血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验

1、编辑ppt总课时：总课时：6 64 4528528QQ:QQ:836900873836900873编辑ppt2血浆蛋白质与含氮化合物血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验的生物化学检验临床检验教研室临床检验教研室龚晓华龚晓华编辑ppt3n本章内容概要：本章内容概要：第二节第二节 氨基酸代谢紊乱的生物化学检验氨基酸代谢紊乱的生物化学检验第一节第一节 血浆蛋白质的生物化学检验血浆蛋白质的生物化学检验第三节第三节 嘌呤核苷酸代谢紊乱的生物化学检验嘌呤核苷酸代谢紊乱的生物化学检验编辑ppt41 1、掌握掌握急性时相反应蛋白的概念及临床意义；重要血浆急性时相反应蛋白的概念及临床意义；重要血浆蛋白质的测定方

2、法、参考值和临床意义；嘌呤核苷酸代谢蛋白质的测定方法、参考值和临床意义；嘌呤核苷酸代谢紊乱紊乱高尿酸血症及痛风高尿酸血症及痛风2 2、熟悉熟悉血清蛋白电泳图谱与异常带型、血浆蛋白质的理化血清蛋白电泳图谱与异常带型、血浆蛋白质的理化性质和功能性质和功能 3 3、了解了解氨基酸代谢紊乱、血清特定蛋白质的检测方法氨基酸代谢紊乱、血清特定蛋白质的检测方法n本章教学要求：本章教学要求：编辑ppt5第一节第一节 血浆蛋白质的生物化学检验血浆蛋白质的生物化学检验p机体蛋白质机体蛋白质：p体液蛋白质的检测：体液蛋白质的检测： 机体主要的机体主要的 生物大分子生物大分子含量：人体固体成分的含量：人体固体成分的4

3、5%种类：种类：10万，万，30005000种种/单细胞单细胞功能：生长，代谢、血凝、运动、免功能：生长，代谢、血凝、运动、免疫、信息传递等疫、信息传递等疾病发生疾病发生体液蛋白质体液蛋白质异常异常编辑ppt6要判断异常要判断异常首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能，分类及特点首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功能，分类及特点一、血浆蛋白质的组成、功能及分类一、血浆蛋白质的组成、功能及分类n组成组成：种类：种类：1000种种 已研究已研究500种种 已分已分离离200种种含量：含量：g mg g来源：来源：肝脏肝脏是蛋白质主要的加工厂是蛋白质主要的加工厂编辑ppt7n功能：功能：解解编辑ppt8

4、n分类分类：依据依据来源来源、分离方法分离方法和和生理功能生理功能来源来源肝生成：肝生成：绝大多数血浆蛋白质绝大多数血浆蛋白质其他组织细胞生成：其他组织细胞生成：免疫球蛋白免疫球蛋白和和蛋白类激素蛋白类激素编辑ppt9分离方法分离方法盐析法：白蛋白盐析法：白蛋白/球蛋白球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液）半饱和的硫酸铵溶液）电泳法：电泳法：醋酸纤维素薄膜电泳：醋酸纤维素薄膜电泳：6种种琼脂糖凝胶电泳：琼脂糖凝胶电泳：1313种种聚丙烯酰胺凝胶电泳：聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种种SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种种分分辨辨率率增增高高- -+醋酸纤维素薄膜醋酸

5、纤维素薄膜编辑ppt10功能分类功能分类:编辑ppt11二、重要的血浆蛋白质和血清蛋白质电泳二、重要的血浆蛋白质和血清蛋白质电泳正常血清蛋白电泳图谱示意图及其扫描曲线正常血清蛋白电泳图谱示意图及其扫描曲线 编辑ppt12血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系血浆蛋白质的性质功能及其与电泳区带的关系编辑ppt13异常血清蛋白质电泳图谱的分型及其特征异常血清蛋白质电泳图谱的分型及其特征编辑ppt14 A 正常人正常人 B肾病综合征肾病综合征 C 肝硬化肝硬化(-桥桥) )D 肝硬化肝硬化(不典型不典型-桥桥) ) E 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤IgA型型 F 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤IgG型型典型

6、异常血清蛋白电泳图谱典型异常血清蛋白电泳图谱编辑ppt15正常血清蛋白电泳上显示的宽正常血清蛋白电泳上显示的宽区带主要区带主要成分成分: :免疫球蛋白免疫球蛋白(Ig)(Ig)。浆细胞病（浆细胞病（plasma cell dyscrasiaplasma cell dyscrasia）：异）：异常浆细胞增殖，产生大量单克隆常浆细胞增殖，产生大量单克隆IgIg或其轻或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的结构单一的M M蛋白（蛋白（monoclonal proteinmonoclonal protein）在蛋白电泳时呈现一个色泽深染的窄区带，在蛋白电

