低成本基因多态性检测方法及其应用研究 - 图文-

1、 中 圜 粟 科 久 擎 学 报 第 卷 后 在 孔 中上 样 （ 图 ，） 将 芯 片 放 入 芯 片 电泳 仪 中 ， 如 ， ， 需 全血 ， 因此本项 目方法适应 于公安刑 侦特 殊微量样品的检测。 仪器在孔 和孔 之 问加 上进样 电压 ， 使得样 品 由孔 扩 散至孔 及整个进样通道中（ 如图 ，） ， 。进样完毕后在 孔 孔 之 间加 上 分 离 电 压 ， 位 于 分 离 通 道 和 进 样 通 和 则 道 交 叉 点 的样 品沿 着 分 离 通 道 向孔 扩 散 （ 图 ， ） 如 ， ， 检 测 器位 于分 离通 道 末 端 接 近 孔 ， 图所 示 。用 芯 片 处 如

2、（） 扩增反应的简便性 。直接加入扩增模板 于 管 中， 不需要多 次提取 、 心洗脱 等 费时过 程。而通 常 的基 离 因 组 提取 过程 会 造 成 样 本 的 交 叉 污 染 ， 增 加 了血 液 也 病 毒感染 的风险 。 （ ） 管 基 因多 态 性 测 定 法 （ 单 四引 物 法 和 五 引 物 法 ） 特 电泳技术 取代传统 的凝 胶电泳 ， 不仅 简便快 捷 ， 一次 可在 同 时测 定 样 品 ， 且 不 需 要用 溴化 乙锭 染 色 ， 内 个 而 异性高 ， 在等位基因特异性 引物的 端倒数第 位引入人 工 突变 碱 基 大 大 提 高 了 特 异 性 。 国 外 有

3、 四 引 物 法 的 文 献 报 导 ， 特 异性 低 ， 以 推 广 ， 见 五 引 物 法 报导 。 但 难 未 （ ） 于 适 配 器 连 接 介 导 的 多 重 等 位 基 因 特 异 基 性 扩 增 法 ， 需 用 个 引 物 进 行 重 反 应 ， 用 只 利 “ 型适 配器 大 大 提 高 特 异 性 ； 同 时 进 行 ” 可 重 反 应 。 而 常 规 多 重 一 般 只 能 进 行 重 ， 而且 是 采用 个 引 物 进行 反 应 。 该 创 新 方 法 国 内外 未 重 见 相 似 方 法报 导 。 （） 阵列 式 凝 胶 电 泳 系 统 ， 用 平 行 错 开 模 式

4、可 同 时 采 测定 个 样 本 ， 采 用 普 通 的 联 或 加 样 枪 进 行 加 可 联 减少了对环 境 的污 染。本课题 采用斜 入射 式激光 诱导 荧 光检测光路 ， 研制 了体积 小 、 作简便 而且 成本低 的微 流 操 控芯片电泳分析系统 ， 法相结合 ， 与 在金属 丝模 压法 制 作 的 芯 片上 实 现 对 的快 速 检 测 。 】 。 天 ， 样。有文献采用 对角菱 形 电泳模 式 ， 不易 观察 ， 需特 殊 且 形 状 的 电泳 槽 。 总之 ， 采用 基 因多 态 性 检 测 平 台进 行 了 一 系 列 研 究 ， 决 了很 多 基 因 多 态 性 测 定 中

5、 的 技 术 瓶 颈 ， 得 了 较 解 获 为满 意 的 结 果 ， 得 了 较 好 的 经 济 效 益 和 社 会 效 益。 取 （） 经济效益 ： 单 次 成本 下降 约 ； 多重 测定使成本下 降， 宜于 中通量 基因 多态性 检测 ， 适 每人 每 天 可 检 测 个 位 点 。 （ ） 会 效 益 ： 可 用 于 极 少 社 样品量的 检测 ； 检 测 成 本 下 降有 利 于临 床 推 广使 用 ； ¨ 灵 活的检测平 台适用性 强 ； 减 少了氯仿等化学试 剂对 环境 的污染 。普通实验室 大都采用传 统方法检测 ， 所需检 测样本量大 ， 不易于临床推广使用 。 参

