龙马微丸的体外溶出度研究毕业论文

1、湘潭大学毕业论文题 目：龙马微丸的体外溶出度研究 学 院： 化学学院 专 业： 药 学 学 号： 2010601017 姓 名： 徐 玉 灵 指导教师： 吴萍 讲师 完成日期： 2014年 5 月 29日 湘 潭 大 学 毕业论文（设计）任务书论文（设计）题目： 龙马微丸的体外溶出度研究 学号： 2010601017 姓名： 徐玉灵 专业： 药 学 指导教师： 吴萍 系主任： 彭圣明 一、主要内容及基本要求 1掌握微丸制剂相关知识，查阅文献同时结合课堂所学了解微丸制剂，重点掌握微丸的研制过程以及体外溶出度。 2通过查阅文献了解龙马自来丹的相关应用知识，包括化学成分、物理化学性质、药理作用、毒理

2、作用、临床应用等，在理解文献资料的基础上根据自身专业知识设计实验方案，并能在做实验的过程中发现问题并及时的通过各种渠道解决问题。重点掌握马钱子的性质，特别是马钱子碱的检测方法，以及高效液相色谱仪器的使用方法。 3实验过程中需要掌握实验的基本操作方法，提高动手能力，提高处理突发事件的能力，增强实验中的安全意识。结果分析过程中要求掌握分析仪器的使用方法，并能对数据进行全面的分析，得出正确的结论。 4掌握科技论文的写作方法，撰写合格的毕业论文。 二、重点研究的问题 1确定检测物质，优化高效液相色谱仪器条件，以及样品去蛋白处理的方法。 2 参照2010年版中国药典及相关文献确定马钱子碱含量测定方法。

3、3确定龙马微丸的溶出规律，计算龙马微丸的累积溶出量，做原药材对比实验，考察成丸后的龙马微丸的溶出特性变化，用不同溶出介质做溶出实验，考察不同溶出环境对龙马微丸溶出度的影响。 三、进度安排序号各阶段完成的内容 完成时间1查阅资料、调研2014-2-13 至 2014-2-202开题报告、制订设计方案2014-2-21 至 2014-3-113实验研究2014-3-12 至 2014-5-34完成初稿2014-5-4 至 2014-5-155修改，写出第二稿2014-5-16 至 2014-5-206完成正式稿2014-5-25至2014-5-287答辩2014-5-28四、应收集的资料及主要参考

4、文献1.李明辉，李凤琴，王广林三波长分光光度法测定壮筋骨胶囊中的士的宁的含量J时珍国药研究，1995，6(3)；17. 2.罗晋萍，张中苏，连云岚，等薄层扫描法测定金龙祛痹丸中士的宁的含量口药物分析杂志，1999，19(3)：179180 3.王琳，薛玉梅薄层扫描法测定晕复静片中士的宁含量J基层中药杂志，1999，13(2)：94.陈勇，黄敏，陆中海，等十一药酒的质量控制研究J广西中医药，2002，24，25(2)：5759. 5.姬生国，王东，李娥，等三鼎丹胶囊中士的宁的含量测定J时珍国医国药，2006，17(1)j 6465 6.张铮HPLC法测定晕复静片中士的宁和马钱子碱的含量J安徽医药

5、，2003，7(3)：2142167.杨安东，马艳，吴诗慧，等骨痛宁搽剂的质量标准研究J中成药，2005，27(12)：140014048.张凌云，张翔，冯慧凭RPHPLC法测定伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱的含量J江苏药学与临床研究，2004，lZ(3)：3234 9.王冬月，陈军，蔡宝昌.马钱子碱血药浓度测定方法的优化与应用J.中国中药杂志，2013，7:10751078 10.国家药典委员会编.中华人民共和国药典2010版二部M.2012年10月1日。正文第21页。 11.李彦超，蔡宝昌，李伟东，狄留庆.马钱子总生物碱的测定及其提取条件的正交设计优选J.中药新药与临床药理,2004(1)1

