丹参酮对血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍的改善作用

1、丹参酮对血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍的改善作用         11-03-25 14:58:00     作者：李林，陈姿亦,茹立强    编辑：studa20【摘要】  目的： 研究丹参酮对拟人类血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆功能障碍的改善作用。方法： 采用改良的大脑中动脉栓塞(MCAO)致局灶性脑缺血(3 h)和再灌注(30min)法，建立VD样学习记忆障碍的大鼠模型。实验动物随机分成VD模型组、丹参酮治疗组、假造

2、模对照组和正常对照组等4组。采用定位航行和空间探索试验测定大鼠的空间学习记忆功能。结果： (1) VD大鼠定位航行试验的逃避潜伏期明显延长;空间探索试验的逃避潜伏期延长更明显,而逃避频率降低，与两对照组比较有显著性差异(P<0.01)。(2) 丹参酮治疗后，VD大鼠定位航行试验的逃避潜伏期缩短;空间探索试验的逃避潜伏期缩短更明显，而其安全逃避频率有明显提高。结论： (1) 本研究制成的VD样学习记忆障碍的动物模型具有较好仿真人类VD的特点;水迷宫试验能较真实地反映动物学习记忆功能。(2) 丹参酮对VD样大鼠的学习记忆功能障碍具有一定的改善作用。 【关键词】  丹参酮; 血管性痴

3、呆; 动物模型; 大脑中动脉栓塞; 水迷宫试验; 学习记忆; 大鼠血管性痴呆(vascular dementia, VD)是由各种脑血管疾病引起的脑功能障碍，是一种获得性智能损害综合征1，为老年期痴呆的主要类型之一，其主要临床表现以记忆、认知功能缺损为主，可伴有言语、运动、视空间和人格障碍。VD是唯一的一种可以预防的痴呆类型，早期积极防治具有可逆性。在导致VD的多种脑血管疾病中，以缺血性脑血管疾病为最多见。脑缺血再灌注后直接或间接损伤海马等边缘脑区神经细胞，机体会启动多种机制调控学习、记忆的功能活动。有报道，丹参酮A和B能缩小小鼠短暂的(急性)局灶性脑缺血的脑梗死灶体积，并可能有神经保护作用2

4、，还能改善缺血再灌注损伤小鼠和东莨菪碱(抗胆碱药)诱发的空间行为缺陷小鼠的学习记忆障碍3。因此，对VD的脑损伤机制及其防治已成为世界医学领域联合攻关、重点研究的项目。本研究采用改良的大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)45致局灶性脑缺血再灌注法诱发VD大鼠模型，同时观察丹参酮对其的治疗作用，为探索人类VD的发病机制及其防治新措施提供实验依据。1 材料和方法1.1 实验动物与分组选用健康清洁二级SD雄性大鼠60只，体重(220±20)g，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供。动物于专用实验室内分笼饲养，室温(22±2

5、)，自由摄食和饮水。将大鼠随机分为4组：VD模型组20只，丹参酮治疗组20只，假造模对照组10只和正常对照组10只。1.2 主要试剂及仪器丹参酮，华中科技大学同济医学院临床药理学教研室惠赠;仿Morris水迷宫装置，华中科技大学同济医学院神经生物学系研制。1.3 造模方法根据Zealonga等45的MCAO法，稍加改进制作VD大鼠模型。大鼠造模前禁食(不禁水)12 h，以10%水合氯醛(0.35 g·kg-1)腹腔注射麻醉，常规皮肤消毒后解剖分离右侧颈总动脉、颈内动脉及颈外动脉，并挂上备用结扎线，电凝颈外动脉入脑分支和结扎其主干，分离颈内动脉主干至翼腭动脉，并在其起始部位放置一动脉夹

6、。先将颈总动脉用动脉夹夹闭，再在颈外动脉残端开0.2 mm切口，由切口处插入圆锥头的尼龙线(直径0.25 mm)，于入口处结扎尼龙线，然后松开颈内动脉的动脉夹，轻推尼龙线沿颈内动脉入颅(深度约为18 mm)，如此实现MCAO致脑局灶性缺血。随后于脑缺血后3 h轻拉出外留尼龙线尾至结扎口处，如此实现大脑中动脉缺血再灌注(供血30min)造模。大鼠放回鼠笼中，保温饲养。假造模对照组大鼠仅解剖分离上述动脉，不再作插线栓、结扎等处理。正常对照组大鼠不作任何处理。1.4 丹参酮治疗造模后丹参酮治疗组大鼠立即胃饲丹参酮，丹参酮按50 mg·kg-1·d-1溶于5 ml玉米油中灌胃6。两对照组及VD模型组仅以等量玉米油灌胃。各连续14d，然后进行有关指标的检测。1.5 造模动物神经功能评定按照Zealonga等45级评分法，在造模大鼠清醒后立即进行动物神经功能的评定。评分标准为：正常0分，对侧肢体屈曲1分，拖鼠尾后拉时对侧肢体无力2分，拖鼠尾后拉时向对侧转圈3分，自发向对侧转圈或倾倒4分。选取评分为2分及以上者入围实验。1.6 动物学习记忆功能的测试对每组实验大鼠分别进行水迷宫学习记忆行为学测试78，选择学习记忆行为“正常”的大鼠入围实验;大鼠MCAO再灌注后立即做水迷宫试验鉴定动物模型。1.7 统计学处理所有的数据以x±s