生物选修一新专题二课题二

1、1、统计细菌数目常用的方法、统计细菌数目常用的方法?2、通常选择菌落数为多少的平板进行计数、通常选择菌落数为多少的平板进行计数? 统计几个平板统计几个平板?3、稀释涂布平板法计算土样菌数的公式、稀释涂布平板法计算土样菌数的公式? 各母代表的含义各母代表的含义?4、实验设置对照的主要目的、实验设置对照的主要目的?5、鉴定选出的是分解尿素的细菌的方法？、鉴定选出的是分解尿素的细菌的方法？ 原理是什么？原理是什么？背诵听写背诵听写一、基础知识一、基础知识（阅读（阅读P27-28页第三段，讨论页第三段，讨论回答以下问题）回答以下问题）1 1、纤维素在生物圈的分布状况？、纤维素在生物圈的分布状况？2 2

2、、纤维素酶的组成及作用？、纤维素酶的组成及作用？3 3、纤维素分解菌的筛选方法？、纤维素分解菌的筛选方法？4 4、纤维素分解菌的筛选原理？、纤维素分解菌的筛选原理？1、纤维素在生物圈的、纤维素在生物圈的分布分布状况？状况？2、纤维素酶的组成纤维素酶的组成及作用？及作用？纤维素是纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质地球上含量最丰富的多糖类物质。植物。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶，一般认为它至少包括三，一般认为它至少包括

3、三种组分，即种组分，即C1酶酶、CX酶酶和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶，前两种酶，前两种酶使纤维素分解成使纤维素分解成纤维二糖纤维二糖，第三种酶将纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成分解成葡萄糖葡萄糖。纤维素和纤维素酶纤维素和纤维素酶纤维素分解菌的筛选纤维素分解菌的筛选1、纤维素分解菌的、纤维素分解菌的筛选方法筛选方法:2、纤维素分解菌的筛选、纤维素分解菌的筛选原理原理:刚果红染色法刚果红染色法：这种方法能够通过颜色反应直：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选接对微生物进行筛选 刚果红刚果红是一种染料，它可以是一种染料，它可以与纤维素形成红色与纤维素形成红色复合物复合物，但并不和纤维二糖、葡萄

4、糖发生这种反应但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红当纤维素被纤维素酶分解后刚果红纤维素的复合纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的中心的透明圈透明圈 。这样我们可以。这样我们可以通过是否产生透明通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌圈来筛选纤维素分解菌 1、说出分离分解纤维素的微生物实验流程？、说出分离分解纤维素的微生物实验流程？ 2、为什么要在纤维素丰富的环境中寻找纤维素分、为什么要在纤维素丰富的环境中寻找纤维素分解菌？滤纸埋在土壤中有什么作用？解菌？滤纸埋在土壤中有什么作用？ 3、选择培养的目

5、的？为什么？该实验的选择培养、选择培养的目的？为什么？该实验的选择培养基为什么有选择作用？按物理性质属哪种培养基？基为什么有选择作用？按物理性质属哪种培养基？ 4、鉴定该细菌用的染料是？常用的刚果红染色法、鉴定该细菌用的染料是？常用的刚果红染色法有几种？分别是？试评价其优缺点有几种？分别是？试评价其优缺点 5、如何进一步确定得到的是纤维素分解菌？纤维、如何进一步确定得到的是纤维素分解菌？纤维素酶发酵的方法有？纤维素酶的测定方法？素酶发酵的方法有？纤维素酶的测定方法？二、实验设计及操作二、实验设计及操作（阅读（阅读P28-30页，页，讨论回答）讨论回答）实验操作：实验操作：土壤取样土壤取样选择培

6、养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到将样品涂布到鉴别纤维鉴别纤维素分解菌的培养基上素分解菌的培养基上挑选挑选产生透明产生透明圈的圈的菌落菌落土壤取样土壤取样取样的环境取样的环境？作出这种选择的？作出这种选择的理由理由是什么？是什么？ 选择纤维素丰富的环境选择纤维素丰富的环境，如树林中多，如树林中多年落叶形成的年落叶形成的腐殖土腐殖土，多年积累的枯枝败，多年积累的枯枝败叶等等。叶等等。 生物与环境的相适应关系生物与环境的相适应关系，在富含纤，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几