6、5. 12.汤淮波，张令君,李湘玲,孙成风，马丕江.不同溶剂提取马钱子中士的宁与马钱子碱的实验研究J.中医药导报,2009，15(11)122125. 13.付丽佳，王玉华。当归补血丸中阿魏酸溶出度测定J。中国实验方剂学杂志.2013,15(3)188191.14. 姚彤炜编著。体内药物分析M。浙江大学出版社。2001年01月第1版,第49页 湘 潭 大 学毕业论文（设计）评阅表学号 2010601017 姓名 徐 玉 灵 专业 药 学 评价项目评 价 内 容选题1.是否符合培养目标，体现学科、专业特点和教学计划的基本要求，达到综合训练的目的；2.难度、份量是否适当；3.是否与生产、科研、社会

7、等实际相结合。能力1.是否有查阅文献、综合归纳资料的能力；2.是否有综合运用知识的能力；3.是否具备研究方案的设计能力、研究方法和手段的运用能力；4.是否具备一定的外文与计算机应用能力；5.工科是否有经济分析能力。论文（设计）质量1.立论是否正确，论述是否充分，结构是否严谨合理；实验是否正确，设计、计算、分析处理是否科学；技术用语是否准确，符号是否统一，图表图纸是否完备、整洁、正确，引文是否规范；2.文字是否通顺，有无观点提炼，综合概括能力如何；3.有无理论价值或实际应用价值，有无创新之处。综合评 价该生的选题符合专业培养目的，能够达到综合训练的目标，选题工作量难度适中。该生查阅文献资料能力较

8、强，有综合运用学科知识的能力，有一定的英文水平。毕业论文篇幅符合学校规定，内容完整，层次结构安排较为科学，文字工整，图表规范。评阅人： 年 月 日毕业论文（设计）题目： 龙马微丸的体外溶出度 湘 潭 大 学毕业论文（设计）鉴定意见学 号： 2010601017 学生姓名： 徐 玉 灵 专 业： 药 学 毕业论文（设计说明书） 19 页 图 表 16 张 毕业（设计）题目： 龙马微丸的体外溶出度研究 内容提要：龙马微丸的处方来源于医林改错卷下。书中记载的功能主治为痫症。药物组成：马钱子8两，地龙8条（去土，焙干为末)，香油1斤。 微丸(pellets)是指直径小于2.5mm的各类丸剂。具有流动性

9、好，生物利用度高，易于制备缓释、控释制剂等优点。中药微丸包衣后可掩盖不良气味，减少某些药物的刺激性，增加药物稳定性，特别是改善中药浸膏易吸潮的特性还可通过包衣制成缓控释剂型，服用方便，且能降低药物的毒副作用。 本课题组用龙马自来丹处方药物自制成龙马微丸制剂，本实验以马钱子碱为指标物质考察龙马微丸的溶出规律及释药特性，比较原药粉末制成龙马微丸后，其释药性质的变化，考察不同溶出介质条件对龙马微丸溶出度的影响。 实验结果：采用HPLC测样，条件为：流动相选用甲醇水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75）选取马钱子碱为指标物质。该溶出度测定分析方法简便易行，准确可靠，可以用于龙马微丸的质量质量控制

10、。通过其体外溶出度的研究发现：本课题组所制备的龙马微丸溶出迅速，酸性条件有利于龙马微丸溶出。利于龙马微丸中马钱子碱的溶出。指导教师评语论文选题符合专业培养目的，能够达到综合训练目标，题目有较高难度，工作量大。选题具有学术研究价值。该同学学习态度端正，查阅文献能力较强，能够综合运用自己所学知识去解决实际中遇到的问题，文章篇幅符合要求，内容较为完整，层次结构安排科学，主要观点突出，逻辑关系清楚，达到了本科毕业论文的要求。同意参加答辩，建议成绩评定为 指导教师姓名（职称）： 年 月 日答辩简要情况及评语答辩时论述思路清晰，表达清楚；能正确回答问题。根据答辩情况，答辩小组同意其成绩评定为 答辩小组组长

