糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒说明书

1、糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究利用标本：体液糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒实验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酹标板内进行检测。先将BFGF和生物索标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再通过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B.和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒自备材料1 .蒸储水。2 .加样滞：5uK10ul、50ul、lO

2、Ouls200、500uKlOOOul,3 .振荡谓及磁力搅拌器等。平安性1 .幸免直接接触终止液和底物A、8=一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2 .实验中不要吃喝、抽烟或利用化妆品。3 .不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒操作注意事项1 .试剂应按标签贮存，利用前恢梵到室温。稀稀事后的标准品应抛弃，不可保留。2 .实验中不用的板条应当即放回包装袋中，密封保留，以避免变质。3 .不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前利用。4 .利用一次性的吸头以避免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，幸免利用带金属部份的加样器。5 .利用干净的塑

3、料容器配置洗涤液。利用前充分混匀试剂盒里的各类成份及样品。6 .洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入旃标反映孔中吸水。7 .底物A应挥发，幸免长时刻打开盖子。底物B对光灵敏，幸免长时刻暴露了光卜；幸免用手接触，有毒。实验完成后应当即读取0D值。8 .加入试剂的顺序应一致，以保证所有反映板孔温育的时刻一样。9 .依照中标明的时刻、加液的量及顺序进行温育操作。糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒样品搜集、处置及保留方式一、血清操作进程中幸免任何细胞刺激。利用不含热原和内毒素的试管。搜集血液后，1000Xg离心10分钟将血清和红细胞迅速警惕地分离。二、血浆EDTA、柠椽酸盐、肝素血浆可用于

4、检测。lOOOXg离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液-lOOOXg离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保留若是样品不当即利用，应将其分成小部份-700C保留，幸免反复冷冻。尽可能的不要利用溶血或高血脂血。若是血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37或更高的温度加热解冻。应在室温卜解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的预备标准品：标准品的系列稀粒应在实验时预备，不能贮存。稀粒前将标准品振荡混匀。10 洗涤缓冲液(50X)的稀粹：蒸储水50倍稀释。糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒操作步骤1 .利用前，将所有或剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以避免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误

5、差。2 .依照待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，每一个标准品和空白孔建议做熨孔。每一个样品依照白己的数量来定，能利用复孔的尽可能做复孔。3 .加入稀释好后的标准品50ul于反映孔、加入待测样品50ulF反映孔内。当即加入50ul的生物索标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37X:温育1小时。4 .甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。若是用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5 .每孔加入80ul的亲和链酶索-HRP,轻轻振荡混匀，37c温育30分钟。6 .甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重且此操作3次。若

6、是用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7 .每孔加入底物A、B各50uL轻轻振荡混匀，37温育10分钟。幸免光照。8 .掏出附标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应当即测定结果。9 .在450nm波优势测定各孔的0D值。局限10 标准品以上的结果为非线性的，依照此标准曲线无法取得精准的结果。糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒性能1 .灵敏度：最小的检测浓度小丁F号标准品。稀择度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2 .特异性：不与其它细胞因子反映。3 .重复性：板内、板间变异系数均小丁10乐糖抗原50(CA50)ELISA试剂盒结果判定与分析一、仪器值：于波长450n

7、m的酷标仪上读取各孔的OD值二、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的BFGF含量可依照其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-S00pg/ml4、灵敏度：1.0pg/mlVlll-Ag人凝血因子VU相关抗原规格：48T/96TFill人凝血因子IH规格：48T/96TFII人凝血因子H规格：48T/96TF1+2人凝血酹原片段F1+2规格：48T/96TT-TM人凝血酹血栓调节蛋白复合物规格：48T/96TTR人凝血前受体规格：48T/96TTAT人凝血酹抗凝血酷豆合物规格：48"96TGelsolin人凝溶胶蛋白规格：48T/96TCLU人凝聚素规格：48T/96Tgelson人凝胶原蛋白规格：48T/96TUFC人尿游离皮质醇规格：48T/96TALB人尿微量白蛋白规格：48T/96TUr