7、泳时呈现一个色泽深染的窄区带，此区带较多出现在此区带较多出现在或或区，偶见于区，偶见于区。区。浆细胞病与浆细胞病与M蛋白蛋白 编辑ppt16三、急性时相反应蛋白三、急性时相反应蛋白 急性的全身或系统性炎症包括感染、组织损伤急性的全身或系统性炎症包括感染、组织损伤（如创伤、手术、心肌梗死、恶性肿瘤等）、炎（如创伤、手术、心肌梗死、恶性肿瘤等）、炎症性疾病（如自身免疫性炎症）等情况下，肝脏症性疾病（如自身免疫性炎症）等情况下，肝脏对多种血浆蛋白质合成量发生变化，可有明显的对多种血浆蛋白质合成量发生变化，可有明显的升高或降低，这些变化的血浆蛋白质统称为升高或降低，这些变化的血浆蛋白质统称为急性急性时

8、相反应蛋白（时相反应蛋白（APRsAPRs），增加的蛋白质称为正向，增加的蛋白质称为正向APRsAPRs，下降的蛋白质称为负向，下降的蛋白质称为负向APRsAPRs。编辑ppt17正向正向APRs CRP PCT SAA AAG AAT Hp C4 Fg(FIB) C3 Cp PAAlbTRF负向负向APRs编辑ppt18n急性时相反应机制：急性时相反应机制： 当机体受到损伤或炎症时释放小分子蛋白质导当机体受到损伤或炎症时释放小分子蛋白质导致肝细胞中上述蛋白质的合成增加或减少。致肝细胞中上述蛋白质的合成增加或减少。n急性时相反应的应用：急性时相反应的应用： 急性时相反应时急性时相反应时, ,血

9、浆蛋白质的变化和创伤的时血浆蛋白质的变化和创伤的时间进程有关，可用于鉴别急性、亚急性和慢性病理间进程有关，可用于鉴别急性、亚急性和慢性病理状态。状态。编辑ppt19四、血浆中几种主要蛋白质四、血浆中几种主要蛋白质（一）血清总蛋白（一）血清总蛋白（TPTP） 血清总蛋白是血浆中所有蛋白质含量的总体反映，与血清总蛋白是血浆中所有蛋白质含量的总体反映，与肝脏合成蛋白质功能及免疫球蛋白合成情况有关，尤其肝脏合成蛋白质功能及免疫球蛋白合成情况有关，尤其是结合血清白蛋白浓度，能大概反映免疫球蛋白的含量。是结合血清白蛋白浓度，能大概反映免疫球蛋白的含量。参考值参考值成人：成人： 6585g L 编辑ppt2

10、01.1.凯氏定氮法参考方法凯氏定氮法参考方法2.2.双缩脲法双缩脲法( ( 最好最好) ) 3.3.酚试剂法酚试剂法4.4.散射比浊法散射比浊法5.5.染料结合法染料结合法6. UV 6. UV 法法n测定方法测定方法编辑ppt211.凯氏定氮法参考标准方法凯氏定氮法参考标准方法(0.05mg N 0.3g pro)消化消化用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵；（耗时）用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵；（耗时） 蒸馏蒸馏用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发；用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发； 吸收吸收用酸性溶液（硼酸）吸收气态氨（使用酸性溶液（硼酸）吸收气态氨（使HH+ + ）滴定滴定用已标定的无机酸滴用已标定

11、的无机酸滴（使（使H+ 恢复），恢复），计算总氮量计算总氮量定蛋白定蛋白（总氮量总氮量- -非蛋白氮）非蛋白氮）6.25=6.25=蛋白含量蛋白含量纳氏试剂：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物，其色度与氨氮含纳氏试剂：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物，其色度与氨氮含 量成正比。量成正比。 n原理：原理：编辑ppt22n评价：评价：优点：准确度高，精密度优点：准确度高，精密度高，灵敏度高，是公认的参高，灵敏度高，是公认的参考方法。考方法。缺点：操作复杂，费时，缺点：操作复杂，费时，不适合常规检测，血清各蛋不适合常规检测，血清各蛋白含氮量会有所变化尤其是白