11、： 年 月 日答辩委员会意见 经答辩委员会讨论，同意该毕业论文成绩评定为 答辩委员会主任： 年 月 日目录摘要.2一、引言31.龙马自来丹简介32.马钱子成分测定的研究进展32.1分光光度法32.2薄层扫描法42.3色谱法52.4其他方法53.本文的主要研究内容及意义6二、实验72.1实验材料72.1.1实验仪器72.1.2实验主要试剂72.2分析方法的建立72.2.1色谱条件优化72.2.2 指标物质选择82.2.3标准曲线的绘制92.2.4去蛋白方法102.1.5地龙粉阴性对照试验112.1.6精密度及溶液稳定性试验112.2自制龙马微丸的含量测定122.2.1提取方法122.2.2含量计

12、算122.3龙马微丸溶出实验132.4中药原材料对照实验142.5不同溶出介质的影响15三、结论163.1关于分析方法的结论163.2自制龙马微丸溶出规律及特性的结论16四、 讨论164.1关于分析方法的讨论164.2自制龙马微丸溶出规律及特性的讨论17参考文献18致谢19龙马微丸的体外溶出度研究中文摘要目的：考察龙马微丸的体外溶出度，并对其释药特性进行探讨。方法：采用高效液相色谱测定龙马微丸的溶出样品，确定去蛋白处理后样品的液相条件。在不同溶出介质条件下考察不同环境对龙马微丸溶出度的影响，并对比马钱子粉及马钱子与地龙的混合粉溶出规律,考察成丸后的龙马微丸的溶出规律。结果：液相条件：流动相为甲

13、醇水（含1%甲酸+0.3%三乙胺）（25:75），选马钱子碱为检测物质；自制龙马微丸溶出迅速，酸性介质有利于龙马微丸马钱子碱的溶出。结论：该溶出度测定分析方法简便易行，准确可靠，可以用于龙马微丸的质量控制。关键字：龙马微丸，高效液相，溶出度In vitro dissolution rate of the Homemade Longma PelletsAbstractObjective:To investigate the vitro dissolution rate of Longma pellets ;And explore its release characteristics.Metho

14、ds: HPMC was used as the matrix material ？to determinate the dissolution of the sample Longma pellets;to determine the liquid condition of the sample that protein has been processed. to investigate the influence of the vitro dissolution rate of Longma pellets under different conditions:Results:HPLC

15、Conditions：the suitable mobile phase is methanol-water (Containing1%triethylamine and 0.3%formic acid); the Homemade Longma Pellets have the rapid dissolution rate,and acidic environment helps the dissolution of the Homemade Longma Pellets.Conclusion:The established dissolution method was accuracy，s

16、ensitive and simpleIt can be used for quality control of the Homemade Longma Pellets.Key words:Longma pellets,HPLC,Dissolution请仔细核对英文摘要一、引言1.龙马自来丹简介龙马自来丹的处方来源于医林改错卷下。书中记载的功能主治为痫症。药物组成：马钱子8两，地龙8条（去土，焙干为末)，香油1斤。将香油入锅内熬滚，入马钱子炸之，待马钱子微有响爆之声，拿1个用刀切两半，看其内以紫红色为度，研为细末；再入前地龙末和匀，面糊为丸，如绿豆大。用法用量：每服3-4分，临卧以盐水送下。如

17、不为丸，面子亦可服。该药对痫症的治愈率极高，一直沿用至今。随着现代药理学研究的发展，研究人员逐渐发现龙马自来丹可以运用到其他的疾病上，与此同时，通过适当地修改配方、改变剂型使得龙马自来丹的应用又有了新的进展。2. 马钱子成分测定的研究进展马钱子为马钱子科植物马钱Strychnos nuxvomica L. 或云南马钱Strychnos pierrana A. W. Hill 的干燥成熟种子，是常用中药。具有通络止痛、散结消肿之功效。士的宁、马钱子碱是马钱子及其制剂的有效成分，通常作为马钱子及以马钱子为主要处方成分的复方制剂分析的指标物质，我国医药研究者在马钱子及其制剂中化学成分的测定做了很多工

18、作，使马钱子及其制剂的分析技术更加精确成熟。查阅文献资料，现将几年来马钱子成分测定的研究进展做简要总结如下。2.1分光光度法2.1.1紫外分光光度法利用士的宁、马钱子碱分别在255、264nm处有最大吸收而测定其含量。黄驰等采用薄层色谱法在硅胶GF254板上分离得到的士的宁，再用紫外分光光度法测定，计算其中的含量。2.1.2 双波长法特点是用一个吸收池和两束不同波长的光进行测定。通常干扰组分吸收光谱在这两个波长处具等同吸收，可消除共存组分的干扰。有研究者将晕复静片经适当溶媒提取后，分别测定在262nm，300nm处的吸光度，计算士的宁含量。还有报道用此法测定风湿马钱片中士的宁的含量和金钱白花蛇

