药物分析--吩噻嗪类含量测定

1、精选课件第十一章第十一章 吩噻嗪类抗精神病药吩噻嗪类抗精神病药物的分析物的分析第四节第四节 含含 量量 测测 定定精选课件 性质性质：弱碱性、紫外光吸收特性、金属离子配合呈色 测定方法测定方法：酸碱滴定法、分光光度法、高效液相色谱法和液相色谱-质谱联用技术精选课件一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法( (一一) )非水溶液滴定法非水溶液滴定法结构结构：母核上：母核上1010位取代基的位取代基的烃胺烃胺-NR2-NR2、哌嗪基及哌、哌嗪基及哌啶基啶基具有具有碱性碱性 1. HClO1. HClO4 4非水溶液滴定法基本原理非水溶液滴定法基本原理当当HAHA酸性较强酸性较强时，反应不能定量时，反应不能定量

2、完成，必须完成，必须除去或降低除去或降低HAHA的酸性的酸性，使反应顺利地完成。使反应顺利地完成。BH+ A-+HClO4BH+ ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。精选课件10ml30ml若供试品为若供试品为氢卤酸氢卤酸盐盐再加再加5%5%醋酸汞醋酸汞的的冰醋酸液冰醋酸液3ml5ml供供试试品品+ +冰冰醋醋酸酸结结果果HClO4滴定滴定空白试空白试验校正验校正指示剂碱性溶液碱性溶液pKpKb b1010，冰醋，冰醋酸中滴定突跃不明显，酸中滴定突跃不明显，需加入需加入醋酐醋酐，使碱性增，使碱

3、性增强，突跃更明显强，突跃更明显精选课件 2. 2.一般方法一般方法 供试品：以消耗标准液体积计算供试品：以消耗标准液体积计算 溶剂：溶剂： HAc，一般用量，一般用量1030ml 滴定剂：滴定剂：0.1mol/L HClO4 无水无水HAc溶液溶液 指示剂：电位法指示剂：电位法精选课件 HClO4在冰醋酸溶液中，具强氧化性，可氧化吩噻在冰醋酸溶液中，具强氧化性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物，干扰指示剂终点的嗪类药物产生红色的氧化物，干扰指示剂终点的观察。排除方法：观察。排除方法： （1）改用中性溶剂改用中性溶剂（2）加抗坏血酸加抗坏血酸（3）电位法指示终点电位法指示终点 精选课件 4

4、4、适用范围、适用范围 主要主要用于用于K Kb b1010-8-8的有机碱盐的含量测定的有机碱盐的含量测定。对碱性较。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使点指示的方法，可使pKpKb b为为8 81313的弱碱性药物采用本的弱碱性药物采用本法滴定。法滴定。 K Kb b为为1010-8-81010-10-10时，宜选时，宜选冰醋酸冰醋酸作为溶剂；作为溶剂；K Kb b为为1010-10-101010-12-12时，宜选时，宜选冰醋酸与醋酐冰醋酸与醋酐的混合溶的混合溶液；液； K Kb b1010-12-12时，

5、应用时，应用醋酐醋酐作为溶剂。作为溶剂。 冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大。增大。精选课件【示例【示例11-3111-31】盐酸氯丙嗪测定】盐酸氯丙嗪测定ChPChP（20102010） 取本品约取本品约0.2g ，精密称定，加冰醋酸，精密称定，加冰醋酸10ml与醋与醋酐酐30ml，溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴，溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每验校正。每1ml高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于相当于35.53mg 的的C1

