干姜提取物和四逆汤对心衰兔心脏舒缩性能的作用比较

1、干姜提取物和四逆汤对心衰兔心脏舒缩性能的作用比较            【关键词】  心力衰竭    【摘要】 目的 探讨干姜提取物和四逆汤对心衰兔心脏舒缩性能的作用异同。方法 以40只纯种新西兰兔为研究对象，随机分为高、中、低剂量干姜组和四逆汤组共4组，用恒速滴注戊巴比妥钠的方法建立兔急性心力衰竭模型，造模成功后，经口插管入胃灌服受试品，用RM-600四道生理仪测定造模前、造模成功时及用药后5min、10min、15min、

2、20min、30min、45min、60min、90min、120min、150min兔的心肌舒缩性能指标，观察各时段指标的变化情况。结果 （1）干姜提取物和四逆汤均能使心衰兔的LVSP、LV±dp/dtmax、LV+dp/dtmax和LV-dp/dtmax呈逐渐上升趋势，中、高剂量干姜组的作用明显优于四逆汤组，差异有显著或非常显著性，P<0.05或P<0.001;（2）两者均能使t-dp/dtmax和LVET呈逐渐缩短趋势;（3）四逆汤组药后各时点LVEDP与药前值比较均未见差异，而各剂量干姜组药后各时点LVEDP呈下降趋势，尤以高剂量组下降趋势明显，在药后10150m

3、in各时点，与药前值比较差异有非常显著性，P<0.001。结论 干姜提取物和四逆汤均具有增强心肌收缩和舒张性能、降低外周阻力作用，以干姜提取物的作用更强;同时干姜提取物在降低舒张末期压方面具有优势，更有利于减轻心脏前负荷，改善冠脉灌流。    关键词 心力衰竭 动物模型 干姜提取物 四逆汤 心肌舒缩性能  Lu Chuanjian，Xu Qingwen，Ou Ming，et al.     Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou510

4、405.     【Abstract】 Objective To investigate the difference between the effects of Ginger Extract and4-Retro-decoction（Si-ni Tang）on cardiac systolic/diastolic function of rabbit with heart failure.Methods 40pure-breed New-Zealand rabbits were randomly divided into4groups:low（0.028mL/

5、kg），middle（0.056mL/kg），high（0.112mL/kg）dosage ginger group and4-Retro-decoction group.The heart failure model of rabbit was established by intravenous administration of20g/L pentobarbital sodium at a certain rate.Oral tube perfusion of ginger extract and4-Retro-decoction were administrated after the

6、 establishment of the model.Their hemodynamic changes were detected before and after the model establishment，and at5，10，15，20，30，45，60，90，120，150minutes respectively after the ginger administration by a RM-6004-graph physiological monitor.Results All the LVSP，LV±dp/dt  max  ，LV+dp/dt&

7、#160; max  ，LV-dp/dt  max  showed an ascending tendency in the3Ginger groups and4-Retro-decoction group.The effects in the middle and high dosage groups were better than that of the4-Retro-decoction group，with statistical significance，P<0.001.（2）LVET and T-dp/dt  max  was

8、 shortened gradually in both ginger groups and4-Retro-dectoction group.（3）LVEDP remained stable at all time-points in the4-Retro-decoction group，while a remarkable descending was seen in3Ginger groups.Compared with the pre-administrational，the high dosage group was the most prominent with very signi

9、ficant difference at10150mins.P    Key words heart failure animal model ginger extract 4-Retro-decoction（Si-ni Tang）cardiac systolic/diastolic function       本课题组在前期研究已证实，干姜提取物能使心衰兔LVSP、LV±dp/dt  max  、LV+dp/dt  max  、LV-dp/dt

10、0; max  呈逐渐上升趋势，t-dp/dt  max  呈逐渐缩短趋势，LVEDP呈下降趋势，显示其改善心肌收缩性能，减轻心衰症状的作用，并随剂量增加而作用增强。由于四逆汤是回阳救逆的传统名方，有研究证实其具有增加心衰大鼠心输出量、增强心肌收缩力、较好维持心脏功能的作用，并能提高过氧化物歧化酶（SOD）活性、降低丙二醛（MAD）含量、抗氧化应激、抑制心肌细胞凋亡，从而保护心肌细胞功能 1  。干姜是四逆汤的臣药，在四逆汤的临床疗效中起着举足轻重的作用。为了探讨干姜在四逆汤中发挥的内在作用，试从两者改善心衰兔的心肌舒缩性能的作用异同开展研究。1 材料与