19、药酒中士的宁的含量。2.1.3 三波长法根据选定干扰组分吸收光谱上为一条直线的3个不同波长，利用比例关系消除干扰组分对测定的影响。李明辉等配置适当浓度的士的宁及马钱子碱的标准溶液及不含马钱子的空白壮筋骨胶囊样品提取液，并将上述3种溶液于210320nm波长扫描，计算马钱子碱及阴性样品在3个波长处吸光度成一条直线，224nm，264nm，267nm为测定壮筋骨胶囊中士的宁含量的精选测定波长测定士的宁的含量。2.1.4 正交函数分光光度法以士的宁及马钱子碱在240290nm 波长区间内呈二次吸收曲线，故采用二次正交多项式为特征多项式，以264nm，269nm，284nm 和298nm 的几个测试点

20、，按P=5A1一A24A3 4A4一A5+5A6计算各式中间波长P值，通过P值转换曲线，选择276.5nm为测定士的宁的中间波长测定壮筋骨胶囊，回收率993。2.2薄层扫描法2.2.1单波长反射法锯齿扫描罗晋萍等以甲苯一丙酮一乙醇一浓氨液(30：20：3：1)为展开剂，测定波长为254nm，对金龙祛痹丸中士的宁的含量进行测定。点样量在0.543.21腭范围内线性关系良好。报道用硅胶GF254薄层板，环已烷一氯仿一甲醇(75：4：1)为展开剂，在256nm波长测定骨刺胶囊中士的宁含量，结果点样量在110550g范围内与积分值呈线性关系，平均回收率为10016 。2.2.2双波长薄层扫描法王琳等用

21、双波长反射法锯齿形扫描测定晕复静片中士的宁含量。用硅胶GF254，展开剂为甲苯一丙酮一乙醇一浓氨(8:6:0.5:0.5)=245nm，=300 nm，Sx=30；点样量在0.5363.216g范围内呈良好的线性关系。陈晓斌等用双波长薄层扫描法测定风湿痹痛丸士的宁、马钱子碱、乌头碱的含量。测定波长503nm，参比波长550 nm，结果面积积分平均值为4751917，标准差为76237，平均回收率士的宁999。陈勇等在十一方药酒的质量控制研究中测定马钱子碱和士的宁的含量，结果=500nm，=650nm，Sx=3士的宁含量在1.0635.315g之间，点样量与峰面积呈良好线性关系。姬生国等以甲苯：

22、丙酮：乙醇：浓氨溶液(16：12：1：4)的上层溶液为展开剂，在=254nm，325nm，测定三鼎丹胶囊中士的宁的含量，结果在1.0265.130g之间，线性关系良好，样品平均回收率为995。2.3色谱法2.3.1薄层扫描法( TLCS)在各类色谱分析中TLCS 使用频率最高，普遍采用的是双波长反射法锯齿形扫描。该方法使用薄层厚度不同而引起的基线噪音得到补偿，又可克服斑点不规则而引起的误差。定量方法分外标法和内标法。对其马钱子的中成药制剂( 马钱子散、滋阴补肾丸、养血祛风丸、伤科七味片、益髓冲剂) 用甲苯-丙酮-乙醇-氨水系统在硅胶G板展开，紫外灯( 254nm) 定位，双波长锯齿反射扫描对马

23、钱子碱和士的宁进行分离和含量测定，可有效控制药品质量，且结果准确。士的宁、马钱子碱是风湿痹痛丸中的有效成分，也是其毒性成分，用硅胶G板，正丁醇-苯-乙酸乙酯-甲醇-氨水( 20.3:14.5:23:1.5:30) 展开 0. 05 mol/L 硫酸-碘化铋钾试液显色，锯齿反射扫描外标两点法定量测定其制剂中马钱子碱、士的宁含量，回收率分别为99. 0%，99. 9%。九分散中麻黄、马钱子、乳香和没药组成，经氯仿-甲醇-氨水展开，双波长锯齿反射扫描测定士的宁、马钱子碱和麻黄碱。对中药马钱子提取液用高效硅胶GF薄层板，反射直线扫描，以260nm 为测定波长355nm 为参比波长 在线形范围1.05.