6、 考 文 献 ， ， ， ： ） （ ： ， （ ： ） （ ） （ ） （ ） ； ： ： ； ： （ ） ； （ ） （ ） （ ） ： 结 束语 （ ） ） ， ，（ ： 本课题组采用 的基因多态性检测平 台具有以下优点 ： （） 扩增 模板可采 用全血 或干血 ， 可采用 纯 的 也 一 ， ， ， ， ， ： （ ） 基 因组 。有文献 报道用酶解高温裂解处 理全血 ， 稳 但 定性和重复性不好 。本课题组 基于蛋 白质与 相互 作 用的特性 ， 通过改变溶液 的酸碱度来抑 制血 液 中的蛋 白质 对 基 因组 的 扩 增 影 响 ， 时 通 过 添 加 增 强 剂 防 同 ， ，

7、， ： ， ， （ ） 止全血 中的成分对聚合 酶延伸反应的抑制作用 。 （） 扩增试剂成本低 ， 几乎与普通 扩增试剂一致。 （） 直接扩增反应 的灵敏度 高。只需 全 血 或直 径 的 干 滤 纸血 ， 普 通 基 因组 提 取 试 剂 而 ， ， ， ， （ ） ， ： 第 期 ： ， ， （ ） 周 国华 等 ： 成 本 基 因 多态 性 检 测 方 法 及 其 应 用 研 究 低 ， ） ， （ ： ， ， ： （ ） 汪 维 鹏 （ ） 周 国华 （ 多 重 等 位 基 因 特 异 ， ） 性 扩 增 微 流 控 芯 片 电 泳 法 同 时 测 定 多 个 单 核 苷 酸 多 态

8、， ， ， ， （ ） ， ： 性位点 遗 传 （ ， （ ： ） ， ） ， ， ， ， ， ， （ ） ， ： ， ， ， （ ） （ ） ， ， （ ）： ， ， （ ） ， ， （ ）： ， ， ） （ ： ， ， ， 欢 （ ） 武海萍 （ ） 等全 ， ， （ ） ， ： 莹 （ ） 黄 ， 血 直 接 多 重 法 快 速 检 测 染 色 体 微 缺 失 中华 医 学 遗传 学 杂 志 （ ） （ ） ， ， ： ， ， 宋 沁 馨 （ ， ） 张心 悦 （ ） ， 莹 （ ） 等 ， 法 鉴别 人 参 和 西 洋 参 及 因 上 单 核 苷 基 酸 多 态 性 位 点 中 国 药

9、 科 大 学 学 报 （ ） ， ） ， （ ： ， ， ） （ ： 宋 沁馨 （ ， ） 冯 芳 （ ） 周 国 华 （ ， ） 测定结合芯片电泳法快速鉴别人参和西洋 参 药物 分析 杂 志 （ ） ，（ ） ， ： 汪 维 鹏 （ ） 倪 坤 仪 （ ） 周 国华 （ ） ， ， 一 种 基 于适 配 器 连 接介 导 的 等 位 基 因 特 异 性 扩 增 法 测 定 多 重 遗 传 （ ， （ ） ） ， ： ， ， ， 莹 （ ）， 古卓 良（ ， ） 张晓丹 （ ） 等四 ， 引物 扩增 反 应 的 单 管 快 速 测 定 法 中 国 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 报 （

10、 ） ， ， （ ） ： ， ， ： （ ） 莹 （ ） 张 晓 丹 （ ） 马 ， ， 涛 （ ， 五 ） 等 ， 】 ， ， 引物单管聚合酶链反应 （ 扩增法快速测定人 ） 等位基 因的类 型 分析 化 学 （ ） ， ， （ ） ： ， ， ： （ ） 宋沁馨 （ ）， 李正平 （ ， 国华 （ ， ）周 ） 等 用 芯 片 电泳 快 速 检 测 人 基 因外 显 子 上 的 突 变 点 中国 药科 大 学 学 报 （ ， ） ） ，（ ： 汪 维 鹏 （ ） 倪 坤 仪 （ ） 周 国华 （ 连 ， ， ） 接 反 应 介 导 的 等 位 基 因 特 异 性 扩 增 一 流 控 芯 片 电 泳 法 同 时 微 检 测 多 个