浅谈六盘山蕨菜多糖红外分析

1、浅谈六盘山蕨菜多糖红外分析         【摘要】目的：提取分离纯化具有抗氧化作用的蕨菜多糖，并对其进行红外鉴定，以初步确定蕨菜多糖的一级结构。方法：水提醇沉得蕨菜粗多糖,用Sevage法（氯仿：正丁醇4：1）除蛋白。再加无水乙醇使含醇量达到80，静置过夜，5000r/min离心10min，残渣依次用体积分数95乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，冷冻干燥，得精制多糖，红外分析蕨菜多糖。结果结论：经红外分析后初步推测具有抗氧化作用的蕨菜多糖一级结构是具有-D（1、4）连接的吡喃葡聚糖主链。 【关键词】六盘山蕨菜;

2、多糖;红外分析     蕨菜属羊齿科,多年生草本植物,别名如意菜、拳头菜等,是六盘山林区和山区常见的一种山野菜。蕨菜多糖具有多种生理活性1，表现出强的抗氧化活性。而且蕨菜生长周期短,适宜人工栽培,便于采集和加工,生产成本低。因此,蕨菜在医药和保健食品等方面极具开发潜力2。本文利用水浴回流提取、乙醇沉淀多糖、Sevage法去除蛋白质等工艺提取粗多糖；将得到的粗多糖通过有机溶剂离心洗涤，冷冻干燥进行分离纯化，收集得到精制多糖3；采用紫外分光光度计、红外光谱仪对多糖结构进行初步的光谱分析。以期能够为利用六盘山蕨菜植物资源奠定理论基础38。  

3、0;  1材料与方法     11 材料与仪器     蕨菜：采自六盘山区，80烘干，粉碎过80目药典筛。     试剂（分析纯）：葡萄糖，硫酸，苯酚，氯仿，无水乙醇，正丁醇，过硫酸钾，ABTS等。     仪器：红外分光光度计，UV7501紫外可见分光光度计，高速离心机，冷冻干燥器，索氏提取器     12试验设计     1

4、21蕨菜多糖的提取9 10     称取干燥粉碎后的蕨菜细粉20g，置索氏提取器中，依次用石油醚提取至提取液无色为止。残渣挥干溶剂后，加入200ml蒸馏水回流提取2h,趁热过滤，重复3次。合并滤液，减压浓缩至原体积的1/2后，用4倍量的无水乙醇沉淀过夜，5000r/min离心10min，沉淀冷冻干燥为粗多糖。     122蕨菜多糖的精制:  将粗多糖加100ml热水溶解，用Sevage法（氯仿：正丁醇4：1）法除蛋白质；浓缩多糖溶液，加入无水乙醇使含醇量高达80，静置过夜，5000r

5、/min离心10min，沉淀依次用95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，冷冻干燥，得到精制多糖。     123多糖含量得测定:  采用苯酚硫酸法。     124结构分析11 13     1241紫外光谱分析： 用紫外光谱扫描仪对多糖组分进行扫描， 测定蕨菜多糖的紫外吸收光谱。     1242红外光谱分析14： 取1 mg 左右经干燥的多糖样品，&

6、#160;与100  200 mg 经干燥的KBr 粉末在玛瑙研钵中轻轻研磨均匀， 在红外灯下操作. 经压片机压成薄片， 随即上机测定， 于4 000  400 cm1红外光谱仪扫描。     2结果与分析     21蕨菜多糖的提取结果：  蕨菜粗多糖为浅灰色，无味。易溶于水，热水中溶解度增大。不溶于丙酮、乙醚等非极性溶剂。干燥粉碎后的蕨菜细粉20g按法提取得到多糖

7、1248g,最终测定多糖得率为6.24。     22紫外光谱分析：  我们在蕨菜多糖的紫外吸收光谱的260nm和280nm处未观察到任何吸收峰；而此处的吸收峰主要是核酸和蛋白质15，所以我们确定用Sevage法除蛋白后的蕨菜多糖中不含核酸、蛋白质。     23红外光谱分析： 根据图（1）我们在蕨菜多糖的红外吸收光谱中，发现在36003200cm-1, 30002800cm-1, 14001200cm-1, 1200800cm-1,均有多糖特征峰；在89

8、1 cm-1处的吸收峰表明多糖结构中存在吡喃糖苷键，3400 cm-1处出现的强而宽的峰显示蕨菜多糖中存在OH，1600 cm-1处的峰是C=O伸缩振动引起的吸收16- 18。                    3结论     依据上述光谱分析，再结合Smith降解法等化学方法19：我们初步确定蕨菜多糖的一级结构中主要含有葡萄糖、半乳

9、糖、鼠李糖、木糖、甘露糖，而具有-D（1、4）连接的吡喃葡聚糖主链。 参考文献 1王新华，赵恒田，盛庆军. 蕨类山野菜人工繁殖及其研究进展J. 北方园艺，2004（ 6） ：4-5. 2 左茹娟，王铭裕，卫振华，等. 兴隆山自然保护区野菜资源利用现状与开发前景J. 中国野生植物资源，2006（ 6） ：26-28. 3 许广波，李艳茹，石铁源，等. 延边地区野生蕨菜资源及其研究进展J. 中国野生植物资源，2000（ 6） ：30-31. 4 李梅

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