12、含氮量会有所变化尤其是疾病时。疾病时。 n应用：应用：标准蛋白的标定标准蛋白的标定及校正其它常规方法及校正其它常规方法编辑ppt232.双缩脲法双缩脲法n原理：原理： 蛋白质中的肽键蛋白质中的肽键（-CONH-CONH-）在在碱性碱性溶液中能与溶液中能与Cu2+作用而产生作用而产生紫红色络合物紫红色络合物，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关。其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量及氨基酸成分无关。条件：至少含两个肽键（条件：至少含两个肽键（-CONH-CONH-）基团才能和）基团才能和CuCu2+2+形成络合物形成络合物, ,氨基酸及二肽无反氨基

13、酸及二肽无反 应应, ,三肽以上才能反应。三肽以上才能反应。 双缩脲生成 加热加热NH322H180022222N 端端C 端端编辑ppt24n评价：评价：优点：简便，准确，重复性好，优点：简便，准确，重复性好，10g-120g/L10g-120g/L线性好，线性好，特异性与精密度好，批内特异性与精密度好，批内CV%CV%2%2%，显色稳定。，显色稳定。缺点：灵敏度较差，对蛋白质含量低的体液标本不适缺点：灵敏度较差，对蛋白质含量低的体液标本不适合。合。 n应用：应用：常规推荐方法。手工或上机使用。常规推荐方法。手工或上机使用。编辑ppt253.3.酚试剂法酚试剂法n原理：原理： 蛋白质分子中的

14、蛋白质分子中的酪氨酸残基酪氨酸残基和和色氨酸残基色氨酸残基能够能够和和酚试剂酚试剂中的中的磷钨酸磷钨酸- -磷钼酸磷钼酸反应生成蓝色化合物，反应生成蓝色化合物， LowryLowry改良法：改良法：在酚试剂中加入在酚试剂中加入CuCu2+2+（75%75%呈色），呈色），提高了呈色的灵敏度，为提高了呈色的灵敏度，为双缩脲法的双缩脲法的100100倍左右。倍左右。编辑ppt26n评价及应用：评价及应用：优点：操作简单，改良法灵敏度高（优点：操作简单，改良法灵敏度高（10g-10g-6060g），适合测定蛋白含量少的标本。，适合测定蛋白含量少的标本。缺点：各种蛋白质缺点：各种蛋白质酪氨酸酪氨酸和和

15、色氨酸色氨酸比例不同，只比例不同，只适合测定单一蛋白质。受一些药物干扰。适合测定单一蛋白质。受一些药物干扰。 编辑ppt274.4.比浊法比浊法n原理：原理： n评价及应用：评价及应用：优点：简便不需特殊仪器。优点：简便不需特殊仪器。缺点：浊度形成的干扰因素多（加试剂方法，反应缺点：浊度形成的干扰因素多（加试剂方法，反应温度，蛋白絮状沉淀等）温度，蛋白絮状沉淀等） 某些酸类（磺基水杨酸等）和血清蛋白质结合某些酸类（磺基水杨酸等）和血清蛋白质结合产生沉淀，测其浊度，与标准对比，可求蛋白含量。产生沉淀，测其浊度，与标准对比，可求蛋白含量。编辑ppt285.5.染料结合法染料结合法 在酸性环境下，带

16、正电的蛋白质（在酸性环境下，带正电的蛋白质（-NH3+)与染料的阴离子与染料的阴离子产生颜色反应，使染料的吸收峰改变，可既而用分光光度法产生颜色反应，使染料的吸收峰改变，可既而用分光光度法比色测定。比色测定。n原理：原理：常用染料：常用染料：氨基黑，考马斯亮蓝等氨基黑，考马斯亮蓝等n评价及应用：评价及应用：优点：操作简便，重复性好，灵敏度高，且干扰因素少。优点：操作简便，重复性好，灵敏度高，且干扰因素少。缺点：特异性不高；不同蛋白质和染料的结合力不一致，缺点：特异性不高；不同蛋白质和染料的结合力不一致，标准物不易确定。标准物不易确定。 编辑ppt296.6.紫外分光光度法紫外分光光度法 蛋白质

17、分子中的蛋白质分子中的酪氨酸酪氨酸和和色氨酸等芳香族氨基酸色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白质溶液在可使蛋白质溶液在280nm280nm处有一吸收峰处有一吸收峰。可用于测定可用于测定蛋白质但需避免核酸干扰。蛋白质但需避免核酸干扰。 （1 1）Lowry-Kalcker Lowry-Kalcker 公式公式 蛋白质浓度（蛋白质浓度（mg/mlmg/ml）=1.45 A =1.45 A 280280 - 0.74 A - 0.74 A 260260 （2 2）Warburg-Christian Warburg-Christian 公式公式 蛋白质浓度（蛋白质浓度（mg/mlmg/ml）=1.55 A =

