜病毒此时获得囊膜5 解释温和噬菌体、原噬菌体,图示并说明温和噬菌体的繁殖方式和过程 根据噬菌体与宿主细胞的关系可分为烈性噬菌体和温和噬菌体两类。温和噬菌体进入菌体后,因生长条件不同,可具有两条
21、截然不同的,可选择的生长途径。一是与烈性噬菌体相同的生长路线,引起宿主细胞裂解死亡;另一条是温和噬菌体主要的繁殖途径被称为溶源化周期,是病毒请入宿主细胞后,将其核酸附着或整合到细菌染色体上,成为原始菌体,与细胞染色体一起复制,并传给子细胞,被感染细菌细胞继续生长繁殖,并被溶源化,所以叫温和噬菌体。 温和噬菌体侵入宿主细菌细胞后,主要进行溶原化繁殖途径。l 1.有些噬菌体侵入细菌后,其核酸能整合到细菌染色体上, 成为前噬菌体,与细菌染色体一起复制、一起传给子细胞。这类噬菌体称为温和噬菌体,这种繁殖途径称为溶原化途径;含有前噬菌体的细菌称为溶原化细菌。 2. 前噬菌体偶尔会脱离细菌染色体,自行消失
22、,或进入裂溶源菌解途径大量繁殖,裂解细菌6 什么叫溶原细菌,有什么特性?含有温和噬菌体的DNA而又找不到形态上可见的噬菌体粒子的宿主细菌叫做同源性细菌或溶源化细菌特点:1 溶源性是溶源性细菌的一个极其稳定的遗传特性。 2 自发裂解 在没有任何外来噬菌体感染的情况下,极少数溶源体细胞中的原噬菌体偶而也可以恢复活动,进行大量复制,成为营养噬菌体核酸,并接着成熟为噬菌体粒子,引起宿主细胞裂解,这种现象称为溶源性细菌的自发裂解。 3诱发裂解 用某些适量的理化因子入h2o2 处理溶源性细菌,能导致原噬菌体活化,产生具感染力的噬菌体粒子结果使整个细胞裂解并释放出大量噬菌体粒子。 4 具“免疫性”即溶源性细
23、菌对其本身产生的噬菌体或外来的同源噬菌体不敏感,这些噬菌体虽然可以进入溶源性细菌,但不能增值,也不能导致溶源性细胞裂解。 5 溶源性细菌的复愈 溶源性细胞有事消失了其中的原噬菌体变成非溶源细胞 6 溶源性细菌还可以获得一些新的生理特性,如白喉杆菌含有某些原噬菌体时可以产生白喉毒素,引起被感染机体发病。7 名词解释:病毒、亚病毒、包含体、空斑、枯斑、类病毒、拟病毒、朊病毒病毒 是亚显微的可滤过的大分子生物,约10100nm,形态有杆状、颗粒状、蝌蚪状、丝状、砖状、盘状等亚病毒 凡在核酸和蛋白质两种成分中,只含有其中一种的分子病原体类病毒 是寄生于高等生物细胞中的一类比病毒更简单的病原体,没有蛋白
24、质,只为小分子侵染性RNA,有类似病毒的一面,故称类病毒。目前只在植物中发现。拟病毒又称类类病毒、壳内类病毒或病毒卫星,是包裹在动植物病毒粒子(真病毒,辅助病毒)中的小分子核酸 ,其复制必须依赖辅助病毒。朊病毒 传染性海绵状闹病得病因 ,是一类蛋白酶抗性蛋白,由宿主基因编码的,但可能有两种构像;非致病性构象和致病性构象。包含体 有些病毒,一个或多个病毒粒子被一个由蛋白质组成的共同外壳包裹在一起,叫包涵体,起到保护病毒的作用。空斑 枯斑 第五章 微生物的营养1,什么是营养,营养物质?答:营养(nutrition):生物生长发育中,不断从外界环境吸收物质(营养物质)并加以用,用于构建细胞物质或获取
25、能量的过程 营养物质:生物从环境中吸收的有用物质,包括结构物质、能源物质、代谢调节物质。2,微生物五大营养物质及功能。答:(一)碳源(carbon source):凡能构成微生物细胞或代谢产物中碳架来源的营养物质都称为碳源 。碳源功能:(1)构成细胞及代谢产物的骨架 (2)是大多数微生物代谢所需的能量来源 碳源种类l 无机C源:CO2、碳酸盐,只能被自养微生物利用l 有机C源:各种糖类,其次是有机酸、醇类、脂类和烃类化合物 l 实验室常用:葡萄糖、果糖、蔗糖(二)氮源(nitrogen source):凡是可以构成微生物细胞和代谢产物中氮素来源的营养物质都称为氮源。氮源功能: N来源;氮源一般
