微生物技能考核标准

1、显微镜的使用与维护班级：姓名：学号:一、实操部分（80分）序号内容评分标准分值得分1准备（满分10分）材料准备充分，中途不得取用非操作台材料5显微镜取用姿势准确，安放位置合理52低倍镜使用（满分25分）插上电源，打开光源，用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动5使低倍镜对准镜台的通光孔，放置载玻片，标本中间对准通光孔，并用压片夹夹好5调节焦距，从一侧看着向上调节载物台，粗准焦螺旋调节物镜与载物台至最小距离处5双眼视目镜，调节粗准焦螺旋至有模糊的像，然后调节细准焦螺旋至清晰的像，二者不得来回交替使用，且光线强弱适宜（2分）。103高倍镜使用（满分10分）将观察对象调至视野中央，转动转换器至高倍

2、镜，防止撞到玻片5调节细准焦螺旋至清晰的像， 光线调节至强弱适宜104油镜的使用（15 分）转动转换器，使高倍镜头离开通光孔，在需观察 部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢转动油 镜，在转换油镜时，从侧面水平注视镜头与玻片 的距离，使镜头浸入油中而乂不以压破载玻片为 宜。5如果不出现物象或者目标不埋想要重找，在加油区之外重找时应按：低倍一高倍一油镜程序。在 加油区内重找应按： 低倍一油镜程序，不得经高 倍镜，以免油沾污镜头（3分），至调出清晰的 像。10擦拭目镜和物镜上的油污，擦镜纸、二甲苯、擦拭方法均要止确（1）15好玻片，拔下电源，关上开关，载物台调至最 大距离处，物镜八字摆开，罩上防尘罩

3、，并认真 填写使用记录。55计时不得超过5分钟，超过者倒扣分，最多扣 5分简单染色评分标准班级：姓名：学号:序号考核项目评分要素配分评分标准检验结果得分备注1准备（10分）着装整洁；实验用物齐全适用，放置合理10少选多选1件扣5分2制片（40分）无菌操作取菌20无菌操作正确规范，错1处扣5分，涂片区域圆形，直径 1cm左右3干燥固定5不可过热、固定操作的规范性，错1处扣2分4染色、水洗15染液滴加的量；染色时间，水洗操作的规范性，错1处扣5分5镜检（35分）显微镜的预备5显微镜的检查；正确放置打开光源，光路又准，错1处扣2分6涂片镜检10低倍到高倍，到油镜，物镜的转换；物象调节，错1处扣2分7

4、镜检结果15菌体分布均匀，密度合适，明暗合适，对比度合适。错1处扣3分8显微镜的整理5镜头的擦拭；物镜的“八字形”转换；将载物台降到最低，错1处扣2分9其他（5分）清理用物，环境卫生5清扫实验台及收拾产生垃圾，少 1环节扣1分10时间（10分）操作时间15要求10分钟内完成，每超过 1分钟，扣5分。总分制备无菌平板评分标准（时间5分钟）班级：姓名：学号:项目考核内容分值评分细则扣分备注得分准备（10分）物品准备、摆放及酒精擦拭8物品摆放合理、酒精擦手正确，材料准备齐全，得8分中途不得取用任何物品，取 1次扣4分摆放的物品影响操作，扣 2分取菌前未用酒精擦拭，扣 2分贴标签（培养皿）2贴标签且位

5、置合理，得2分每漏贴一个，扣1分每错贴一个，扣1分三角瓶操作（15）开塞、瓶口灭菌、持法、盖塞15三角瓶操作正确，得15分未灼烧，开塞不正确，塞子放置不正确，均扣5分盖塞前瓶口和塞子不灼烧，均扣 5分三角瓶的瓶口开口处位置不对，扣 5分以上几项合计最多扣 15分倒平板（40分）加培养基（培养皿 持法、加入量、污 染皿壁、混匀、）40正确（单手持皿，平端，两指自如开合皿盖，另一只手持培养基瓶），平板效果优秀，得 40分培养基温度不适宜，皿盖上方水汽过多，扣5分平板未铺全或高于培养皿高的2/3 , 一个扣5分，培养基污染皿壁，一个扣 10分三角瓶口接触平皿，一个扣 5分培养基倾斜，一个扣 5分培养