18、1.55 A 280280 - 0.76 A - 0.76 A 260260 n原理：原理：编辑ppt30n评价及应用：评价及应用：优点：敏感而简便，可优点：敏感而简便，可保留蛋白生物活性保留蛋白生物活性，常用与较纯的酶，常用与较纯的酶和免疫球蛋白。需和免疫球蛋白。需紫外分光光度计及石英比色皿。紫外分光光度计及石英比色皿。缺点：各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同；在缺点：各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm280nm测定易受游离色测定易受游离色aaaa和酪和酪aaaa以及尿酸和胆红素的干扰；导以及尿酸和胆红素的干扰；导致准确性和特异性受影响。致准确性和特异性受影响。措施：在

19、措施：在220-225nm220-225nm波长区域，用波长区域，用0.15mol/l0.15mol/l的的NaClNaCl稀释稀释1000-20001000-2000倍可消除干扰。倍可消除干扰。编辑ppt31n结构结构：也称：也称白蛋白白蛋白，585585个个aaaa残基构成的单链多肽，残基构成的单链多肽， MW=66458MW=66458，含，含17个个二硫键。二硫键。n理化性质理化性质：pI=4pI=45.85.8，肝细胞合成但不储存，半衰，肝细胞合成但不储存，半衰期为期为15-19 15-19 天，占总蛋白的天，占总蛋白的40%40%60%60%，p p7.47.4时带负电。时带负电。

20、n测定方法测定方法：色素结合法：色素结合法: :溴甲酚绿（溴甲酚绿（BCGBCG），溴甲酚紫），溴甲酚紫（BCPBCP）, ,盐析等。盐析等。（二）清蛋白（二）清蛋白（ALBALB）急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 参考值参考值成人：成人： 4055g L 编辑ppt32p临床意义：临床意义：白蛋白升高：白蛋白升高：白蛋白降低：白蛋白降低：肝功能下降：慢性肝病肝功能下降：慢性肝病白蛋白丢失：由尿中、胃肠道、皮肤丢失白蛋白丢失：由尿中、胃肠道、皮肤丢失白蛋白分解代谢增加：组织损伤及组织分解增加白蛋白分解代谢增加：组织损伤及组织分解增加白蛋白分布异常：肝硬化等白蛋白分布异常：肝硬化等先天性先天性A

21、LBALB缺乏病：极少见的遗传性疾病缺乏病：极少见的遗传性疾病蛋白质营养不良或吸收不良的评价指标蛋白质营养不良或吸收不良的评价指标真性升高：未见真性升高：未见假性升高：机体明显失水，假性升高：机体明显失水，或治疗输入过多白蛋白或治疗输入过多白蛋白编辑ppt3335g/L 35g/L 正常正常282834g/L 34g/L 轻度缺乏轻度缺乏212127g/L 27g/L 中度缺乏中度缺乏21g/L 21g/L 严重缺乏严重缺乏低于低于28g/L28g/L时会出现组织水肿时会出现组织水肿血浆血浆AlbAlb作为营养指标的评价标准作为营养指标的评价标准编辑ppt34p方法方法：间接法间接法: :TP

22、-ALB=GLBTP-ALB=GLB直接法直接法: :乙醛酸比色法乙醛酸比色法(GLB(GLB中的色氨酸远大于中的色氨酸远大于ALBALB中中的色氨酸含量的色氨酸含量) )色氨酸色氨酸+ +乙醛酸乙醛酸 紫色化合物紫色化合物H H+ +Hopkins-ColeHopkins-Cole反应反应: : 成人成人202040g/L.40g/L. A/G A/G：1.21.22.42.4球蛋白（球蛋白（G GLBLB）参考值参考值编辑ppt35p临床意义：临床意义：球蛋白升高球蛋白升高：球蛋白降低：球蛋白降低：合成减少、低或无合成减少、低或无-球蛋白血症球蛋白血症 真性升高（常见）：自身免疫性疾病、真

23、性升高（常见）：自身免疫性疾病、感染反应、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症。感染反应、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症。假性升高（少见）：机体明显失水。假性升高（少见）：机体明显失水。编辑ppt36n结构：结构： MW=54000MW=54000，四个相同亚基构成的四聚体。，四个相同亚基构成的四聚体。n理化性质：理化性质：p p4.74.7，肝细胞合成，半寿期，肝细胞合成，半寿期12 12 小时。小时。n测定方法：测定方法：免疫比浊法免疫比浊法免疫扩散技术免疫扩散技术。（三）前白蛋白（三）前白蛋白（PAPA，TTRTTR）急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 n即甲状腺素转运蛋白（即甲状腺素转运蛋白（TTRT