6、7H19N2ClS.HCl。 精选课件 提取后提取后HClO4非水滴定法：非水滴定法：取本品约取本品约0.15g置置分液漏斗分液漏斗,加氨水碱化加氨水碱化乙醚提取乙醚提取6次，合并次，合并水浴加热挥干乙醚水浴加热挥干乙醚残渣残渣丙酮溶解丙酮溶解HClO4非水滴定法非水滴定法溴甲酚绿溴甲酚绿-结晶紫指示液结晶紫指示液紫红色紫红色蓝紫色蓝紫色【示例【示例11-3211-32】盐酸氯丙嗪注射液测定】盐酸氯丙嗪注射液测定JPJP（1515）每每1ml高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.05mol/L)相当于相当于17.77mg 的的C17H19N2ClS.HCl。精选课件（二）乙醇水溶液的氢氧化钠滴定法（二

7、）乙醇水溶液的氢氧化钠滴定法 本类药物的盐酸盐的水溶液显本类药物的盐酸盐的水溶液显酸性酸性，在，在乙醇乙醇- -水溶液水溶液中，可用中，可用NaOHNaOH滴定剂滴定剂滴定，电位法指示滴滴定，电位法指示滴定终点。定终点。20NaOHHClNaClH2.0B HClNaOHBNaClH V1 V2 等当点等当点突跃体积突跃体积滴定体积滴定体积V= V1-V2 精选课件二、分光光度法二、分光光度法（一）直接分光光度法（一）直接分光光度法在在254nm254nm的波长处，的波长处，C C1717H H1919ClNClN2 2S.HClS.HCl的吸收系数的吸收系数（ ）为）为915915计算。计算

8、。1%1cmE精选课件（二）提取后分光光度法（二）提取后分光光度法- -排除辅料干扰排除辅料干扰 【示例【示例11-3611-36】盐酸氯丙嗪口服液】盐酸氯丙嗪口服液USP32-NF27USP32-NF27对照品：对照品：50 同法测定同法测定As。/g ml246H SOmaxV510 =298A 氨水碱化三氯甲烷提取 次蒸气浴空气流蒸干溶解定容量取盐酸氯丙嗪适量 ml氯丙嗪合并三氯甲烷提取液浓缩提取液至 ml硫酸氯丙嗪测定 。精选课件A(/)500VAsxscc mg ml 萃取萃取除去抗氧剂的干扰除去抗氧剂的干扰精选课件（三）提取后双波长分光光度法（三）提取后双波长分光光度法 提取后分光

9、光度法能够除去一些干扰物提取后分光光度法能够除去一些干扰物质，但却质，但却不能不能除去吩噻嗪类药物的除去吩噻嗪类药物的氧化物氧化物。提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定提取时，氧化物随游离碱进入有机相；测定时，因结构相近，时，因结构相近，氧化物氧化物在吩噻嗪类药物的在吩噻嗪类药物的测定波长处产生吸收测定波长处产生吸收，干扰测定。，干扰测定。 精选课件 定量依据定量依据 样品在二波长下吸收度差值（ A A）：）： 121122121212121%1%1cm()1cm()()()()=(EE) a ba bababaaaabbaAAAAAAAAAC lC lAAAC即，吸收度差值（即，吸收度差值

10、（ A A）仅与待测组分的浓度有关，）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。 精选课件【示例【示例11-3711-37】 盐酸氯丙嗪注射液的含量测定盐酸氯丙嗪注射液的含量测定 （ USP32-NF27USP32-NF27）测定波长：测定波长：254nm（最大吸收波长）最大吸收波长）277nm（等吸收波长）（等吸收波长） 空白对照液：空白对照液：0.1mol/L盐酸溶液盐酸溶液 计算公式：计算公式：25427725427712.5 () / ()USCAAV AA式中：式中：C(mg/ml)为对照品溶液的浓度；为对照品溶液的浓度；

11、 V(ml)为所取供试品的体积；为所取供试品的体积； 括号内的公式分别为供试品溶液括号内的公式分别为供试品溶液(U)和对照和对照品溶液品溶液(S)在下标所示波长处的吸光度差。在下标所示波长处的吸光度差。精选课件250D=500=125001012121%2541cm(254)254( )1%1cm(254)277(s)1%1cm(277)1%1%1cm()1cm()1%1%1cm()1cm()254277254277254277A=EAE=AE=(EE)(EE)AA()(AA)(AA) ssssxxxsssxxssC lCCAC lACACCCC254277254277(AA)12500/=V

