植物生物技术导论复习思考题

1、植物生物技术导论复习思考题201606植物生物技术导论复习思考题名词解释名词解释植物生物技（广义概念）提高和改良农作物产量、品质的所有技术。（狭义概念）利用植物器官、组织、细胞和通过分子水平的操作、促进植物繁殖、有用物质生产和植物品种遗传改良的技术。离体授粉植物的离体授粉也叫离体受精或试管受精，就是在人工控制条件下使离体的胚珠或子房完成授粉、受精形成种子的过程。植物的离体授粉技术一般包括“胚珠试管受精”、“离体子房授粉”和“雌蕊离体授粉”3个方面。T-DNA转移-DNA区。长度大约在15?30kb,是根癌农杆菌侵染植物细胞时从Ti质粒上切割下来转移并整合到植物基因组的一段DNA植物细胞组在离体

2、条件下利用人工配制的培养基对织培养植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，在适宜的培养条件下,同工酶长成完整植株的过程。是功能相同的酶的多重分子形态，它们是特异的基因产物。体细胞胚在愈伤组织表面或内部形成类似于合子胚的结构，称其为体细胞胚，或不定胚,或胚状体。直物细胞全能一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息。在适宜的条件下能够形成完整植株的能力。是指将植物单细胞或细胞团直接在培养悬浮基中进行培养的一种培养方式。是指将游离的单细胞或细胞团按照的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。脱分化是在植物组织和细胞培养中，一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程，即形成愈伤

3、 组织的过程。伤组织在植物组织和细胞培养中，愈伤组一£细月则指在人工培养基上，由外植体形成的日无序生长、无特定结构和功能的薄壁包。花粉培养在人工配制的培养基上，将从花药中游离出来的花粉，单独进行培养，获得完整植株。不定器官在愈伤组多定根和不定珀勺不同部位分别独立形成不芽。秀发融合原生质体融合过程中，需要使用适当的融合剂或机械方法，将不同的原生质体聚集到一起，使其粘连，融合，形成异核体。A工种子指通过植物组织培养的方法获得具有正常发育能力的材料，外面包被有特定物质，在适宜条件下可以发芽成苗的植物幼体。外植体在来（组2植物组多1勺，接种只、器官（培养中，从活体植物上提取下在培养基上培养的

4、无菌细胞、等统称为外植体。氐温保存又称最小生长法，是将外植体所再生的试管苗在低温条件下，结合某些特定的培养基如增加蔗糖浓度、添加甘露醇、山梨醇、脱落酸（ABA等生长延缓因子，辅以培养环境的调控，从而抑制或延缓生长，延长寿命，达到保存种质的目的。报告基因能快速报告细胞是否被转化的基因，大多是一些水解酶基因如：（3-葡萄糖醛酸甘酶基因（gus）、氯霉素乙酰转移酶基因（cat）、3-半乳糖甘酶基因（lacZ）、荧光素酶基因（luc）等；农杆碱合成酶基因、绿色荧光蛋白基因（gep、等。体细胞杂交指将植物不同种、属，甚至科间的离体细胞通过定诱导技术使质膜接触而融合在起随后导致两个细胞核物质融合，通过离体

5、培养，使其再生杂种植株的技术。又称原生质体融合。超低温保存将植物的离体材料包括茎尖（芽）、分生组织、胚胎、花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等，经过一定的方法处理后在超低温（-196C）条件下进行保存的方法。1胞悬浮培、户是指将游离的单细胞或细胞团按照一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。基因枪法又名微粒轰击法，通过高速飞行的金属颗粒将包被其外的目的基因直接导入到受体细胞内，从而实现遗传转化的一种方法。1、填空题填空题答案H物组多（培养中，培养基的主要组分有、水、无机成分、有机成分、植物生长调节物质脱分化的细胞再分化出完整植株后两种途径：或。不定器官形成、器官形成物组多（培养中的发展

6、简史一阶段探索、八是、。奠基、迅速发展植物细胞培养中，震荡的主要作用有、使愈伤组织破碎成小细胞团或单细胞、使细胞团和单细胞均匀分布于培养基中、促进气体交换pj°培养细胞活力的测定方法主要有：、4四口坐盐还原法(TTC)、荧光素二乙酸法（FDA、曝口坐蓝法（Mil法）&（小抱子）培养的方法主要有：、液体浅层培养、平板培养法、微室悬滴培养法、°植物细胞组织培养的基本设备有、准备室、无菌操作室、培养室直物组织培养中，外植体的种类_、°根、茎、叶、花、果实"物组织培养的关键环节主要脱分化、有、等。再分化、试管苗的驯化t响植物组织培养的因素主要有1、光照、