11、仪器    1.1 实验动物 纯种新西兰兔（体重2.3kg±）40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，分别为低剂量干姜组、中剂量干姜组、高剂量干姜组和四逆汤组。由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证号:省科学技术委员会2002A025，省医学实验动物管理委员会26-2003A004。    1.2 主要实验试剂 （1）戊巴比妥钠（由中国医药集团上海化学试剂公司提供，批号F20020915），用生理盐水配备为3%和2%浓度备用。（2）肝素（由徐州万邦生化制药有限公司提供，批号0203107）用生理盐水配备为125万U/1

12、00ml和125万U/250ml浓度备用。（3）5%葡萄糖（由广东大冢制药有限公司提供，批号030125）。（4）超临界流体CO 2 萃取的干姜提取物（由广州美晨药业有限公司提供，批号200209054）。（5）食用花生油（由中山市鹰唛食品有限公司提供，产品标准号GB1534-86）。（6）受试品剂量计算、配制及观察用量:按标准体重动物的等效剂量折算，兔口服干姜提取物的LD 50  为1.689ml/kg，分别取其1/60（0.028ml/kg）、1/30（0.056ml/kg）、1/15（0.112ml/kg）为低、中、高剂量。用食用花生油作溶剂，将干姜提取物稀释100倍、50倍、

13、25倍，分别配制成1%、2%、4%干姜提取物，配制后的观察用量均为2.8ml/kg。（7）四逆汤的制备:药物组成制附子、干姜、炙甘草，均购于广东省中医院药剂科，并经广州中医药大学中药鉴定教研室李薇教授鉴定，所购药品均为正品。根据中国药典2000版第一部 2  规定的比例，分别二次文火煎煮，煎液用水浴法蒸发浓缩为400ml，使其终浓度为0.5g生药/ml，置4冰箱中冷藏备用。根据动物与人体表比换算 3  ，兔口服四逆汤的等效剂量为生药0.75g/kg，取10倍等效剂量7.5g/kg作为本实验观察用量，即四逆汤煎剂用量为15ml/kg。    1.

14、3 主要仪器 （1）RM-600四道生理仪（日产光电）;（2）江湾I型微型人工呼吸机（第二军医大学生产）;（3）恒速输液泵（2132microperpex peristaltic）;（4）心导管、输液管（江苏无锡市锡山 南泉高分子医械厂出产）;（5）常规手术器械。2 实验方法    2.1 手术方法 46   （1）用3%戊巴比妥钠对新西兰兔行左侧耳缘静脉注射麻醉，仰卧固定;（2）分离气管及左侧颈总动脉后，切开左侧颈总动脉，插入直径1mm已充满肝素（浓度125万U/250ml）的心导管，心导管经压力换能器连接四道生理仪，缓缓推进同时观察示波器，

15、当波型提示导管已进入左心室时停止推进;（3）气管切开，连接微型人工呼吸机，潮气量380ml左右，呼吸频率40次/min左右，并根据动物体重等个体情况调节呼吸频率和潮气量。    2.2 造模方法 上述手术完毕后，经右侧耳缘静脉留置的输液管，注入肝素注射液1ml/kg（浓度125万U/100ml），然后持续滴注5%葡萄糖（滴速20滴/min）;稳定10min后，记录各项指标的造模前基础值;用输液泵经上述留置的输液管，恒速输入2%戊巴比妥钠，先以0.15ml?kg -1  ?min -1  的滴速，密切观察各指标的变化，当LV±dp/dt

16、  max  下降到基础值的20%左右，暂停滴入，稳定观察10min，观察过程若出现 LV±dp/dt max 回升者，再以0.1ml?kg -1  ?min -1  恒速给予维持量。    2.3 给药途径及用量 经口插管入胃，于造模成功并稳定维持10min后，灌服受试品或对照品，并用适量蒸溜水冲管。各组用药量如下:低剂量干姜组:1%干姜提取物2.8ml/kg;中剂量干姜组:2%干姜提取物2.8ml/kg;高剂量干姜组:4%干姜提取物2.8ml/kg;四逆汤组:四逆汤煎液15ml/kg。  &