26、不做能源,只有硝化细菌利用铵盐、亚硝酸盐作氮源,同时也作能源氮源种类l 分子态氮:固氮微生物以分子氮为唯一氮源 l 无机态氮:铵盐几乎所有微生物能利用,硝酸盐l 有机态氮:蛋白质及其降解产物a速性(效)氮源:实验室常用牛肉膏、蛋白质、酵母膏做氮源 b迟性(效)氮源:生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等。 (三)无机盐(mineral salts) 无机盐功能l 构成微生物细胞的组成成分l 调解微生物细胞的渗透压, pH值和氧化还原电 位l 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 l 构成酶活性基的组成成分,维持酶活性。Mg、Ca、K是多种E的激活剂 无机盐种类l Ca、K 、Mg、Fe为
27、大量元素,以无机盐阳离子形式被吸收,配培养基进要加磷酸盐、硫酸盐。l Zn、Ca、Mn、Co、Mo等微量元素,在微生物培养中有0.1PPM就可以了,多数存在于其它原料中,不需另加。(四)水水的作用:l 是细胞中生化反应的良好介质,营养物质和代谢产物都必须溶解在水里,才能参与细胞代谢l 维持细胞的膨压(控制细胞形态)(五)生长因子(growth factor):某些微生物不能合成且生长不可缺少的微量小分子有机物质叫生长因子。(1) 维生素有的微生物自己不能合成某些维生素,需要外加,主要是B族维生素、硫胺素、叶酸、泛酸、核黄素等,如生产味精需加生物素(是B族中的一种即VH)。 (2) 氨基酸有些微
28、生物自己不能合成某种AA,必须给予补充,如赖AA发酵所用的黄色短杆菌不能合成环丝AA,为环丝AA缺陷型菌株,在培养基中必须添加含环丝AA的氮源。如豆饼水解液或毛发水解液等。(3) 碱基l 嘧啶和嘌呤是核酸和辅E的重要组分,是许多微生物必须的生长因素。l 有些微生物不仅不能合成嘧啶和嘌呤,而且不能将补充的嘧啶和嘌呤结合在核苷酸上,还必须供给核苷酸,有的菌需补充卟啉或其衍生物,还有的菌需供给(低碳)脂肪酸等。3 试述配置培养基的原则答:(1) 要适合微生物的营养特点:l 微生物种类、营养类型、腐生或寄生l 实验室常用培养基:细菌用牛肉膏蛋白胨培养基;酵母菌用麦芽汁培养基;放线菌用高氏培养基、霉菌用
29、查氏培养基等(2) 使营养物质浓度适宜、配比得当l 浓度:一般不宜高浓度,高渗抑菌l 配比:主要考虑C/N,尤其要考虑充分利用N源,实验室一般为2:1(3) 要有适当的pH值l 不同微生物尤其最适生长pH值l 要考虑培养过程中微生物代谢产物对pH值的改变(4) 要根据培养目的配制l 需要菌体,N源适当提高,利于蛋白质合成l 如需要代谢产物,则适当增加前体物质(5) 经济原则原料价廉、来源广、易制4 以能源和碳源的不同,可把微生物分为哪些类型?答:(一)自养微生物:可以完全在无机环境中生存,以CO2、碳酸盐为碳源,以铵盐和硝酸盐为氮源来合成细胞质的微生物称为自养微生物。(1) 光能自养微生物(光
