杀虫剂触杀毒力测定(点滴法)

1、杀虫剂触杀毒力测定（点滴法）杀虫剂触杀毒力测定（点滴法） 目前使用的杀虫剂大多数都具有较强的目前使用的杀虫剂大多数都具有较强的触杀作用，所以杀虫剂的触杀毒力测定显的触杀作用，所以杀虫剂的触杀毒力测定显的特别重要。触杀毒力测定有药膜法、点滴法、特别重要。触杀毒力测定有药膜法、点滴法、喷雾法和浸液法。喷雾法和浸液法。 室内比较精确的触杀毒力测定方法是点室内比较精确的触杀毒力测定方法是点滴法和药膜法。滴法和药膜法。 点滴法（点滴法（topical application）是将）是将一一定量农药丙酮液定量农药丙酮液点滴在虫体的一定部位上，点滴在虫体的一定部位上，药剂可自体壁进入体内。药剂可自体壁进入体

2、内。试验用具 容量瓶（容量瓶（10、25、50及及100ml）、）、微量点滴器或毛细管微量点滴器、吸管、微量点滴器或毛细管微量点滴器、吸管、培养皿、烧杯、试管、滤纸、平头镊子、培养皿、烧杯、试管、滤纸、平头镊子、计算纸、白纸、毛笔等。计算纸、白纸、毛笔等。测定方法（选用玉米螟为试验材料）一、实验过程一、实验过程1、预备试验预备试验 先用丙酮将供试药剂（溴氰菊酯）配制成若干个不同浓度，先用丙酮将供试药剂（溴氰菊酯）配制成若干个不同浓度，选取选取4龄玉米螟幼虫若干，每个浓度用点滴器（或微量进样龄玉米螟幼虫若干，每个浓度用点滴器（或微量进样器）点滴药液于幼虫的胸部背面，每头幼虫点滴器）点滴药液于幼虫

3、的胸部背面，每头幼虫点滴1l(或通过或通过标定容量的点滴器），每个浓度点滴虫数不少于标定容量的点滴器），每个浓度点滴虫数不少于30头，待头，待药液挥发后，把药液挥发后，把58头盛于一皿中，加入少量饲料，盖好头盛于一皿中，加入少量饲料，盖好培养皿，写好标记，经培养皿，写好标记，经24小时后检查试虫的生存及死亡头小时后检查试虫的生存及死亡头数，计算其死亡率。从这些浓度中找出适合的浓度，即找出数，计算其死亡率。从这些浓度中找出适合的浓度，即找出其死亡率在其死亡率在2090之间的之间的57个不同剂量的等比浓度个不同剂量的等比浓度共下一步试验用。共下一步试验用。2、根据上一步预备试验结果，可用溴氰菊酯稀

4、释如下浓度：根据上一步预备试验结果，可用溴氰菊酯稀释如下浓度：500、1000、2000、4000、8000、12000、和、和16000ppm。可设可设7组，共选择组，共选择4龄玉米螟幼虫龄玉米螟幼虫210头，分别放入垫有滤头，分别放入垫有滤纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放纸的培养皿中（滤纸预先加湿），每皿放10头，每种浓度头，每种浓度设设3个重复。个重复。3、用微量点滴器盛装药液，用微量点滴器盛装药液，从低浓度到高浓度点滴从低浓度到高浓度点滴，每头，每头虫点滴虫点滴1l (或通过标定容量的点滴器）于幼虫胸部背板处，或通过标定容量的点滴器）于幼虫胸部背板处，待药液挥发后，添加适量人工饲料

5、于皿中。对照虫仅点滴待药液挥发后，添加适量人工饲料于皿中。对照虫仅点滴丙酮，其他处理与上相同。丙酮，其他处理与上相同。4、试验观察及结果整理试验观察及结果整理 试验期间记录温湿度，施药后试验期间记录温湿度，施药后24小时检查每一处理的生或死虫数，统计各浓度幼虫的死亡小时检查每一处理的生或死虫数，统计各浓度幼虫的死亡率和校正死亡率。计算如下：率和校正死亡率。计算如下： 最后采用绘图法或直线回归方程求出最后采用绘图法或直线回归方程求出LD50，并用方差分，并用方差分析法检定其可靠性程度析法检定其可靠性程度 例如：供试药剂（溴氰菊酯）对玉米螟幼虫触杀例如：供试药剂（溴氰菊酯）对玉米螟幼虫触杀LD50

6、毒毒力测定结果及检验。力测定结果及检验。 1、溴氰菊酯对玉米螟幼虫触杀结果（见表、溴氰菊酯对玉米螟幼虫触杀结果（见表1）表表1溴氰菊酯对玉米螟幼虫触杀毒力溴氰菊酯对玉米螟幼虫触杀毒力处理剂量*g头10剂量对数 x参试虫数（头）处理24小时后死亡情况校正死亡率机率值（y）死亡虫数（头）平均死亡率（）校正死亡率（）8.7517.533.570.0140.0210.0280.0对照0.9421.2431.5441.8452.1462.3222.447丙酮124124124124124123124124102348567589102211.318.538.745.260.572.382.31.69.9

7、17.137.744.359.971.9823.74.04.64.85.35.65.9除理剂量单位，还可以用浓度（ppm）作单位，则所求出的单位是LC50。 v死 死 v亡 亡v百 率 v分v率v 剂量数值 剂量数值换算成对数值 v 非对称“S”型曲线 对称型“S”曲线 v换 v成 v机 (LD50) 数值转换的原因数值转换的原因v率 v值v 剂量值对数值v 直线 二、绘图法求二、绘图法求LD50 此方法以剂量对数作横坐标，机率值作纵坐标，绘制直角坐标此方法以剂量对数作横坐标，机率值作纵坐标，绘制直角坐标系。在直角坐标系中找出该次试验的坐标点，并用一直线连接起系。在直角坐标系中找出该次试验的坐