17、#160; 2.4 指标的观察3 数据处理    使用SPSS10.0统计软件包进行数据处理和统计分析:（1）各组自身比较:各组药前后自身比较采用配对t检验。（2）组间比较:以（各时点实测值-药前值）/药前值×100%计算各指标的变化率。采用单因素方差分析（One-Way ANOVA），方差齐性者选择最小显著差异法检验（LSD检验）;方差不齐者选择Dunnett t 3 法进行检验。4 实验结果    结果见表1、表2、表3。结果表明，干姜提取物和四逆汤对心衰兔心肌舒缩性能的共同作用表现在几方面:（1）使心衰动物模型的LVS

18、P、LV±dp/dt  max  、LV+dp/dt  max  均呈逐渐上升趋势，同时使t-dp/dt  max和LVET呈逐渐缩短趋势，显示其增强心肌收缩性能的作用;（2）使心衰动物模型的LV±dp/dt  max  、LV-dp/dt  max  呈逐渐上升趋势，显示增强心肌舒张性能的作用;（3）使心衰动物模型的t-dp/dt  max  呈逐渐缩短趋势，显示其降低外周阻力，减轻心脏后负荷的作用。通过以上几方面的综合作用，改善心衰兔的心脏功能，但其作用程度存在

19、一定的差异。    干姜提取物和四逆汤对心衰兔心肌舒缩性能的作用差异表现在几方面:（1）四逆汤组与各剂量干姜组的t-dp/dt  max  和LVET的变化率组间差异无显著性;（2）就LVSP而言，四逆汤组药后120min时与高剂量干姜组之间，药后150min时与中剂量干姜组之间，差异有显著性或差异有非常显著性，P<0.05或P<0.01;（3）就LV±dp/dt  max  而言，四逆汤组与高剂量干姜组在药后30150min各时点均有差异，45min、60min、150min差异有非常显著性，P<

20、;0.01，90120min差异有非常显著性，P<0.001;（4）就LV+dp/dt  max  而言，四逆汤组与高剂量干姜组在药后90150min各时点差异均有显著性，P<0.05;（5）就LV-dp/dt  max  而言，四逆汤组与中剂量干姜组在药后30150min各时点差异均有显著性，90min时差异有非常显著性，P<0.01，与高剂量干姜组在药后30150min各时点均有差异，30min和150min时 差异有非常显著性，P<0.01，45120min各时点差异有非常显著性，P<0.001。（6）四逆汤组药后各时

21、点LVEDP与药前值比较均未见差异，而各剂量干姜组药后各时点LVEDP呈下降趋势，尤以高剂量组下降趋势明显，在药后10150min各时点，与药前值比较差异有非常显著性，P<0.001。    表1 干姜提取物和四逆汤对心脏舒缩性能的影响 （略）注:与药前值比较， P<0.05， P<0.01， P<0.001;与四逆汤组比较， # P<0.05;高剂量组与中剂量组比较， P表2 干姜提取物和四逆汤对心脏舒缩性能的影响 （略）       注:与药前值比较， P<0.05

22、， P<0.01， P<0.001;与溶剂组比较， # P<0.05， # P<0.01， #  P<0.001。高剂量组与中剂量组比较， P<0.05;高剂量组与低剂量组比较， P<0.05， P<0.01， P<0.001表3 干姜提取物和四逆汤对心脏舒缩性能的影响 （略）注:与药前值比较， P<0.05， P<0.01， P<0.001;与四逆汤组比较， # P<0.05， # P<0.01， #  P<0.001;高剂量组与中剂量组比较， P<0.05;高剂量组与低剂量组比较， P<0.05， P<0.01， P<0.0015 结论（1）中、高剂量干姜组，尤其是高剂量干姜组提高LVSP、LV±dp/dt  max  、LV+dp/dt  max  和LV-dp/dt  max  的幅度明显比四逆汤组大，具有较强的增强心肌收缩和舒张性能的作