24、TR），），50%-70%50%-70%的的TTRTTR与视黄醇结合蛋白（与视黄醇结合蛋白（RBPRBP）组成复合体，由于）组成复合体，由于TTRTTR电泳位置在白蛋白之前故命其为电泳位置在白蛋白之前故命其为PAPA。TTRTTR和和RBPRBP均均由肝脏合成，为运载和营养蛋白。由肝脏合成，为运载和营养蛋白。编辑ppt37n功能：功能：营养指标，载体功能（甲状腺素营养指标，载体功能（甲状腺素维生素）。维生素）。n参考值：参考值： 0.20.4g/L 0.20.4g/L n临床意义临床意义：PAPA下降是肝功能不全的灵敏指标；下降是肝功能不全的灵敏指标； 降低：营养不良，急性炎症，恶性肿瘤，降低

25、：营养不良，急性炎症，恶性肿瘤， 肝肝硬化及肾炎时。硬化及肾炎时。编辑ppt38n结构：结构：394394个个aaaa残基构成的单链多肽，含残基构成的单链多肽，含101012%12%的糖的糖MW=5.5 MW=5.5 万。也称丝氨酸蛋白酶抑制物。万。也称丝氨酸蛋白酶抑制物。n理化性质理化性质：pIpI值为值为4.84.8，占，占1-1-球蛋白区带显色的球蛋白区带显色的9090。n测定方法：测定方法：免疫化学法，电泳（酸性凝胶电泳或等免疫化学法，电泳（酸性凝胶电泳或等电聚焦电泳），利用蛋白酶抑制能力测定等。电聚焦电泳），利用蛋白酶抑制能力测定等。n功能功能：蛋白酶抑制物（具有：蛋白酶抑制物（具有

26、9090的抑制蛋白酶活的抑制蛋白酶活力）。如糜蛋白酶，弹性蛋白酶，但此抑制作用有明力）。如糜蛋白酶，弹性蛋白酶，但此抑制作用有明显的显的p p依赖性。依赖性。（四）（四）1-1-抗胰蛋白酶（抗胰蛋白酶（AATAAT） 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 编辑ppt39常染色体共显性遗传，有多种遗传表型常染色体共显性遗传，有多种遗传表型现已发现至少有现已发现至少有7575种基因变体种基因变体主要根据电泳迁移率分类主要根据电泳迁移率分类 移动快的移动快的AATAAT变体用字母表前面的字母表示，移动最变体用字母表前面的字母表示，移动最慢的基因以慢的基因以PiZPiZ表示。表示。 F F型型-fast,

27、 M-fast, M型型-middle, S-middle, S型型slowslow具有正常功能的是具有正常功能的是PiMMPiMM型型，最常见的缺陷变体为，最常见的缺陷变体为Z Z和和S S型，表现为以下基因型：型，表现为以下基因型：ZZZZ、SSSS、SZSZ、MZMZ、MSMS。ATTATT基因的遗传表型基因的遗传表型 编辑ppt40降低：降低：（1 1）见于）见于AATAAT缺陷：缺陷： PiZZPiZZ型、型、PiSSPiSS型甚至型甚至PiMSPiMS型常伴有早年（型常伴有早年（20203030岁）出现岁）出现的的肺气肿肺气肿 低血浆低血浆AATAAT可发现于可发现于胎儿呼吸窘迫综

28、合征胎儿呼吸窘迫综合征 ZZZZ蛋白聚集在肝细胞，导致肝硬化蛋白聚集在肝细胞，导致肝硬化 PiZZPiZZ表型的新生儿中表型的新生儿中10%10%20%20%在出生数周后易患肝炎，最在出生数周后易患肝炎，最后因活动性肝硬化致死后因活动性肝硬化致死 PiZZPiZZ表型的某些成人会发生肝损害表型的某些成人会发生肝损害（2 2）肾病综合征，胃肠道疾病）肾病综合征，胃肠道疾病升高：升高：AATAAT属急性时相蛋白，在炎症、感染、肿瘤、肝病时属急性时相蛋白，在炎症、感染、肿瘤、肝病时均显著增加。均显著增加。n参考值：参考值： 0.9 0.92.0g/L 2.0g/L 临床意义：临床意义： 编辑ppt4