7、率要高于普通环境几率要高于普通环境选择培养选择培养1、选择培养的目的：、选择培养的目的：增加纤维素分解菌的增加纤维素分解菌的浓度浓度，以确保能够从样品中分离到，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物所需要的微生物2、选择培养基：选择培养基： 参照课本参照课本29页旁栏中的比例配置，回答下列问题页旁栏中的比例配置，回答下列问题是液体培养基，原因是配方中无凝固剂是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的解纤维素的 微生物可以大量繁殖微生物可以大量繁殖用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照a、

8、旁栏中是液体培养基还是固体培养基？为什么？、旁栏中是液体培养基还是固体培养基？为什么？b、这个培养基对微生物是否具有选择作用？、这个培养基对微生物是否具有选择作用？ 如果具有，是如何进行选择的？如果具有，是如何进行选择的？c、你能否设计一个对照实验，说明、你能否设计一个对照实验，说明选择培养的作用选择培养的作用？为什么选择培养能够为什么选择培养能够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？ 在选择培养的条件下，可以使那些在选择培养的条件下，可以使那些能够适能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被那些不适应这种营养条件

9、的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到抑制，因此可以起到“浓缩浓缩”的作用的作用刚果红染色法：刚果红染色法：方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应红进行颜色反应方法二方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红思考：思考：这两种方法各有哪些优点与不足？这两种方法各有哪些优点与不足？ 方法一方法一 缺点会使缺点会使菌落之间发生混杂菌落之间发生混杂；优点是显示；优点是显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用 方法二方法二 优点是优点是操作简便操作简便，不存在菌落混杂问题，不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有

10、淀粉类物质，可以缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二；缺点二有些微有些微生物具有降解色素的能力生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分不易区分课题延伸课题延伸 本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，但是这只是分离纯化的第一步。筛选，但是这只是分离纯化的第一步。为确定得为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素到的是纤维素分解菌，还

11、需要进行发酵产纤维素酶的实验酶的实验，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等酶分解滤纸等纤维素纤维素后所后所产生的葡萄糖进行定量产生的葡萄糖进行定量的测定。的测定。小结1 1、纤维素的基本单位和结构？、纤维素的基本单位和结构？2 2、纤维素酶的组成及作用？、纤维素酶的组成及作用？3 3、纤维素分解菌的筛选方法？、纤维素分解菌的筛选方法？4 4、纤维素分解菌的筛选原理？、纤维素分解菌的筛选原理？5 5、选择培养的目的？为什么？该实验的选择培养基、选择培养的目的？为什么？该实验的选择培养基 为什么有选择作用？按物理性质属哪种培养基？为什么有选择作用？按物理性

12、质属哪种培养基？6 6、鉴别培养基中鉴定细菌用的染料是？常用的刚果、鉴别培养基中鉴定细菌用的染料是？常用的刚果红染色法有几种？分别是？试评价其优缺点红染色法有几种？分别是？试评价其优缺点7 7、如何进一步确定得到的是纤维素分解菌？纤维素、如何进一步确定得到的是纤维素分解菌？纤维素酶发酵的方法有？纤维素酶的测定方法？酶发酵的方法有？纤维素酶的测定方法？植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：（1 1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3 3种种组分组成的复合酶，其中的葡

13、萄糖苷酶可将组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成分解成 （2 2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR)CR)时，时，CRCR可与纤维素可与纤维素形成形成 色复合物。用含有色复合物。用含有CRCR的该种培养基培养纤维素分解菌的该种培养基培养纤维素分解菌对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 （3 3）为从富含纤维素的上壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，）为从富含纤维素的上壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表) )：注：注：“+ +”表示有，表示有，“- -”表示无。表示无。据表判断，培养基甲据表