7、温度、湿度、气体植物基因克隆的方法有、化学法合成、从基因文库中钓取、PCRT增、图位克隆方法pj°愈伤组织形成经历一个阶段：、和诱导、细胞分裂、细胞分化OH物生物技术常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌或表面消毒灭菌、过滤灭菌看护培直物细胞培养的方法有养、悬浮培养外源基因导入植物细胞的方法有基因枪法、农杆菌介导法、聚乙二醇法、 电击法 单倍体 植株 RFLRALFRSSR由花粉培养获得的再生植株是。DNA分子标记主要有、等。人造种等部分皮、人造胚乳、发芽材料形态学、体细胞杂种的鉴定方法细胞学、同工酶、分子生物离体授粉的类型主要有:离体雌蕊授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉无性系是用植

8、物体细胞繁殖所获得的后代植物遗传转化的方法主要有基因枪法、农杆菌介导法、花粉管通道法、电击法“物细胞增殖的测定指标主要有、细胞鲜重、细胞干重、细胞密实体积、细胞植板率等。（其他答案：细胞计数、细胞有丝分裂指数）,去植物病毒常用的方法有：、热处理脱毒、茎尖培养脱毒、微体嫁接、°脱毒（其他供选择的答案有：热处理结合茎尖培养脱毒、抗病毒药剂脱毒等）植物组织培养中，愈伤组织诱导的二个阶段是、。启动期、植物种质资源离体保存的方法主要有：、等分裂期、分化期超低温保存、低温保存、干燥脱水法保存（备选答案有:包埋脱水法保存、玻璃化法保存、常温保存等）植物小抱子在离体培养条件下的发育途径主要有：、等。

9、直物组织培养中，脱毒苗的检测方法有营养细胞发育途径、生殖细胞发育途径、营养细胞和生殖细胞并进发育途径（还可以填花粉均等分裂途径）指示植物法、工简答题简答题答案可从(1)培养基的成分;简述植物(2) 外植体；(3) 培养条件三个方面分析。培养程中的响因素。显微镜鉴 定法、抗血 清鉴定法简述离体 培养条件 下小抱子 ，发育。可从(1)营养细胞发育途径；(2)生殖细胞发育途径；径;(3)营养细胞和生殖细胞并进发育途(4)细胞均等分裂途径等方面阐述。被真菌等微生物污染的玻璃器皿，必须在简述被微121C高压蒸汽灭菌30min后，倒去残渣，用生物污染毛刷刷去瓶壁上的培养液和菌斑后，用水冲液后的玻璃干净后，

10、浸泡在洗涤液中，洗刷后，再用自来水冲液，蒸储器皿应该水冲淋一遍后，晾干备用。如何清洗。主要有限制性片段长度多态性标记非PCRft(AFLP和染色体原位杂交两种。可展开阐述。赖的分子标记三要有几种?简述体细体细胞杂交(somatichybridization)胞杂交的，在植物中亦即原生意义。质体融合(protoplastfusion),利用适当的物理或化学方法，可以将任何两种原生质体融合在一起；利用适宜的培养方法，可以由融合原生质体再生出杂种植株即体细胞杂种。克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离、扩大遗传变异等(适当展开论述)。火菌方法主要有蒸汽火菌、图温空气灭菌、过植物组织滤灭菌、

11、灼烧灭菌、辐照灭菌等。可简要将每培养中，灭种方法阐述。菌方法主要有哪叱2从植物材料的选择一分离原生质体一原生质简述原生体纯化一原生质体培养这几个环节加以简述质体分离培养的主要过程。可从(1)培养基的成分；影响细胞 悬浮培养 的因素。简述花药 培养和花 粉培养的 异同。(2)外植体的选择；(3)植物生长调节物质；(4)培养条件等方面进行阐述。(1)花粉培养属细胞培养；花药培养为器官培养。(2)花粉培养排除了药壁、药隔和花丝的干扰，从小抱子中获得的材料是纯合的；花药培养存在药壁等二倍体细胞对小胞子发育的的干扰，获得的材料可能是杂合的。(3)花粉培养中小抱子能均匀地接触化学和物理诱变因素，是研究吸收