29、1应用评价：应用评价： 慢性阻塞性肺疾病慢性阻塞性肺疾病全球计划推荐，具有家族病史且全球计划推荐，具有家族病史且4545岁前发病的慢性阻塞性肺病患者，需要检测岁前发病的慢性阻塞性肺病患者，需要检测ATTATT。1 1蛋白区带的显色成分主要是蛋白区带的显色成分主要是ATTATT，若，若1 1区带减少，区带减少，建议进行建议进行ATTATT定量检测。定量检测。AAT0.7g/LAAT0.7g/L应做应做ATTATT基因型检测，基因型检测，PiZZPiZZ型通常在型通常在0.1-0.1-0.5g/L-0.5g/L。美国食品和药品管理局推荐当美国食品和药品管理局推荐当0.56g/L0.56g/L时采用

30、每周时采用每周输注一次输注一次ATTATT的替代治疗。的替代治疗。编辑ppt42n结构：结构：181181个个aaaa残基构成的单链多肽，残基构成的单链多肽， MW=3.5-4MW=3.5-4万，万，含含45%45%的糖，其中唾液酸占的糖，其中唾液酸占11%11%12%12%。n理化性质：理化性质：pI pI 值值2.72.73.53.5，肝细胞合成，脓毒症时，肝细胞合成，脓毒症时粒细胞和单核细胞及某些肿瘤组织也可合成。粒细胞和单核细胞及某些肿瘤组织也可合成。 位于位于1-1-球蛋白区带。球蛋白区带。n测定方法：测定方法：免疫化学法（扩散免疫化学法（扩散, ,浊度）浊度）, ,化学法（间化学法

31、（间接法），接法），ELISAELISA法等法等（五）（五）1-1-酸性糖蛋白（酸性糖蛋白（AAGAAG） 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 编辑ppt43n功能：功能：与免疫防御功能有关，机制不详；与免疫防御功能有关，机制不详；抑制血小板凝集影响胶原纤维形成；参与抑制血小板凝集影响胶原纤维形成；参与脂类运输。脂类运输。n参考值：参考值：.5.51.2g/L 1.2g/L 。编辑ppt44n 临床意义：临床意义：AAGAAG增高（增高（1 1）急性时相反应指标：在风湿病、恶）急性时相反应指标：在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一般增加性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一般增加3 3

32、4 4倍。倍。AAGAAG增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠增高是活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一。的指标之一。（2 2）糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征）糖皮质激素增加，包括内源性的库欣综合征和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，和外源性强的松、地塞米松等药物治疗时，AAGAAG降低：（降低：（1 1）营养不良、严重肝损害、肾病综）营养不良、严重肝损害、肾病综合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等合征以及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等（2 2）雌激素可使）雌激素可使AAGAAG降低。降低。编辑ppt45n结构：结构： 分子量分子量720KDa720KDa, ,是血浆中最大的蛋白质是血浆中最大的蛋

33、白质，由，由四个相同的亚基组成，含糖量约。四个相同的亚基组成，含糖量约。n理化性质：理化性质：肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，半肝细胞与单核吞噬细胞系统中合成，半寿期寿期5 5天。天。n测定方法：测定方法：免疫化学等免疫化学等n功能：功能：与多种分子和离子结合，影响蛋白水解酶活与多种分子和离子结合，影响蛋白水解酶活性（主要的蛋白酶抑制剂性（主要的蛋白酶抑制剂, ,具有选择性保护某些酶的具有选择性保护某些酶的作用）。作用）。（六）（六）2-2-巨球蛋白巨球蛋白(AMG) (AMG) 编辑ppt46n参考值：参考值：1.3-3.0g/L1.3-3.0g/Ln临床意义临床意义：婴幼儿及儿童比成人高；

34、：婴幼儿及儿童比成人高；升高：见于慢性肾炎、肝疾病、糖尿病、自身升高：见于慢性肾炎、肝疾病、糖尿病、自身免疫性疾病等，雌激素，低蛋白血症可使其含免疫性疾病等，雌激素，低蛋白血症可使其含量升高；量升高；降低：胰腺炎及前列腺癌时。降低：胰腺炎及前列腺癌时。编辑ppt47n结构：结构： 两对肽链两对肽链形成四聚体，有三种不同的表型，形成四聚体，有三种不同的表型，即即Hp1(1-1)Hp1(1-1)、Hp2-1Hp2-1、Hp2(2-2)Hp2(2-2)，分子量在，分子量在85-400KD85-400KDn理化性质：理化性质：肝合成，肝合成， pI pI 值为值为4.14.1，电泳位，电泳位a2 -a