24、0pg/ml 内测其含量。2.3.2 高效液相色谱法(HPLC)HPLC以经典液相色谱法为基础：引入气相色谱理论及实验方法，流动相采用高压输送，采用高效固定相及在线检测手段而发展起的分离分析方法。因其不受物质沸点，热稳定性，有机物或无机物的限制，具有适用范围广分离效率高，分析速度快，灵敏度高等特点。所以，近年来，该法已广泛用于中草药及其制剂化学成分分离，鉴定及含量测定。王冬月等以001 mol/L 庚烷磺酸钠与002 mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(10 的磷酸调节pH28)，乙腈(76：24)为流动相264为检测波长，正相HPLC法测血液中马钱子碱的浓度，用此法避免了采用反相HPLC 法测

25、定士的宁和马钱子碱含量时色谱峰拖尾严重，分析分离时间长的缺点， 其结果与1995 版中国药典其含量测定比较，结果准确，精密度高。杨安东等在骨痛宁搽剂的质量标准研究中采用高效液相色谱法对方中淫羊藿中淫羊藿昔、马钱子中士的宁进行含量测定。结果：士的宁在0448 g范围内线性关系良好。张凌云等用RPHPLC法测定伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱的含量，采用Hypersil C18色谱柱(46ram200mm，10m)，水一乙腈(80：20)(含三乙胺001molL，磷酸调pH值至2601)为流动相，检测波长260 nm。结果士的宁在1O90gml的范围内浓度与峰面积呈良好的相关性。2.4 其他方法41

26、毛细管区带电泳法姜尧舜等应用本法对伸筋丹胶囊中士的宁和马钱子碱成分进行了分离研究。采用pH=6.0,0.2molL磷酸溶液作为缓冲液；运行电压20kV；检测波长为260nm，被测成分可得到较好分离。用内标法测定其含量，在0.020.15mgml范围内，士的宁和马钱子碱均与内标峰面积之比呈良好线性关系，平均回收率分别为95.1和96.4。42 流动注射化学发光分析法朱龙等利用马钱子碱、士的宁和麻黄类生物碱在KMnO4-H+-还原体系中的化学发光(CL) 行为而更建立起来的分析方法，并将此与HPLC 联用实现上述物质的选择性测定，目前，此法已用于一些药物中马钱子碱等生物碱的测定。43 硅胶柱准离子

27、交换色谱法此法对马钱子及其炮制品马钱子中士的宁含量测定，并与中国药典收载的计算分光光度法进统计对比。本法简便、准确、重现性好，不受其它成分干扰；经配对比较t检验法进行统计，测定结果与分光光度法差异有极显著性(P100%，可能是HPLC的测量误差，也有可能是龙马微丸含量测定没有将龙马微丸中马钱子碱最大量提取出来。从实验结果看制马钱子粉及地龙粉制备成龙马微丸之后，药物释放特性有所改变，对龙马微丸进行包衣或可进一步延长药物释放达到缓控释作用，有待进一步研究。参考文献1. 李明辉，李凤琴，王广林三波长分光光度法测定壮筋骨胶囊中的士的宁的含量J时珍国药研究，1995，6(3)；17.2. 罗晋萍，张中苏，连云岚，等薄层扫描法测定金龙祛痹丸中士的宁的含量口药物分析杂志，1999，19(3)：1791803. 王琳，薛玉梅薄层扫描法测定晕复静片中士的宁含量J基层中药杂志，1999，13(2)：94. 陈勇，黄敏，陆中海，等十一药酒的质量控制研究J广西中医药，2002，24，25(2)：5759.5. 姬生国，王东，李娥，等三鼎丹胶囊中士的宁的含量测定J时珍国医国药，2006，17(1)j 64656. 汪电雷，朱继民.马钱子及其制剂中化学成分的测定方法综述J.基层中药杂志，2001,15（2）43-46