12、、转化和诱变的理想材料；花药培养中小胞子接触的诱变因素不均匀。(4)花粉培养可观察到雄核发育的全过程，是研究遗传和发育的很好材料体系；花药培养对雄核发育的全过程难于观察。(5)花粉培养可以从每个花药中获得更多的单倍体；花药培养获得的单倍体少。简述花粉管通道法导入外源基因的原Ho可从(1)花粉管通道法概念(又名子房注射法，花窠注射法，柱头涂抹法，蘸花法。它是利用开花植物授粉后形成的花粉管通道，直接将外源目的基因导入尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚细胞，实现目的基因遗传转化的一种方法)；(2)花粉管通道法导入外源基因的步骤进行阐述。简述RAPD的基本实验步"聚。从以下方面叙述：DNA

13、勺提取模板DN傩度和质量的检测PCRT增电泳检测：PC时束后每个样品加4ul凝胶上样缓冲液，每个泳道点样20ul。将凝胶浸于1ug/ml的EB中30min?60min,用水清洗约10min,观察、拍照。统计分析：记录条带清晰的RAPD条带,计算带纹相似率；计算带频率、群内遗传纯度;DNAt段大小。简述几种 转基因植 物材料的 检测方法。的表达对转基因植物生物化学万法检测。主要检测法、Southern杂杂交法、Western杂交生物学鉴定等。(1)报告基因告基因能快速报告细胞特点，来检测转基因植(2) Southerr利用两条单高隹门DN电源DNA勺转化结果，源基因是否转在于果该检不能得到基因是

14、否表达(3) Northern测外源基因转录出来的法是Alwine于19力法能检测转化基1mRNA在转录水平上调控。(4) Western?中目的基因物学方 法和生有：，报告基 因交法、Northern X 法、PC昉法、检测 被转化的报悭材料 的万要是？补性，来 检测外该方法 Southern万法植株 中验证转的杂交息。用于检mRNA该方年发 明的。该万因是否转 录出1基因的表达和杂交法：是将外固质从持体DS聚源基因转录并翻译的蛋丙烯酰胺凝胶中转移到然后测定。该方法只能验证转化存在在蛋白质水平上的正常表达。一口(5)PCRJ法：在一种耐图温的DNAI合酶作用下，通过引物和模板DNA4行多聚酶

15、链式反应(PCR来是增存在行被聚万1式能验证不能基得到基因是否表达的信息。该方法比Southern杂交法简单。(6)生物学鉴定：对转、基因植物的生物学性状进行观察，鉴定基因的功能和表型，是否稳定地遗传给后代。该方法能验证基因是否能正常地表达，是否稳定遗传给后代。四、论述题答案简述DN粉子标记在植物研究中的应(1) 比较生物的遗传变异性，从 究亲缘、进化关系。而研(2)构建遗传连锁图，进行分子 辅助选择。标记(3)构建遗传图谱，进行基因定 克隆。位、论述题例如:RFLP-(restrictionfragmentlengthpolymorphism）限制性片段长度多态性标记。特定生物类型的基因组D

16、N恪某一种限制性内切酶完全酶解后，会产生分子量不同的同源等位片段，或称限制性等位片段，通过电泳的方法分离和检测这些片段。凡是可以引起酶解位点变异的突变，如点突变（新产生和去除酶切位点）和一段DNAtJ重新组织（如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化）等均可导致限制性等位片段的变化，从而产生RFLP直物细胞培养的应用有哪些?可从（1）筛选突变体；（2）生产次生代谢产物；（3）其他应用（克服远缘杂种的不育性，用于植物代谢生理学、生物化学等的研究）等方面展开阐述。在培养至中发培养室中发现部分培养材料被污染，可能的原因主要如下：（需被污染，试分析要展开讨论，根据情况加分或扣分)(1)植物材料本身内生

17、菌的生长;(2)培养基火菌不彻底；(3)培养基火菌后，微生物从器皿的圭寸口处进入；(4)培养材料表面消毒不彻底；(5)无菌接种操作不规范；(6)接种室或超净工作台空气不洁净；(7)培养室空气不洁净或湿度较可从外植体、培养基、无菌操作、培夏季，在培养室中养环境等方面进行阐述。(要详细展发现大量培养物进开)菌，试分析可能的因导(1)对导入抗病基因的目的植物进入了改良的目的植行DNA/K平分析(PC减杂交分析)（3分）（如水稻或玉（2）对导入抗病基因的目的植物米），如何分析基进行RNA水平分析因的功能?(RT-PCR3分)（3）对导入抗病基因的目的植物进行蛋白质水平分析（杂交分析）（3小（4）对导入抗病基因的目的植物进行抗病性鉴定。（6分）每一点要做适当展开论述。种质离体保存的意可从（1）种质离体保存概念;（2）种质