6、基有凝块、不透明，一个扣 5分无菌操作（15）酒精灯附近区操作15在酒精灯无菌区操作，得 15分所有开口处均应在酒精灯无菌区，出无菌区1次扣5分操作情况（10分）操作熟练程度10熟练，得10分较熟练，得8分一般，得6分不熟练，得0分无菌检查（10分）培养48h ,有无微生物生长10无杂菌生长，且平板无开裂，无干枯部位，得10分培养皿有杂菌，每个扣 5分平板开裂，共扣5分平板干枯，共扣5分血球计数板计数（时间：30min）项目考核内容分值f核记录（以V表小）备注得分准备（3分）物品摆放及酒精擦手物品摆放合理、酒精擦手正确，得分摆放的物品影响操作，扣分取菌前未用酒精擦手，扣分显微镜的取用显微镜的取

7、用与摆放方式准确，得分取用与摆放方式不正确，扣分血球计数板的放置与检查1正确放置血球计数板于载物台上，得 1分没用压片夹夹住，扣分没有放在计数区内，扣分1进行检查或经清洗后确定清洁，得1分没有进行检查扣1分清洗后干燥方法不合理，扣 1分加样（2分）添加酵母菌悬液于血球计数板上2能够正确添加酵母菌悬液2分加样前未摇匀菌悬液扣1分未用滤纸吸除多余菌液扣分盖好玻片后有气泡扣分显微镜调节（3分）调整显微镜找到血球计数板上计数网格340倍镜下找到最左上角的大网格，并将显微镜调清晰，给监考老师看，得 3分未从低倍到高倍转换，扣分未给监考老师看扣分未找到最左上角的大网格扣2分找到最左上角的大网格但不清晰扣

8、1分。计数（2分）准确计数，并写出原始数据2分准确计数，并写出原始数据，得 2分没有原始数据，扣2分数据不准确，扣1分班级:姓名:学号:原始数据不合理，扣1分计算，报告（6分）计算公式、过程4准确计算，得出菌悬液浓度，得 4分数据处理过程不正确，扣4分数据处理结果不正确，扣 4分数据不合理，扣1分报告结果规范、正确2报告清楚、准确、无涂改，得 2分结果报告不准确，扣分报告填写每改1次，扣分清洗（2分）血球计数板清洗，归位2血球计数板清洗，并干燥归位 2分清洗方法不正确，扣1分干燥方法不合理，扣1分未将血球计数板归位，扣 1分文明操作（2分）实验后台面整理，设备归位2整理，得2分显微镜未整理，扣

9、1分台面未整理，扣1分血球计数板损坏，扣 2分盖玻片损坏，扣分完成时间（0分）共用（）分钟开始0提前，不加分不扣分按时，不加分不扣分结束：超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）合计平板划线分离考核标准班级：姓名：学号：序号项目内容满分（100分）评分细则扣分总分实验准备全所需的所有实验材料15分3材料准备充分，中途取用物品扣3分1前的准备贴标签4未贴扣4分，贴错扣2分；信息不完整扣2分酒精棉球擦拭手与工作4分未擦拭扣4分台面擦手不彻底最多2分擦台面不彻底最多2分接种针的灼烧是否彻底，拿法是否科学灼烧不彻底，最多扣 3分4分接种环拿法不对，扣1分未灼烧4分3试管口未灼烧，扣3分2持塞手法不正确，

10、扣2分试管中取菌（15分）3接种环未冷却，扣 3分4塞塞子时未灼烧塞子与管口， 扣4分从试3试管口离开无菌区，扣 3分管中手法是否标准（5分）1持平板的手法不当扣1分2取样504开口过大扣4分接入分有离开5cm酒精灯无菌区1次扣2分，培养5最多扣5分皿中离开无菌区10cm以上一次扣 5分分区接种（30）5划完1区未灼烧，扣5分5灼烧完未冷却，扣5分5单手旋转平板，有明显的分区操作10划破平板，最多扣10分接种台面的整理：酒精灯熄1分熄灭方式不对，扣1分完毕，灭，各试验器材归位（4分）3分未归位，扣3分；未整理，扣2分未带走垃圾，扣2分。最多扣3分3台面置入培养箱中倒置培10分未倒置，扣2分的处

11、养，以及最适培养温度4分培养温度和时间写在标签上，未注明理以的设置（4分）扣2分及培完成实验，酒精棉球擦2分未擦拭手或洗手1养等拭手或者洗手（2分）4结果检查分离效果20分10分10个以上单菌落，少1个扣1分分区效果5分无明显分区，只有一个区，扣 5分平板无菌落区按占的比例扣分污染情况5分有其他杂菌污染，扣 5分5用时55分钟，超过1分钟扣1分平板涂布分离考核标准（20min）班级：姓名：学号:项目考核内容分值考核记录（扣分）备注得分准备（10分）物品摆放及酒精擦手5物品准备合适，不多不少，得 3分物品摆放合理、酒精擦手正确，得 2分摆放的物品影响操作，扣 1分取菌前未用酒精擦手，扣 1分编号

