健脑胶囊防治泼尼松性大鼠神经系统损伤的作用研究

1、健脑胶囊防治泼尼松性大鼠神经系统损伤的作用研究 08-05-30 17:07:00 编辑：studa20 作者：邹丽宜， 吴铁， 崔燎， 许碧莲， 张新乐【关键词】 泼尼松；,糖皮质激素；,神经系统；,健脑胶囊；,大鼠摘要：目的探讨长期大量应用泼尼松对大鼠中枢神经系统的毒性作用，同时观察中药复方健脑胶囊对泼尼松性神经系统损害的防治作用。方法4月龄SD雄性大鼠50只随机分成5组，除正常组外其余4组予泼尼松2.7 mgkg1灌胃，1次/d，连续12周。健脑胶囊治疗组同时予健脑胶囊3种剂量提取液 (2.5， 5.0， 10.0 gkg-1d-1)予治疗。实验中测试大鼠的应激记忆力，测定脑匀浆中MAO

2、，SOD，AchE、MDA的含量以及对大脑进行组织学检查。结果单用泼尼松大鼠的三臂电迷宫正确率、脑匀浆中的SOD含量显著下降而MAO含量上升（P0.01）；脑神经元发生水肿变性，皮质厚度变薄，皮层和海马结构紊乱，而健脑胶囊可有效保护神经元及升高SOD的含量及降低MAO的含量以及提高迷宫正确率（P0.05）。结论 泼尼松长期应用可造成大鼠中枢神经系统功能减退，健脑胶囊对其有较好的对抗作用，但量效关系不明显。关键词：泼尼松； 糖皮质激素； 神经系统； 健脑胶囊； 大鼠The Preventive Effects of Jiannao Capsule on Cerebra Damage Induce

3、d by Prednisone in RatsAbstract：ObjectiveTo study the cerebral damage induced by long-term administration of prednisone, and investigate the prevention effects of Jiannao capsule on rats. MethodsFifty fourmonth SD male rats were randomly divided into 5 groups with 10 rats per group. Group 1 was trea

4、ted orally with vehicle as control (NS group), other groups were administered oraly with prednisone (2.7 mgkg-1d-1) first, and then with vehicle (PD group), or water extract of Jiannao capsule with three different doses (2.5, 5.0, 10.0gkg-1d-1), once a day for 12 weeks. Then the 10% cerebrums inhomo

5、genate was used to test the content of monoamine oxidase (MAO), superoxide dismutase (SOD) and acetylcholinesterase (AchE). The right half of cerebrums was used for testing the histological observation.ResultsBiochemical parameters of cerebrums plasm showed that the concentration of MAO increased, S

6、OD and AchE decreased significantly in PD group. Moreover, histopathology showed that the structure of cerebrum cortex became thinner and hippocampi was in disorder. Dropsical and necrotic nerve cells were found. The water extract of Jiannao could prevent the changes of nerve centre in prednisone ra

7、ts. ConclusionThe treatment of Jiannao Capsule can prevent the damage of nerve centre which caused by prednisone.Key words：Prednisone; Glucocorticoid ; Cerebra damage; Jiannao capsule; Rats 糖皮质激素是有肾上腺皮质分泌的一种具有神经活性的甾体激素，其产生直接受到下丘脑垂体肾上腺轴的影响，可对神经系统的发育和功能有深刻的影响1。研究表明，超生理剂量的糖皮质激长期应用不但损害外周的免疫系统和心血管系统等，还会对

8、中枢神经系统尤其是对海马神经元产生毒性作用2，临床上也观察到某些患者在接受大剂量的糖皮质激素长期治疗后出现记忆力下降、精神失常、甚至痴呆的现象。由于糖皮质激素对神经系统的作用尚未明了，因此在本实验中研究了泼尼松长期超生理量应用对动物智力和脑组织结构的影响，以探讨糖皮质激素对中枢神经系统损伤的可能作用原理以及研究中药健脑胶囊对其的防治作用。1 材料与方法1.1 动物 4月龄未交配的SpragueDawley（SD）雄性大鼠50只，SPF级，平均体重(22810)g，由广东医学院实验动物中心提供（广东省实验动物质量合格证编号：2002A014）。饲养在(251)的恒温及湿度为40%70%的空调环境

9、中,隔日换垫料，专室饲养，专人负责；使用经严格消毒后的标准饲料和纯净过滤水进行喂养，所有动物分笼饲养，确保实验动物有足够的活动空间，可自由摄食、摄水。1.2 药物与试剂 醋酸泼尼松：原料，浙江仙居制药股份有限公司生产（批号981220）；健脑胶囊水提液高、中、低剂量：由广东医学院医药科技开发中心提供（030807）。单胺氧化酶测试盒（MAO）测定试剂盒、（MDA）丙二醛测定试剂盒、乙酰胆碱酯酶（TCHE）测定试剂盒、超氧化物歧化酶（SOD）测试盒、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒均由南京建成生物工程公司提供。1.3 仪器 LEICA QWIN图象分析仪（德国莱卡）；752紫外分光光度计(上海第三医学仪

10、器厂生产)；电感偶合等离子体直读光谱仪（日本岛津）；梅特勒托利多AE240电子天平（梅特勒托利多仪器公司上海分公司）；MG2型迷宫刺激器（张家港市生物医学仪器厂）。动物分组及处理：50只SD大鼠的体重按照Microsoft Excel 带的宏程序Analys32.x11产生随机数列，并利用产生的随机数列进行分组，一共分为5组，每组10只，具体为（1）NS组：正常对照组，每天先予NS按5 mlkg1灌胃1次，1 h后重复。（2）PD组：泼尼松模型组，每天予泼尼松2.7 mgkg1灌胃，后灌予NS 5 mlkg1。（3）健脑胶囊高剂量组（JLH）：予泼尼松2.7 mgkg1d 1灌胃，后予健脑胶囊

11、高剂量提取液（含淫羊藿，丹参，甘草等，每100 ml含生药量100 g）按5 mlkg1灌胃给药；（4）健脑胶囊中剂量组（JLM）：泼尼松2.7 mgkg1d 1灌胃，后予健脑胶囊中剂量提取液（含淫羊藿，丹参，甘草等，每100 ml含生药量50 g）按5 mlkg1灌胃给药。（5）健脑胶囊低剂量组（JLL）：泼尼松2.7 mgkg1d 1灌胃，后予健脑胶囊低剂量提取液（含淫羊藿、丹参、甘草等，每100 ml含生药量25 g）按5 mlkg1灌胃给药。所有动物按照随机原则分组后观察1 d，第2天开始灌胃给药，qd，连续12周。1.4 观察指标 1.5 统计学处理所有测定指标均采用均数加减标准差的形式表示（s ），数据分析使用SPSS软件中的方差分析（ANOVA）进行检验，先用Levenes test对数据进行方差齐性检验，如方差齐用Bonferroni检验，如方差不齐则用Tamhanes T2 检验，以P0.05，P0.01表示具有统计学意义。2 结果2.1 健脑胶囊对泼尼松大鼠三臂迷宫检测正确率的影响 各组大鼠三臂迷宫正确次数（CT）、错误次数（ET）和正确率（%CR）见表1。表1 健脑胶囊对泼尼松大鼠迷宫正确率的影响（略）与NS组比较，PD组大鼠活动明显减少，活动减少，对外界刺激的