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文档简介
1、实验一 生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定一、教材分析: 1该实验是高中阶段生物课程的第一个实验。从此以后生物化学方面的内容增加。本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好基础,一定要强调规范化操作方法。 2低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能,实验时教师可考虑予复习,或通过演示提醒学生,注意规范操作要领。 3本实验难度并不大,但由于内容较多、实验时间长,必须作周密安排才能完成。如实验中教师应做好学生的分工合作可缩短实验时间。同时又能培养学生的合作精神。二、教学目标:知识目标:阐明实验原理颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化
2、合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 能力目标:培养学生主动获取知识,应用知识分析现象,归纳总结的能力,培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力。 情感与价值目标:通过亲手实验体验科学家严谨治学的科学态度,培养实事求是的世界观。三、教学重点: 掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。四、教学难点: 实验内容较多,实验时间长,必须周密安排,才能按时完成。 学生要分工合作、教师指导演示。五、材料用具: 实验材料:蔗糖溶液、淀粉溶液,浸泡过的花生种子或新鲜的花生种子,鸡蛋蛋白稀释液。 仪器:徒手切片刀,试管架,试管夹,大小烧杯,小
3、量筒,滴管,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。 试剂:斐林试剂,苏丹染液或苏丹染液,双缩脲试剂A、双缩脲试剂B,体积分数为50的酒精溶液,蒸馏水。六、教学过程:(1)实验原理讲解:1.鉴定实验设计的理念:某些化学试剂 + 生物组织中有关有机化合物产生特定的颜色反应。2.具体原理:可溶性还原糖+ 斐林试剂砖红色沉淀。脂肪小颗粒 + 苏丹染液橘黄色小颗粒。蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应。(2)、方法步骤1、 可溶性还原糖的鉴定(1)制备组织样液(教师制备)(2)鉴定样液:分别取蔗糖溶液和溶液淀粉各3ml注入C、D两支试管中,再各滴加1ml清水,向试管滴加3ml淀粉
4、溶液,再滴入1ml稀释的唾液 将三只试管隔水加热,煮沸2 min观察结果2、脂肪的鉴定取材:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片选取最薄的薄片移至载玻片中央染色:滴加苏丹 (苏丹)染液23滴制片 洗去浮色:用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的染液,滴加体积分数为50%的酒精溶液12滴(溶解有机物)用吸水纸吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片 显微镜观察:先在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移至视野中央,再用高倍镜观察,可看到已着色的圆形小颗粒(注意指导学生使用高倍显微镜的方法) 观察结果3、蛋白质的鉴定制备组织样液:鸡蛋清稀释液 取组织样液2ml加入试管显色反应 加入双缩尿试剂
5、A 0.1g/mLNaOH 2ml 创设碱性条件 摇荡均匀 再加入双缩尿试剂B 0.1g/mLCuSO4 34滴 提供Cu2+摇荡均匀观察结果(3)、操作指导:1.实验成功的关键在于实验材料的选择。 “生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验,实际上是三个独立的实验。在实验中,如注意以下问题,则效果会很好。 在做可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,最好是白色或近于白色的植物组织,这样可以避免材料自身颜色对实验变化颜色的掩盖。经实验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 在做脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选
6、用富含脂肪的种子,且徒手切片要成功,要求实验技能较高,不妨改成刮取花生子叶泥整理临时装片,易做,效果又好。 在做糖和蛋白质的实验时,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋,鉴定之前需要留出一部分样液,以便与鉴定后的样液的颜色做比较,这样可增强说服力。2.注意事项:(1)斐林试剂很不稳定,故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO溶液)分别配制、储存,使用时,再临时配制,将45滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中。(2) 鉴定可溶性还原糖,加热试管时,应该用试管夹夹住试管上部,
7、放入盛开水的大烧杯加热;注意试管底部不接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。如果试管内溶液过于沸腾,可以提起试管夹,使试管与沸水接触面减少,以免溶液溢出。(3) 在鉴定脂肪的实验中,若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡34小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。(4) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色时间不宜过长(否则酒精将脂肪溶解影响实验效果),观察时找最薄处最好只有12层细胞。(5)在蛋白质的鉴定实验中,若用蛋白质作实验材料,必须稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净
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