12、（试管、培养M）,贴标签5都编号且正确，得5分每漏编（贴）一个，扣 1分每错编一个，扣1分；标签信息不全，一个扣 1分样品 稀释（30 分）样品混匀（原始样品、稀释样品）10进行且操作正确（平摇样品瓶、手心震摇试管），得10分原始样品没有混匀，扣 2分稀释样品没有混匀，一个扣 2分手心震摇试管时没塞塞子，扣 2分移液过程其他问题，一次扣 2分吸管或移液器使用 （打开方式、取液、 调节液面、放液、 稀释顺序）10吸管或移液器使用正确，得 5分打开吸管包扎纸时手碰到管尖至吸管的1/3处，一次扣2分；枪头盒每取一次都要迅速盖上，注意无菌操作，未盖一次扣2分放液时若吸管（或移液器）外壁碰到试管口却没有

13、灼烧试管口，一次扣2分吸取刻度不准确，一次扣 2分稀释时将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中，一次扣2分移液过程中液体流滴在试管外面，一次扣2分试管三角瓶操彳正确，得 10分【音管 二件洋后想乍菌种试管三角瓶开塞未灼烧，扣 2分以臼、-m 7TM木|厂（开塞、管口灭菌、持法、盖塞）10开塞不正确，一次扣 2分盖塞不正确，一次扣 2分持法不正确，一次扣 2分盖塞未灼烧，扣 2分操作正确，得5分将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中进行接加样5种，一次扣1分吸管外壁碰到培养皿壁，一次扣1分漏接培养皿，一个扣1分平板试管被污染，每根扣1分涂布涂布棒使用正确，涂布效果好，得 10分(25涂布

14、棒上酒精未灼烧彻底，扣 2分分）涂布10涂布棒未冷却，一次扣 2分涂布方法不对，扣2分涂布使平板破，扣4分单手持皿，平端，两指自如开合皿盖，错误扣2分酒精灯附近区操作3在酒精灯附近区操作，得 3分未在酒精灯附近区操作，扣 3分空白4进行，得4分未进行，一个扣2分操作熟练程度3熟练，得3分较熟练，得2分一般，得1分不熟练，得0分培养（3分）培养3正确培养，得3分培养时未翻转培养皿，一个扣 2分将培养时间与培养温度写在标签上，错误或漏写均扣1分文明操作（2分）实验后台面整理1整理，得1分未整理，扣1分器皿破损1未破损，得1分破损，扣1分完成时间（0）共用（）分钟开始：0提前，不加分不扣分按时，不加

15、分不扣分超时：每超1分钟，扣1分（最多扣5分）结束：合计结果观察结果培养结果观察10菌落无片状，空白无菌落，得10分有10个以上单菌落，少一个扣1分判空白平板有菌落，一一个平板扣5分断精密度< 10%得12分(3极差与平均值之比（）121015%得9分0（以计数平板进行计算）1520%得6分分）2030%得3分>30%得0分准确< 10%得8分平均值-对照值 I。对照值81020%得4分（以计数平板进行计算）2030%得2分度>30%得0分培养基的制备与灭菌班级：姓名：学号:项目考核内容分值考核记录（扣分）备注得分题目配制50mL牛肉膏蛋白陈培养基，全部分装入试管中，灭

16、菌完毕摆斜面准备（10 分）药品准备2药品齐全，类别准确天平准备4水平，干净其他4操作所需所有物品，均齐全合适计算（5分）准确5所有物品均计算准确，且称量准确加水3加水量适宜称量（25分）顺序准确2按照配方顺序加入样品方法正确5牛肉膏的称取方法正确5蛋白陈迅速，不至潮解操作文明10不得有药品撒入天平中，一次扣5分溶解与定容（10）药品溶解5按顺序溶解样品，不糊不溢准确定容至要求的体积5体积准确，定容方法准确调节pH （10分）调制要求值5pH试纸使用准确5调节准确，不过量，不回调分装（15分）分装试管，将所有培养基分装完5装量适宜，过大或过小一支扣1分5分装时培养基沾染在试管口上，一支 1分5分装过程培养基凝固灭菌（5分）高压蒸汽灭菌5温度时间设定合适，写在标签上灭菌锅使用熟练摆斜面5分摆接种斜面5长短适宜表面整齐熟练程度（5分）操作熟练程度5熟练，得5分较熟练，得3分一般，得2分不熟练，得0分文明操作（5分）实验后台面整理3整理，得3分未整理，扣3分器皿破损2未破损，得2分破