30、能无机营养型):可在完全无机的环境中生长,以CO2为碳源,光做能源,无机物为供H体还原CO2合成细胞有机物质的微生物叫光能自养微生物。(2) 化能自养微生物:在完全无机的环境中生长发育,以无机化合物氧化为时释放的能量为能源,以CO2或碳盐为碳源,合成细胞物质的微生物叫化能自养微生物。这类细菌包括硫细菌、硝化细菌、H细菌、铁细菌等,硫细菌和硝化细菌与生产密切相关。(二)异养微生物(有机营养型):以含碳有机物为碳源,含氮有机物或无机物为氮源,合成细胞物质,称为异养微生物。(1)光能异养微生物:这类微生物具有光合色素。能利用光做能源,以有机化合物为供H体,还原CO2,合成细胞物质的微生物,称光能异养
31、微生物。光能异养微生物能利用CO2,但必须在有机物存在的条件下,才能生长,人工培养还需供给生长因素。目前已用这类微生物,如红螺菌来净化高浓度有机废水,这对处理污水、净化环境,很有发展前途。(2)化能异养微生物(化能有机营养型):微生物的主要营养类型,这类微生物以有机化合物为碳源,利用有机化合物氧化过程中产生的能量为能源。这类微生物称为化能异养微生物。由于栖息场所和摄取养料方式不同,可将异养微生物分为腐生型和寄生型两大类:腐生型:从无生命的有机物获得营养物质;寄生型:从活的寄生体内获取营养物质;中间类型(兼性腐生或兼性寄生):如结核杆 地菌、痢疾杆菌就是兼性寄生菌。5 试述培养基的主要类型及其特
32、点、应用范围答:(1) 根据微生物的种类细菌培养基 、放线菌培养基、霉菌培养基 、酵母培养基 (2) 按培养基的成分l 合成培养基:由化学成分清楚的化学试剂配制l 半合成培养基:利用一些化学成分不清楚或不恒定的物质配置l 天然培养基:用天然有机物质配制3 按培养基的物理状态l 固体培养基 :加1.82.0%琼脂等l 半固体培养基 :加0.30.5%琼脂等l 液体培养基: 不加凝固剂固体培养基:琼脂固体培养基 、明胶培养基、硅胶固体培养基、天然固体基质琼脂固体培养基(加1.52.0%):n 琼脂是由红藻门石花菜江蓠等藻类中提取的胶体多糖。u 琼脂的化学成分主要为多聚半乳糖硫酸上下酯,熔点96,凝
33、固点是4050。u 琼脂培养基可反复溶化凝固而不变性质。u 绝大多数微生物不水解琼脂。液体培养基不加凝固剂的培养基,营养物质分布均匀,微生物能与营养物质充分接触,利用适合积累代谢产物。多用于生理研究和发酵工业生产中。另外,病毒与立克氏体,衣原体不活细胞专性寄生微生物,常用鸡胚培养法和动物培养法进行培养。(4) 按培养的特殊用途分 l 基本培养基:根据大多数微生物的营养需要配制一种培养基,称为基本培养基。使用时再根据需要加入其它成分l 加富培养基:是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取物,用来培养要求较苛刻的某些异养微生物,如支原体。l 选择培养基:根据某些微生物的特殊营养需求配制;或在培养基
34、制加入一些抑制非目的菌的试剂,如某些抗生素,达到使目的菌良好生长而其它微生物受抑制的选择效果l 鉴别培养基 :在培养基制加入某种试剂,它能与某些微生物的代谢产物反应而显色、产生沉淀等,从而达到鉴别微生物的作用第六章 微生物的代谢1 酶是什么,有和特点?催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。是生物催化剂,能通过降低反应的活化能加快反应速度,但不改变反应的平衡点。绝大多数酶的化学本质是蛋白质。具有催化效率高、专一性强、作用条件温和等特点。l 酶、酶的组成、简单酶、复合酶(全酶)l 专一性、高效性、受调节性l 组成酶:细胞随时需要的、不停地产生的酶l 诱导酶:在诱导物(前体及其类似物)存在时才
