梅毒的实验室检查

1、胡学军胡学军嘉善中医医院检验科梅毒的实验室检查梅毒的定义定义：梅毒是一种慢性传染性疾定义：梅毒是一种慢性传染性疾病。是由病。是由梅毒螺旋体梅毒螺旋体（苍白螺旋（苍白螺旋体）引起，患病后病程漫长，早体）引起，患病后病程漫长，早期侵犯生殖器和皮肤，期侵犯生殖器和皮肤， 晚期侵晚期侵犯全身各器官，并生多种多样的犯全身各器官，并生多种多样的症状和体征，病变几乎能累及全症状和体征，病变几乎能累及全身各个脏器。身各个脏器。 病原体为梅毒螺旋体，属于密螺旋体属，苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum) 苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 地方亚种 地方性梅

2、毒 极细亚种 雅司病密螺旋体属 品他螺旋体 品他病4 微生物形态 螺旋细密（、规则 一端/两端钩状，菌体成8、S或C形 在暗视野显微镜下运动活泼 G-, Fontana镀银染色,染成棕褐色5 形态与 染色暗视野显微镜下观察6HistopathologyHistopathology showingshowing Treponema pallidumTreponema pallidum spirochetes in spirochetes in testis of experimentally infected rabbit.testis of experimentally infected ra

3、bbit.Modified Steiner silver stain. Modified Steiner silver stain. CDC/Dr. Edwin P. Ewing, Jr. epe1CDC/Dr. Edwin P. Ewing, Jr. epe1cdccdc. .govgov 梅毒螺旋体梅毒螺旋体，梅毒螺旋体，FontanaFontana镀银染色镀银染色传播途径 梅毒患者的皮肤、粘膜中含梅毒螺旋体，未患病者在与梅毒患者的性接触中， 皮肤或粘膜若有细微破损则可得病。 获得性梅毒 （后天）早期梅毒病人是传染源，95%是通过不洁性交传染，少数通过接吻， 握手、输血、接触污染的内衣湿毛

4、巾、茶杯、烟斗、哺乳、尿布等传染。 胎儿梅毒（先天 ）：孕妇体内螺旋体，一般在妊娠34月通过胎盘感染婴儿。 免疫性 特异性抗体感染2 2周后产生特异性周后产生特异性IgMIgM抗体, 不能通过胎盘感染4 4周后出现特异性周后出现特异性IgGIgG抗体,可通过胎盘 非特异性抗体刺激机体产生抗心磷脂抗体/反应素RPR 和 TRUST等方法可检出：57周或硬下疳后23周 完全治愈的早期梅毒可再感染梅毒的实验室检测方法 显微镜检测法：显微镜检测法： （1） 暗视野显微镜检查 （2） 镀银染色检查 血清学检测法：血清学检测法： 非梅毒螺旋体抗原血清试验 （1）VDRL(性病研究实验室试验性病研究实验室试

5、验)：需灭活：需灭活 （2）USR（不加热血清反应素试验）（不加热血清反应素试验） （3）RPR(加速血浆反应素环状卡片试验加速血浆反应素环状卡片试验) （4）TRUST(甲苯胺红不加热血清试验甲苯胺红不加热血清试验) 梅毒螺旋体抗原血清试验 （1）FTA-ABS （2）TPPA/ TPHA （3）TP-ELISA （4）发光法发光法 （5）胶体金法胶体金法 暗视野显微镜检查 标本类型：梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等标本类型：梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液、淋巴结穿刺液皮损的渗出液、淋巴结穿刺液 方法：暗视野显微镜下查找梅毒螺旋体。方法：暗视野显微镜下查找梅毒螺旋体。 结果：典型的

6、梅毒螺旋体呈白色发光结果：典型的梅毒螺旋体呈白色发光, 其螺旋其螺旋较密而均匀。运动方式：较密而均匀。运动方式： 伸缩其螺旋间距离伸缩其螺旋间距离而移动（主要方式）而移动（主要方式）蛇行式蛇行式旋转式旋转式 评价：评价：. 简单、可靠。简单、可靠。. 早期：硬下疳（梅毒血清学试验仍阴性）。早期：硬下疳（梅毒血清学试验仍阴性）。. 阴性不能排出患梅毒的可能性阴性不能排出患梅毒的可能性 暗视野显微镜下的梅毒螺旋体螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方 法，法，WHO指定其为性病实验室必备项目之一指定其为性病实验室必备项目之一镀银染色检查 基本原理：梅毒螺旋体具有亲