8、标点，并用一直线连接起来，该直线称来，该直线称“剂量对数剂量对数死亡率机率直线死亡率机率直线”。从机率值。从机率值“5”处处引一与横坐标平行的直线与引一与横坐标平行的直线与“剂量对数剂量对数死亡率机率直线死亡率机率直线”相交，相交，以相交点引一线垂直于横轴，此垂线与横坐标的交点，即为溴氰以相交点引一线垂直于横轴，此垂线与横坐标的交点，即为溴氰菊酯对玉米螟菊酯对玉米螟LD50的剂量对数值，再查反对数表，即为的剂量对数值，再查反对数表，即为LD50值值（见下图）（见下图） 因为因为 X1.86 所以所以 X72 因为因为 X10 所以所以 X72107.2g/头头图、溴氰菊酯对亚洲玉米螟四龄幼虫触

9、杀毒力图、溴氰菊酯对亚洲玉米螟四龄幼虫触杀毒力34567机率值11.52.02.5剂量 10gY=2.2938+1.429xr=0.99935* *三、剂量对数机率值直线的验证及三、剂量对数机率值直线的验证及LD50的计算的计算1）求直线回归方程）求直线回归方程 y=a+bx根据表根据表2x =12.489 y =33.9x2=24.2051 xy=63.2301 x=xn=12.4897=1.784=y=yn33.974.843b=xy x ynx2 （x）2n63.230112.48933.9724.2051 （12.489）2 71.4289=ay=bx4.8431.42891.7842

10、.2938 将将a与与b代入代入y=ab x 公式公式 即得该试验毒力回归直线方程即得该试验毒力回归直线方程y2.2938+1.4289x。表表2溴氰菊酯溴氰菊酯对玉米螟幼虫触杀毒力剂量对数与机率值相关值对玉米螟幼虫触杀毒力剂量对数与机率值相关值剂量对数剂量对数（x）机机 率率 值值（y）x2xy0.9241.2431.5441.8452.1462.3222.4773.74.01.64.85.35.65.90.88741.54502.38393.40404.60535.39175.98783.48544.97207.10248.85611.373813.003214.4373=12.489=1

11、2.489=33.9=33.9x2 =24.2051 =24.2051x y=63.2301 2)求求LD50 （用回归直线计算）（用回归直线计算） 因为当机率因为当机率y5时即为时即为50的死亡率，所以将的死亡率，所以将y5代代入回归方程中，即可求出入回归方程中，即可求出LD50 由由y2.2938+1.4289x 得得52.2938+1.4289xX =52.29381.42981.8939x 1.8939X原剂量对数原剂量对数1078.3107.83g/头头查反对数表得：查反对数表得：x=78.33）方差分析检验）方差分析检验 Lyy = ( y y )2 = y2 （y）2n= 3.9

12、77(回归平方和回归平方和) b xy x yn 3.926Q（剩余平方和）（剩余平方和） Lyy 3.977-3.926=0.051总平方和总平方和列方差分析表如下列方差分析表如下 此回归方程的回归效果达倒及显著的水平，符合实际情况，此回归方程的回归效果达倒及显著的水平，符合实际情况，所求所求LD50 =7.8g/头可靠。可靠。4、 LD50标准误差和置信区间（可靠范围）标准误差和置信区间（可靠范围） 上面所求出的上面所求出的LD50 是人工饲养的玉米螟幼虫是人工饲养的玉米螟幼虫LD50 ，其值往往其值往往受到所取样本影响，与昆虫的群体有一定的差距，即所求的受到所取样本影响，与昆虫的群体有一

13、定的差距，即所求的LD50不一定代表群体的实际情况。因此，还需计算不一定代表群体的实际情况。因此，还需计算LD50的标的标准误差以及置信区间（可能的实际所在的范围）。准误差以及置信区间（可能的实际所在的范围）。变异来源变异来源平方和平方和自由度自由度均均 方方F 值值回归回归剩余剩余3.9260.051153.9260.0102384.90F =384.90F0.01(1.5)1） LD50标准误差标准误差表表 6 3剂量对数剂量对数X试验虫数试验虫数n机率值机率值Y权重系数权重系数*wnwnwxnwx20.9421.2431.5441.8452.1462.3222.4771241241241

14、241241241243.63984.06994.50004.93015.36025.61205.79030.3020.4710.5810.6340.6010.5580.53037.4558.4072.0478.6274.5269.1962.37452.5935.2872.59111.23145.04159.93160.66152.62837.3533.2390.23171.74267.62343.19373.05373.461652.52* w（权重系数）（权重系数）查查 w表，即用机率（表，即用机率（y）查之）查之如如 y= 3.639查查w表得表得0.302，其余类推。，其余类推。标准误差：标准误差：+nw(m x)2(x x)2 平均致死剂量，为对数值平均致死剂量，为对数值 1.8501注意：平均致死剂量（注意：平均致死剂量（1.8501）不同于致死中量）不同于致死中量m=1.8939 (为对数值为对数值)nw(x x)2 nwx2 （nwx）2 nwx1652.52 （837.35）2 452.59=1652.52 1549.21=103.31Vm=b21nw1+x( m )2nwx( x )2 0.001 0.03282）置信区间 当机率