35、2 -球球蛋白区带蛋白区带n测定方法：测定方法：电泳法，免疫化学法（扩散电泳法，免疫化学法（扩散, ,浊度）浊度）, ,化化学法等学法等（七）（七）结合珠蛋白结合珠蛋白(Hp) (Hp) 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 参考值：参考值：0.3-2.0 g/L0.3-2.0 g/L编辑ppt48n 功能：功能：与红细胞中释出自由与红细胞中释出自由HbHb结合结合, ,防止防止HbHb从尿中丢失而从尿中丢失而为机体有效地保存铁为机体有效地保存铁, , 急性溶血后一周再生恢复。急性溶血后一周再生恢复。n 临床意义：临床意义：HpHp浓度下降见于：浓度下降见于：溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾

36、。对溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾。对于于溶血性疾病合适的组合检测项目包括血浆溶血性疾病合适的组合检测项目包括血浆HpHp、LDLD和游离和游离HbHb。血管外溶血不会使血管外溶血不会使HpHp发生变化。发生变化。严重肝病患者，其严重肝病患者，其HpHp合成减少。合成减少。HpHp浓度升高见于：属急性时相反应蛋白，当烧伤浓度升高见于：属急性时相反应蛋白，当烧伤和肾病综合征情况下，血和肾病综合征情况下，血HpHp常明显升高。常明显升高。编辑ppt49n结构：结构： MW=12-16 MW=12-16 万万, 1046, 1046个个aaaa残基构成的单链多残基构成的单链多肽，含糖约，每分

37、子铜蓝蛋白可结合肽，含糖约，每分子铜蓝蛋白可结合个铜原子。个铜原子。n理化性质理化性质：肝合成：肝合成, ,巨噬细胞和淋巴细胞合成少量；巨噬细胞和淋巴细胞合成少量；pI pI 值为值为4.44.4， 具遗传基因多态性具遗传基因多态性。n测定方法测定方法：免疫化学（扩散或比浊）等：免疫化学（扩散或比浊）等（八）（八）铜蓝蛋白铜蓝蛋白(CER)(CER) 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 编辑ppt50n功能：功能：具铁氧化酶活性且起抗氧化剂作用，具铁氧化酶活性且起抗氧化剂作用，铜的无毒代谢库铜的无毒代谢库n临床意义：临床意义：增加增加感染感染, ,创伤创伤, ,肿瘤肿瘤; ; 降低降低-营养不良

38、，严重肝病及肾综营养不良，严重肝病及肾综; ;协助诊断协助诊断Wilson Wilson 病病n参考值：参考值：0.2-0.6g/0.2-0.6g/L L编辑ppt51n结构结构： MW=7.7 MW=7.7 万万, ,单链糖蛋白，含糖约。单链糖蛋白，含糖约。n理化性质：理化性质：肝细胞合成，肝细胞合成， pI pI 值为值为5.5-5.9,5.5-5.9,半寿期半寿期10.510.5天，可逆结合多价离子如天，可逆结合多价离子如Fe,Cu,Zn,Co Fe,Cu,Zn,Co 等，等，一分一分子子TRFTRF可结合两个三价铁。可结合两个三价铁。n测定方法：测定方法：免疫扩散法，放免法和免疫比浊法

39、等。免疫扩散法，放免法和免疫比浊法等。（九）（九）转铁蛋白转铁蛋白(TRF)(TRF) 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 编辑ppt52n功能：功能：运输铁。运输铁。n临床意义：临床意义：血血TRFTRF浓度受铁供应调节，缺铁浓度受铁供应调节，缺铁TRFTRF升升高，铁治疗后恢复。可用于贫血的诊断和对治疗的高，铁治疗后恢复。可用于贫血的诊断和对治疗的监测。监测。降低降低: :急性时相反应、慢性肝病、营养不良及蛋白丢急性时相反应、慢性肝病、营养不良及蛋白丢失时；失时；升高：妊娠或雌激素会使其升高升高：妊娠或雌激素会使其升高; ;缺铁性贫血。缺铁性贫血。n参考值：参考值： 2.0-3.6g/L2.