7、银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体 结果：棕褐色的梅毒螺旋体 梅毒血清试验梅毒血清试验梅毒螺旋体侵入人体后产生：梅毒螺旋体侵入人体后产生： 抗心磷脂抗体：即非特异性抗体、反应素抗心磷脂抗体：即非特异性抗体、反应素 RPRRPR、TRUSTTRUST 抗梅毒螺旋体抗体：抗梅毒螺旋体抗体：IgGIgG、IgMIgM ELISAELISA、TPPATPPA两种抗体两种抗体1 1抗抗心磷脂抗体血清学心磷脂抗体血清学试验（试验（RPRRPR，TRUSTTRUST等）等） 目的：检测血清中抗心磷脂抗体目的：检测血清中抗心磷脂抗体 抗原：心磷脂抗原：心磷脂甲苯胺红不加热血清试验(TRUST

8、): 原理： 抗原以胆固醇晶粒为载体，包被上心磷脂和卵磷脂，构成VDRL（抗类脂）抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到甲基胺红上，当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时，出现凝集，凝集颗粒呈红色。甲苯胺红不加热血清试验(TRUST): 特点：敏感度高、特异性低，特点：敏感度高、特异性低，易出现易出现假阳性假阳性 用途用途 作为作为筛选筛选 定量定量检测：观察疗效、复发检测：观察疗效、复发和再感染和再感染2 2、梅毒螺旋体抗体血清学试验：、梅毒螺旋体抗体血清学试验：方法：方法：1 1、梅毒螺旋体抗体测定、梅毒螺旋体抗体测定(ELISA(ELISA法法) ) 2 2、TPPATPPA（明胶凝集实验）等

9、（明胶凝集实验）等梅毒螺旋体抗体测定梅毒螺旋体抗体测定(ELISA(ELISA法法) ) 特点：检测总抗体特点：检测总抗体 （1 1）用作）用作筛查和确认试验筛查和确认试验：敏感性、特异性高：敏感性、特异性高 （2 2）不用于观察疗效、复发和再感染：感染梅毒螺旋）不用于观察疗效、复发和再感染：感染梅毒螺旋 体后，体内产生的抗螺旋体抗体持续存在，甚至体后，体内产生的抗螺旋体抗体持续存在，甚至终生，即使经过足够的抗梅治疗，其血清反应仍终生，即使经过足够的抗梅治疗，其血清反应仍持续阳性持续阳性TPPATPPA（明胶凝集实验）（明胶凝集实验） 确证实验确证实验/确诊实验确诊实验 采用梅毒螺旋体天然抗原

10、作为诊断抗原特异性和灵敏度高，检测的是IgM抗体抗体，可以检测到潜伏梅毒，但操作繁琐，费用高梅毒血清试验梅毒血清试验假阳性因素假阳性因素：技术性：技术性：l标本的污染标本的污染l溶血溶血l操作失误操作失误生物学假阳性：生物学假阳性：l某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性某些疾病：结核、疟疾、肝病、红斑狼疮、流感、肺炎、类风湿性关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发展过程中关节炎、风湿性心脏病、风疹、系统性硬化症等，疾病发展过程中释放心磷脂，到血液中假阳性（多见于释放心磷脂，到血液中假阳性（多见于TRUSTTRUST）l生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物学假阳性梅毒螺旋体抗体测定梅毒螺旋体抗体测定(ELISA(ELISA法法) )结果的解读结果的解读阴性对照OD0.1，阳性对照OD0.8时实验正常，否则实验无效。计算方法：cut-off(co)值=0.12+阴性对照平均OD值s/co值=病人OD值/ cut-off(co)值，s/co值大于或等于1判为阳性，s/co值小于1判为阴性 注s/co值在0.52.0之间的灰区样本需复检确认后报告梅毒检测流程图A1(E