油红染色具体操作方法

1、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醴、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及月中瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹田，苏丹IV,苏丹黑及油红。等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度(37C-60C)对组织切片染色效果是有

2、好处的。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油明胶和阿拉伯糖胶等。一、苏丹田(Sudan田)染色法：操作方法：(1)固定于10刈醛的组织。(2)水洗后采用冰冻或石蜡切片。(3)经蒸储水后，浸染于Harris苏木素或明矶苏木素中淡染1-2分钟。(4)自来水冲洗。(5)水洗后，移入70%酉精5秒钟。(6)投入苏丹田染液中约30分钟或更长时间，置于56c温箱中。(7)在70%H精中洗涤5-10秒钟。(8)洗于蒸储水中，然后将切片移于载玻片上。(9)切片移于玻片上，将切片周围的水分小心擦掉。(10) 甘油明胶封固。结果：脂肪呈橙红色或鲜红色或黑色，胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈

3、蓝色。试剂配制：1 .苏丹田染液配法：将0.15克苏丹田溶解于100m170%H精或纯丙酮和70%酉精混合7中(各50ml),临用时过滤，所得滤液即为饱和浓度。注：浸染时，容器必须盖好，否则酒精或丙酮挥发，染料沉淀。2 .甘油明胶配制：明胶40g蒸储水210ml甘油250ml石碳酸结晶5ml先将明胶浸入蒸储水中2小时或更长时间，然后加甘油和石碳酸，加热15分钟，摇搅直至混合液均匀为止。二、苏丹IV(SudanIV)染色法：苏丹IV又名猩红，是苏丹田的衍生物，作为脂肪染剂，经各地实验证明，其结果优于苏丹田。其染色步骤与苏丹田染法完全相同，从略。试剂配制：将1-2克猩红染剂加纯酒精70ml,10%

4、C氧化钠20ml,蒸储水10ml,制成混合液，以微火加热，置37c温箱中1小时，取出冷却后过滤，12小时后即可使用。注：此液5天内失效，如此看来，浪费较大，建议配制70%酉精饱和液，或纯丙酮和70%酉精饱和液，它们使用方便，且不易失效。结果：脂肪呈猩红色，比苏丹田更为清晰。三、油红染色法：油红作为脂肪染色剂，具染色步骤简便，染色结果肯定，并且优于苏丹IV。试剂配制：油红O0.5g异丙醇(含量98%100ml此为油红饱和液，可长期保存备用。染色步骤：(1)冻切片(2)蒸储水充分洗涤。(3)油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。油红稀释液的配制：(4)取油红饱和液6毫升，加蒸储水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用。(5)60%乙醇镜下分化至间质清晰。(6)水洗。(7)Marry氏苏木素复染核。(8)水洗。甘油或甘油明胶封片。结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。