异氟醚后处理对盲肠结扎穿孔大鼠急性肺损伤的保护作用

1、异氟醚后处理对盲肠结扎穿孔大鼠急性肺损伤的保护作用 10-10-29 11:15:00 编辑：studa20 作者：徐文莉1，何俊1，曾因明1，庞庆丰【摘要】 目的 观察异氟醚(isoflurane, ISO)后处理对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)后大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用。方法 32只SD雄性大鼠随机分为4组(每组n=8)：正常组(N组)，未行任何处理;假手术组(Sham组)，单纯行开腹关腹术;盲肠结扎穿孔术组(CLP组)，行CLP建立大鼠ALI模型;异氟醚组(ISO组)，建立CLP模型后4 h

2、腹腔注射液态异氟醚2 ml/kg。术后12 h各组动物腹主动脉放血处死，右肺进行病理切片和肺湿/干比(W/D)测定，组织匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;左肺行支气管肺泡灌洗，取上清液测总蛋白、肿瘤坏死因子(TNF-)和白细胞介素10(IL-10)的含量。结果肺组织病理学检测结果显示CLP组大鼠肺组织损伤严重，ISO组肺组织损伤较轻。与N组比较，CLP组和ISO组中SOD含量降低(P0.01)，其余检测指标均增加(P0.01)。与CLP组比较，ISO组SOD和IL-10含量较高(P0.01);其余检测指标均低于CLP组(P0.05或P0.01)。结

3、论 在本实验条件下，大鼠腹腔注射液态ISO可发挥抗炎、抗氧化作用，对CLP所致大鼠ALI有部分保护作用。 【关键词】 急性肺损伤;肺保护;异氟醚;后处理;盲肠结扎穿孔Abstract: Objective To investigate the protective effects of isoflurane (ISO) post-treatment on acute lung injury (ALI) induced by cecal ligation and puncture (CLP) in rats. Methods 32 male Sprague-Dawley (SD) rats we

4、re randomly divided into 4 groups (n=8 each): normal (N) group, with no treatment; Sham-operated control (Sham) group, with mere incision and closure of the abdomen; cecal ligation and puncture (CLP) group, established as rat model of induced ALI; and isoflurane (ISO) group, with intraperitoneal inj

5、ection of 2 ml/kg ISO 4 h after CLP. The animals were sacrificed by exsanguination via the abdominal aorta 12 h after CLP. The right lungs were removed for pathological dissection; determination of lung wet-to-dry weight ratio (W/D); determination of the content of superoxide dismutase (SOD), malond

6、ialdehyde (MDA) and myeloperoxidase (MPO) in the pulmonary homogenate. Following lavages of the left lungs, the supernatant from the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was determined for the total protein level, the content of tumor necrosis factor- (TNF-) and interleukin-10 (IL-10). Results The pa

7、thological results showed that rats in CLP group had serious lung injury, while the rats in ISO group had slight injury. In both CLP and ISO groups, the SOD content decreased (P0.01) and the other parameters increased (P0.01), as compared to the N group. The SOD and IL-10 contents were higher in ISO

8、 group than in CLP group (P0.01). The contents of MDA, MPO and TNF- and W/D were lower in ISO group than in CLP group (P0.05 or P0.01). Conclusion In our experiment, intraperitoneal injection of ISO had anti-inflammatory and anti-oxidative effects, which provided partial protection from CLP-induced

9、ALI in rats.Key words: acute lung injury; lung protection; isoflurane; post-treatment; cecal ligation and puncture急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)的早期阶段，是临床常见的危重病症。它是损伤因素直接或间接损伤肺毛细血管内皮细胞，导致内皮细胞功能障碍，肺毛细血管通透性增高的血管渗漏综合征1-2。其致病因素有多种，其中脓毒症排在首位3。目前治疗ALI的方法有

10、病因治疗、体液管理、通气治疗、血液净化等，药物有糖皮质激素、肺泡表面活性物质、一氧化氮(NO)、前列腺素等。但ALI临床治疗效果依然不理想，病死率达40%60%4。因此寻找新的治疗方法和药物极为重要。异氟醚(isoflurane,ISO)具有诱导苏醒迅速、血流动力学平稳等优点，在临床上广泛使用。近年来研究发现，一定剂量的ISO可发挥肺保护作用5。ISO预处理可降低脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的幼猪ALI肺泡毛细血管的通透性，而发挥肺保护作用。在大鼠肺缺血/再灌注前，持续给予吸入1最低肺泡有效浓度(MAC)ISO，发现可降低缺血/再灌注损伤导致的血管通透性增加，通过

11、抑制白细胞浸润和肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及CD18表达上调，发挥肺保护作用6。目前研究多集中在ISO预处理对ALI的保护作用，但ISO预处理不符合临床用药方法，临床意义不大。因此对ISO后处理的研究更有实际意义。本实验从ISO后处理的角度，采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)建立大鼠ALI模型，观察各组病理学、肺血管通透性、肺组织炎症、氧化指标等的改变，观察ISO后处理对大鼠ALI的作用，探讨ISO后处理的肺保护作用。1 材料和方法1.1 实验动物及模型制备 雄性SD大鼠32只，体重200250 g，由中国科学院上海实验动

12、物中心提供。采用经典的CLP7建立大鼠ALI模型。大鼠术前12 h禁食不禁水，10%水合氯醛0.35 ml/100 g腹腔注射麻醉，备皮消毒。于腹正中处切开1 cm切口，进腹找到盲肠，1号丝线结扎1/2盲肠，以20G针头在游离端对穿2次(4个孔)后送回腹腔，缝合切口。皮下注射生理盐水2 ml/100 g，置笼内自由活动，不禁饮食。假手术组开腹后仅提出盲肠，不结扎、不穿孔，其余与CLP组相同。1.2 实验分组及方法 SD大鼠随机分为4组，每组8只：正常组(N组)，不行任何处理;假手术组(Sham组)，单纯行开腹关腹术;CLP组，行CLP建立大鼠ALI模型;异氟醚组(ISO组)，CLP建立模型后4 h腹腔注射液态ISO 2 ml/kg(美国雅培制药有限公司)。各组动物在术后12 h腹主动脉放血处死，右肺进行病理切片和肺湿