草珊瑚总黄酮提取及含量检测

1、草珊瑚总黄酮提取及含量检测【摘要】 目的 研究草珊瑚总黄酮的提取工艺。方法 以草珊瑚为原料，用乙醇为溶剂，利用超声波辅助提取和水浴法提取草珊瑚总黄酮，利用L9（33 ）正交实验方法优化总黄酮提取工艺，采用单因素实验，测定了乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度等单因素实验，考察总黄酮提取率与各因素的关系。根据单因素实验得出的显著条件进行正交设计，确定最佳工艺条件。结果 超声波法的最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比115、提取时间45 min，根据确定的最佳工艺条件，按实验中的测定方法测得提取的总黄酮含量为69.25 mg/g。水浴法的最佳工艺条件为乙醇浓度50%、料液比120、提取温度80 、

2、提取时间2 h，按实验中的测定方法测得提取的总黄酮含量49.60 mg/g。结论 超声波提取不仅在时间上比水浴提取大大缩短，而且实验过程易于控制，黄酮提取率也比水浴提取提高28.38%。 【关键词】 草珊瑚；总黄酮；提取工艺；含量 Abstract Objective To optimize the extraction process of the flavonoids from sarcandra glaber.Methods Used sarcandra glaber as raw materials，took ethanol extraction methods and used ul

3、trasonic water bath to extract the flavonoids，then used L9（33） orthogonal experiment to optimize the extraction process of flavonoids.One of the experiments is the single factor experiment.According to the given conditions and measured flavones，what we will do is to have single factor experiments ab

4、out different concentrations of ethanol，feed ratio，extraction time and temperature.According to the remarkable conditions from single factor experiments，we will have an orthogonal design and then select the best conditions.Results The optimum conditions of ultrasonic methods are for the concentratio

5、n of 50 percent ethanol，feed rate 115，the extracted time 45 minutes，the flavones in 69.25 mg/g.The optimum conditions of water bath for ethanol methods are for concentration of 50 percent，feed rate 120，the extracted temperature 80 and the flavones in 49.60 mg/g.Conclusion The time used in ultrasonic

6、 extraction is greatly shorter than that of water bath and the experiment is easier to control than that of water bath，and the extraction rate of flavonoids also raise 28.38% than that of water bath. Key words sarcandra glaber；flavonoids；extraction process；content 随着草珊瑚在医药、兽药、保健食品及保健用品领域中的应用越来越广泛，对其

7、有效成分的提取分离显得越来越重要。黄酮类化合物是草珊瑚中含量最多、最主要的活性成分之一。目前，对草珊瑚总黄酮的提取分离工艺技术研究尚未见有详细报道，本学位论文拟对草珊瑚总黄酮提取分离工艺技术进行较系统的研究并筛选最佳新技术新工艺。采用正交实验方法考察沸水提取法及乙醇提取法对草珊瑚总黄酮提取效果的影响；采用中药高新工程技术大孔吸附树脂对草珊瑚总黄酮进行分离纯化研究，以确定草珊瑚总黄酮最佳提取分离工艺条件及方法。以确定的草珊瑚总黄酮最佳提取工艺对不同季节采收的草珊瑚中总黄酮含量的动态变化，草珊瑚自然存放时间不同对总黄酮含量的影响，贵州草珊瑚根、茎、叶中总黄酮的不同含量进行动态变化研究，以确 定草珊

8、瑚原料的最佳利用时机。从而为生产中最有效的开发利用草珊瑚，获得草珊瑚总黄酮的最大提取率，发挥草珊瑚的最大经济效益提供实验依据及指导，以达到提升草珊瑚药、食用产品的质量档次，使其更具三效（高效、速效、长效），三小（剂量小、毒性小、不良反应小），三便（便于贮藏，便于携带，便于服用）的特点，使其产品能走出国门、出口创汇，有着重要的经济和社会意义1。 1 材料与方法 1.1 实验材料 原料：草珊瑚购于贵阳花果园药材市场；NaNO2（固体）（重庆北碚精细化工厂）；95%的乙醇溶液（分析纯） （遵义国营化学试剂厂）；Al（NO3）3（固体）（汇源化工有限公司）；NaOH（固体）（天津市化学试剂六厂三分厂）

9、。 1.2 实验器材 HH-S2s型恒温水浴锅（金坛市环保仪器厂）；UV2755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；抽滤机（金宇机械有限公司）；JY88（96）-IIN型数控超声波细胞粉碎机（宁波新芝生物科技有限公司）；FA1004型电子分析天平（上海天平仪器厂）。 1.3 实验方法 超声波提取过程：（1）称取草珊瑚5 g分别装入准备好了的烧杯中，在烧杯上填上编号，并记录好数据。（2）用95%乙醇分别配制50%、60%、70%、80%的乙醇，按正交实验设计搭配装入对应号的锥形瓶中。（3）根据以上配置好的原料，放入超声波仪器中进行提取。（4）将以上提取物过滤，将滤液按照实验方法测出吸光度，

10、并记录好数据。 水浴提取的实验过程为：（1）称取草珊瑚5 g分别装入准备好了的锥形瓶中，在锥形瓶上填上编号，并记录好数据；（2）用95%乙醇分别配制50%、60%、70%、80%的乙醇，按正交实验设计搭配装入对应号的锥形瓶中，并用保鲜膜密封好；（3）把锥形瓶放入已准备好的一定温度的水浴中加热，2 h后取出抽滤液体转入干净的烧杯中，并用保鲜膜密封好；（4）将以上的提取物过滤，将滤液按照实验方法测出吸光度，并记录好数据。 2 实验结果与讨论 2.1 标准曲线的制备 见图1。从芦丁对照储备液中分别吸取1 ml，放入1号、2号容量瓶中（25 ml），各加60 %乙醇至5 ml，加5%NaNO2溶液1.0 ml，摇匀放置6 min，再加10%Al（NO3）3 溶液0.5 ml（空白对照不加），摇匀再放置6 min，加4%NaOH溶液10 ml，摇匀放置15 min，从400600 nm处测吸光值：可得出芦丁在500 nm处存在最大吸收峰。 回归方程：A=0.0095C+0.001