35、产生地酶。2 什么是胞外酶?主要胞外酶有哪些?细胞内合成而在细胞外起作用的酶。胞外酶:淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、果胶酶、纤维素酶3 试述巴斯德效应及其原理,对发酵有何指导作用?巴斯德效应:向发酵葡萄糖的酵母菌悬液中通入空气(O2),发酵过程减慢,乙醇产生停止,葡萄糖消耗减慢(利用率提高)。分子氧对发酵的这种抑制作用叫巴斯德效应巴斯德效应对实践的指导意义:生产乙醇、啤酒时,隔绝空气(O2),使单位原料产生更多发酵产物,并加快原料转化。一般是前期通气,产生一定量的菌体,中后期不通气,利于乙醇发酵需要菌体时,需通气培养,以利于单位原料产生更多菌体4 葡萄糖经糖酵解途径在好氧条件下是如何氧化彻底的?产能
36、结果如何? C6H12O6+ 38ADP +6O2=6CO2+6H2O38ATP产能量多,一分子G净产38个ATP5 名词解释:初级代谢、次级代谢、好氧微生物、厌氧微生物、兼性厌氧微生物初级代谢:维持细胞生命活动必须的代谢活动次级代谢:某些微生物在一定生长时期出现的一类代谢,可能是细胞生命活动非必需的好氧微生物:需O2,行有氧呼吸,液体培养时需通气厌氧微生物:不需O2, 行无氧呼吸或发酵 兼性厌氧微生物:有O2时行有氧呼吸,无氧时行发酵,如酵母菌第七章1 名词解释:灭菌、消毒、分批培养、连续培养、效应巴斯德、代时、微生物生长、耐氧菌、巴氏消毒法、间歇灭菌法、抗生素、防腐、答:灭菌:杀死物体上全
37、部微生物的方法 消毒:杀死或消除物体上的病原微生物的方法 分批培养:将微生物置于一定容积的培养基中培养,最后一次收获 连续培养:将微生物放在恒定容积的流动系统中培养,连续添加培养基,并以相同速度取走培养物 巴斯德效应:巴斯德发现有氧氧化抑制了无氧酵解,是因为有氧氧化产生了较多ATP抑制了无氧酵解的一些酶,有利于能源物质的经济利用。 代时:是指细菌细胞两次分裂之间的间隔时间。 微生物生长:指微生物获得营养后,通过代谢活动而使得其自身生长和繁殖,体现为细胞质量或数量的增加。 耐氧菌:不需要氧气,只以发酵产能,氧气对其无毒害巴氏消毒法:用较低的温度处理牛奶、酒类等饮料食品,以杀死其中的病原菌和降低腐
38、败微生物数量,但有不损害食品的营养与风味。间歇灭菌法:利用流通蒸汽重复几次热处理的灭菌方法。将待灭菌物品置于100蒸汽处理1530min,以杀死其中的营养细胞;冷却,再置于一定温度保温过夜,是其中可能残存的芽孢萌发长成营养细胞,在以同样方法加热处理,如此反复三次,即可以杀死所有微生物的营养细胞及其芽孢。抗生素:微生物产生(有的可以人工合成或半合成),抑制或杀死其他细胞的有机化合物。防腐:用理化方法防止/抑制微生物生长的方法2 试述主要灭菌方法及其原理、优缺点、应用范围 答:高温灭菌原理:多数细菌,酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 º10 min可以致死。一般噬菌体6580 &
39、#186;致死,放线菌霉菌的孢子比营养细胞抗热性强,7680 º10min可以杀死细菌芽孢,在121 º下515min才能致死。高温灭菌有湿热灭菌,干热灭菌,焚烧灭菌,烘烤灭菌3 试述微生物液体培养过程中pH值变化原因及控制措施 答:PH值变化的原因是代谢产物的积累控制措施:在培养基中加入缓冲物4 兼性厌氧微生物为什么在有氧和厌氧条件下都能生长 答:兼性厌氧微生物能以氧化磷酸化或以发酵来提供生长的能量需要,其某些种类能利用硝酸盐等非氧成分作为电子受体,而且当兼性需氧微生物以厌氧条件代替有氧条件生长时,它们的生理状况也发生变化。5 试举例说明抗生素杀菌机理 答:抑制细胞壁的形