40、0-3.6g/L 编辑ppt53n结构：结构： MW=11800MW=11800， 100100个个aaaa残基构成的单链多残基构成的单链多肽，分子中含一对二硫键，不含糖。肽，分子中含一对二硫键，不含糖。n理化性质：理化性质： pI pI 值为值为5.75.7，存在于各种有核细胞，存在于各种有核细胞表面，可从淋巴和肿瘤细胞表面释放入血循环。半表面，可从淋巴和肿瘤细胞表面释放入血循环。半衰期衰期107107分钟，几乎由肾小管回收。分钟，几乎由肾小管回收。n测定方法：测定方法：放射免疫化学等。放射免疫化学等。（十）（十）2 2 微球蛋白微球蛋白(BMG) (BMG) 编辑ppt54n功能：功能：分

41、子量小，可自由通过肾小球滤过分子量小，可自由通过肾小球滤过膜，在肾小管几乎全部重吸收，膜，在肾小管几乎全部重吸收，可监测肾可监测肾小管功能小管功能；是；是HLAHLA链的轻链部分。链的轻链部分。 n临床意义：临床意义：增高：肾功能衰竭，炎症及肿增高：肾功能衰竭，炎症及肿瘤时。瘤时。参考值：参考值：1.0 2.0 mg/L1.0 2.0 mg/L编辑ppt55n结构：结构： MW11.5-14 MW11.5-14 万万，分子含个相同的，分子含个相同的亚基，亚基间靠非共价键连接成圆盘状多聚体。亚基，亚基间靠非共价键连接成圆盘状多聚体。n理化性质：理化性质：肝合成，肝合成， pI pI 值为值为6.

42、26.2，电泳位，电泳位于于 r r 区带区带。n测定方法：测定方法：半定量沉淀法（早），免疫化学半定量沉淀法（早），免疫化学法、放免法。法、放免法。（十一）（十一）C-C-反应蛋白质反应蛋白质(CRP) (CRP) 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 编辑ppt56n功能：功能：结合多糖，磷脂和核酸；激活补体，结合多糖，磷脂和核酸；激活补体，抗凝。抗凝。n参考值：参考值： 5mg/L 5mg/L n临床意义：临床意义：第一个认定的急性时相反应蛋白第一个认定的急性时相反应蛋白, ,是急性时相反应的一个敏感指标，在、是急性时相反应的一个敏感指标，在、创伤、感染、外科手术时含量迅速升高，达到创伤、感

43、染、外科手术时含量迅速升高，达到正常的正常的2000倍。倍。编辑ppt57CRPCRP是是非特异性指标非特异性指标，主要用于结合临床监，主要用于结合临床监测疾病测疾病筛选微生物感染筛选微生物感染评估炎症性疾病的活动度和疗效监控评估炎症性疾病的活动度和疗效监控 识别系统性红斑狼疮、白血病和外科手术识别系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染后并发的感染监测肾移植后的排斥反应监测肾移植后的排斥反应新生儿败血症和脑膜炎的监测新生儿败血症和脑膜炎的监测编辑ppt58（十二）降钙素原（十二）降钙素原(PCT) (PCT) 急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白 nPCTPCT为为116116个氨基酸的多肽

44、，是由甲状腺个氨基酸的多肽，是由甲状腺C C细胞分细胞分泌的降钙素的前体。炎症反应时，其他组织如肝、泌的降钙素的前体。炎症反应时，其他组织如肝、肾、胰腺也合成降钙素原，并且不进行裂解，使肾、胰腺也合成降钙素原，并且不进行裂解，使其血浆浓度从一个非常低的基线浓度迅速增加，其血浆浓度从一个非常低的基线浓度迅速增加，增加速度远高于其他增加速度远高于其他APRsAPRs。细菌感染后。细菌感染后3h3h可发生可发生PCTPCT水平的升高，水平的升高，6-12h6-12h达峰值，体内半衰期达峰值，体内半衰期24h24h。编辑ppt59（十二）降钙素原（十二）降钙素原(PCT) (PCT) 急性时相反应蛋白

45、急性时相反应蛋白 n临床应用：病毒感染即使在严重的病毒性疾病中，临床应用：病毒感染即使在严重的病毒性疾病中，PCTPCT也不会升高。也不会升高。PCTPCT浓度的升高仅见于在浓度的升高仅见于在合并细合并细菌重复感染或脓毒症菌重复感染或脓毒症n PCT PCT浓度的升高标志着炎症反应的加重，暗示预浓度的升高标志着炎症反应的加重，暗示预后不良并为持续存在脓毒症病灶的一个线索。后不良并为持续存在脓毒症病灶的一个线索。PCTPCT浓度下降则表明炎症反应逐步消失，如潜在传染浓度下降则表明炎症反应逐步消失，如潜在传染性病灶的成功治疗和脓毒症感染的控制。性病灶的成功治疗和脓毒症感染的控制。编辑ppt60临床意义：临床意义：1 1、全身感染、全身感染/ /脓毒血症的鉴别诊断脓毒血症的鉴别诊断PCT0.0