12、 1000(AA)xssmg mlC含量（）精选课件（五）钯离子比色法（五）钯离子比色法 吩噻嗪类药物在吩噻嗪类药物在pH 2pH 20.10.1的缓冲溶液中，与的缓冲溶液中，与钯离子钯离子(Pd(Pd2+2+) )形成红色配合物，在形成红色配合物，在500nm500nm波长附近波长附近具有最大吸收具有最大吸收 由于由于钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色钯离子仅与未被氧化的硫元素配合显色，消除了消除了药物中药物中氧化物氧化物对测定对测定的干扰的干扰。 比色液的浓度比色液的浓度：50 250 g/mL 显色稳定性：显色稳定性：1010分钟后可稳定约分钟后可稳定约2 2小时小时 精选课件【示例【示

13、例11-3811-38】盐酸异丙嗪注射液】盐酸异丙嗪注射液USP32-NF27USP32-NF27精密称取适量置精密称取适量置分液漏斗分液漏斗依次加氯化钾依次加氯化钾氢氧化钠碱化氢氧化钠碱化甲醇甲醇合并正庚合并正庚烷提取液烷提取液正庚烷提正庚烷提取取3次次盐酸酸化盐酸酸化合并盐酸提取液合并盐酸提取液并定容至并定容至50ml对照品对照品0.124mg/ml称取标准品和对照品溶液各称取标准品和对照品溶液各2ml +PdCl2显色，显色，测测A470A/=50Axssmg mlC含量（）精选课件三、高效液相色谱法三、高效液相色谱法（一）反相高效液相色谱法（一）反相高效液相色谱法(RP-HPLC)固定

14、相：固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（十八烷基硅烷键合硅胶（ODSODS）流动相：流动相：水甲醇或水乙腈系统，极性较强水甲醇或水乙腈系统，极性较强极性较强极性较强的组分在分离时的组分在分离时先先流出柱子，流出柱子，极性较极性较弱弱的组分的组分后后流出柱子，适合于共存组分极性差异较流出柱子，适合于共存组分极性差异较大样品的分析。杂环类药物分析一般大样品的分析。杂环类药物分析一般在流动相中加在流动相中加入含氮碱性竞争试剂入含氮碱性竞争试剂(扫尾剂扫尾剂: :醋酸铵、三乙胺、二乙醋酸铵、三乙胺、二乙胺、乙腈胺、乙腈等等), ,以以抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作抑制碱性药物与未硅烷化的硅醇基作用用。精选

15、课件（二）离子对高效液相色谱法（二）离子对高效液相色谱法(Ion-RP-HPLC) 常用的离子对试剂：常用的离子对试剂：烷基磺酸盐阴离子对试剂，烷基磺酸盐阴离子对试剂，如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。如戊烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、十二烷磺酸钠等。 影响离子对形成的条件影响离子对形成的条件 反离子的性质与浓度反离子的性质与浓度流动相的组成流动相的组成pHpH离子强度等离子强度等影响待测组分的保留影响待测组分的保留 pH3.5BH+C7H15SO2O-BH+C7H15SO2O-精选课件四、液相色谱四、液相色谱- -质谱联用技术质谱联用技术 液相色谱液相色谱- -质谱联用技术集质谱联用技术集HPLCHPLC的高分离效能和的高分离效能和MSMS的高专属性及高灵敏度于一体，已经成为目前测的高专属性及高灵敏度于一体，已经成为目前测定复杂生物样本中微量药物的首选方法，同时也是定复杂生物样本中微量药物的首选方法，同时也是进行药物及有关物质定性分析的常用方法。进行药物及有关物质定性分析的常用方法。精选课件色谱图：色谱图：图图11-