40、成:青霉素干扰蛋白质合成:链霉素、金霉素、土霉素、四环素抑制核酸复制:增光霉素、丝裂霉素、放线菌素D影响细胞膜的功能:多粘菌素破坏 G-细胞膜;制霉菌素破坏真菌细胞膜6 试述稀释倒平皿菌落计数法的原理并图示操作步骤 答:把菌液稀释后,取一定量混合倒平板或涂布平板,培养后,每一个活细胞就形成一个菌落,此即菌落形成单位(colony forming unit,cfu)。根据每皿上cfu数推算出样品含活菌数7 什么叫生长曲线?图示并说明单细胞微生物典型生长曲线的特点、成因及其对发酵生产的指导作用 答:生长曲线:定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的曲线单细胞微生物的典型生长曲线:把少量纯种单细胞微
41、生物接种到恒容积的液体培养基中,在适宜条件下培养,以细胞数目的对数对时间作图所得曲线。根据生长速率不同可分为延滞期、指数生长期、稳定期和衰亡期 生产上:缩短延滞期,可以缩短生产周期,提高设备利用率。利用对数期的细菌种子做实验材料,延长稳定期以获得更多的代谢产物,避免衰亡期的出现。8 利用酒精酵母液体发酵生产乙醇,是否要求整个过程通气?是否采用相同pH值和温度?为什么? 答:酒精酵母液体发酵生产乙醇不需要整个过程通气,在酵母菌繁殖阶段需要通入适量的空气以供酵母菌繁殖,在发酵阶段则不需要通入空气;整个发酵过程中需要不断的调节PH值和温度,因为不同的阶段,酵母菌的最适温度和PH值都是不同的。9 从1
42、96到170 ,与微生物学工作关系密切的温度(范围),有哪些?(提示:生长、抑制、杀灭、菌种保藏)答:生长温度:细菌:37 放线菌、酵母菌: 28 霉菌:26 抑制温度:0一下的低温能够微生物的生长 杀菌:酵母菌和霉菌的营养细胞和病毒在50-65 º10 min可以致死。一般噬菌体6580 º致死, 放线菌霉菌的孢子比营养细胞抗热性强,7680 º10min可以杀死 ;细菌芽孢,在121 º下515min才能致死 菌种低温保藏: 冷藏:4,冰箱 冻藏:20 ,冰箱 超低温: 80 ,超低温冰箱 196 ,液氮,液氮罐第八章 微生物的遗传1 名词解释:转化
43、、转导、结合、基因工程、菌种保藏、菌种衰退。答:a.转化:受体细胞直接吸收了来自供外源DNA片断,并把它整合到自己的基因组中,细胞部分遗传性状发生变化的现象叫转化。 b. 转导: 外源遗传物质通过噬菌体的携带进入受体细胞,并与受体染色体发生基因重组.c. 结合: 供体菌通过性菌毛传递不同长度的单链DNA给受体菌,在后者细胞中发生交换、整合,从而使后者获得新的遗传性状的现象。d. 基因工程:利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因,或是用人工方法合成基因,然后将其转入适当的受体细胞,以期获得基因表达的过程。e. 菌种保藏: 采用一定方法对科研和生产菌种、菌株加以妥善保管,使之不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使用。f. 菌种衰退: 菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产性状的劣化
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