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文档简介

1、第一节基因工程的工具酶和载体【学习目标】1. 能够描述基因工程的概念和目的。2. 能说出基因工程的三种基本工具及各工具的的特点和用途。【目标达成】活动一：基因工程的工具（一） “分子手术刀” 一一 （自主学习）1、 来源：主要从 中分离。2、 功能：能够识别双链 DNA分子的特种序列，并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开。3、 结果：切割后的末端有 和。4、 特点： ，即识别特点脱氧核苷酸序列，在特点位点上切割DNA分子。（识别序列特点：）【练一练】写出下表中四种限制酶切割后的结果，并分析限制酶所识别的DNA序列有什么特点？限制酶Kfsg I 相BamH INjbig I 茯Sina I

2、爾切卩 f立点心-GGATCC*-CCTAGTG-* GATC-C1AGT CCCGGG一 GGGTCCC4（二） “分子搬运车” 一一1、 作用： 作为工具，将目的基因转移到受体细胞中。在受体细胞中复制，从而使目的基因也大量 。2、条件：（以质粒为例） 含有，能在宿主细胞内自我复制并稳定地保存。 有一个或多个 ，可使目的基因插入到载体上。 具有，如四环素抗性基因、 氨苄青霉素抗性基因或某些生化表型等，用于鉴定和选择重组 DNA分子。3、 种类： （最常用）、。（三）“分子针线” _ 1、 作用：将DNA双链片段缝合起来，恢复被 切开的两个核苷酸之间的，拼接成新的DNA分子。2、 E- COl

3、i DNA连接酶，只能连接 ，不能连接 。T4 DNA连接酶，既可以连接 ，又可以连接 。活动二：构建重组质粒（小组合作）请利用所示限制酶对目的基因、质粒分别进行切割，并构建重组质粒，各小组展示成果。活动三：对基因工程概念的理解【目标检测】1、 限制酶切割 DNA时（）A. 专一识别特定的核苷酸序列B.C.任意切割，没有特定的核苷酸序列D.2、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（A. 能复制B .有多个限制酶切点切断的是碱基对之间的氢键识别多种核苷酸序列，但切口只有一个）C 具有标记基因D 它是环状 DNA基因工程的别名操作环境操作对象操作水平原理结果基本过程3、 下面是3种限制性核酸内切酶对

4、 DNA分子的识别序列和剪切位点图，错误的是（）限制酶 1 : - J GATC-;限制酶 2： -CCGCJ GG-;限制酶 3： -G J GATCC-A. 不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性B. 限制酶2和3识别的序列都包含 6个碱基对 C.限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同C. 能够识别和切割 RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶24、 限制酶 BamH和Bgl I识别序列及切割位点依次为GJ GATC（和AJ GATCT用BamH切割目的基因，Bgl I切割质粒，并连接得到重组质粒相关叙述正确的是（）A. 酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素B. 目的基因经BamHI切割后

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