高考生物一轮专题复习现代生物科技专题基因工程讲义

1、高考生物一轮专题复习现代高考生物一轮专题复习现代生物科技专题基因工程讲义生物科技专题基因工程讲义种类种类Ecoli DNA连接酶连接酶T4DNA连接酶连接酶来源来源大肠杆菌大肠杆菌_功能特功能特性性只能将双链只能将双链DNA片段片段互补的互补的_连接连接起来起来“缝合缝合”两种末端，但两种末端，但连接平末端之间的效率连接平末端之间的效率_ 作用作用将双链将双链DNA片段片段“缝合缝合”起来，恢复被限制酶起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的切开的两个核苷酸之间的_T4噬菌体噬菌体黏性末端黏性末端较低较低磷酸二酯键磷酸二酯键比较项目比较项目限制酶限制酶DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶

2、解旋酶作用底物作用底物DNA分子分子DNA分子片段分子片段脱氧核苷酸脱氧核苷酸DNA分子分子作用部位作用部位磷酸二磷酸二酯键酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对碱基对间的氢键间的氢键形成产物形成产物黏性末端黏性末端或平末端或平末端形成重组形成重组DNA分子分子新的新的DNA分子分子形成单链形成单链DNA类型类型步骤步骤检测内容检测内容方法方法分分子子检检测测第一步第一步转基因生物的转基因生物的DNA上上是否插入了目的基因是否插入了目的基因_(DNA和和DNA之间之间)第二步第二步目的基因是否转录出目的基因是否转录出了了mRNA_(DNA和和mRNA之间之间)第三步第三步目的基因是

3、否目的基因是否翻译成蛋白质翻译成蛋白质_个体生物学个体生物学水平鉴定水平鉴定抗虫或抗病接种实验，以确定是否有抗性抗虫或抗病接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度以及抗性的程度DNA分子杂交技术分子杂交技术分子杂交技术分子杂交技术抗原抗体杂交技抗原抗体杂交技术术从基因文库中获取从基因文库中获取人工合成人工合成方方法法从基因组文从基因组文库中获取库中获取从部分基因文库，如从部分基因文库，如cDNA文库中获取文库中获取化学合化学合成法成法反转反转录法录法过过程程生物种类生物种类植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞常用方法常用方法农杆菌转化法农杆菌转化法显微注射技术显微注射技术感受态

4、细胞法感受态细胞法受体细胞受体细胞 体细胞体细胞受精卵受精卵原核细胞原核细胞转化转化过程过程将目的基因插入将目的基因插入到到Ti质粒的质粒的TDNA上上农农杆菌杆菌导入植物导入植物细胞细胞整合到受整合到受体细胞的染色体体细胞的染色体DNA上上表达表达将含有目的基将含有目的基因的表达载体因的表达载体提纯提纯取卵取卵(受受精卵精卵)显微注显微注射射受精卵发受精卵发育育获得具有获得具有新性状的动物新性状的动物 处理细胞处理细胞感受态细胞感受态细胞重组表达载重组表达载体与感受态细体与感受态细胞混合胞混合感受感受态细胞吸收态细胞吸收DNA分子分子项目项目蛋白质工程蛋白质工程基因工程基因工程区区别别过过程

5、程预期蛋白质功能预期蛋白质功能设计设计预期的蛋白质结构预期的蛋白质结构推推测应有的氨基酸序列测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷找到相对应的脱氧核苷酸序列酸序列获取目的基因获取目的基因构建构建基因表达载体基因表达载体将目将目的基因导入受体细胞的基因导入受体细胞目的基因的检测与目的基因的检测与鉴定鉴定实实质质定向改造或生产人类所定向改造或生产人类所需的蛋白质需的蛋白质定向改造生物的遗传定向改造生物的遗传特性，以获得人类所特性，以获得人类所需的生物类型或生物需的生物类型或生物产品产品结结果果可生产自然界没有的蛋可生产自然界没有的蛋白质白质只能生产自然界已有只能生产自然界已有的蛋白质的蛋白质联系联系蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第蛋白质工程是在基