实验室安全与论文写作

1、第一章第一章 实验室生物安全概论实验室生物安全概论第一节第一节 实验室生物安全与生物安全实验室生物安全与生物安全实验室实验室 第二节第二节 国外有关实验室生物安全的国外有关实验室生物安全的规定规定第三节第三节 我国与实验室生物安全有关我国与实验室生物安全有关的规定的规定 病原体研究很重要病原体研究很重要,但是危害实验人员但是危害实验人员! 1941年,调查显示美国发生74例实验室相关的布鲁氏杆菌感染 二战期间,日本在中国进行细菌战的同时,其工作人员也有上万人感染,数千人死亡! 1976年统计,英国医学实验室的工作人员获得结核感染比普通人高5倍 1979年,前苏联生物武器研究基地炭疽杆菌泄露造成

2、 64人死亡 2003年,新加坡 台湾以及中国大陆都有明确的实验室感染SARS的病例,以及随后对周围环境的危害 . 提倡实验室生物安全势在必行提倡实验室生物安全势在必行! 实验室感染的直接原因实验室感染的直接原因: 1 微生物气溶胶传播微生物气溶胶传播 2 接种时出错接种时出错,注入体内注入体内 3 被动物咬伤被动物咬伤 4 注射器喷溅注射器喷溅 5 离心机事故离心机事故 实验室生物安全的重点任务是实验室生物安全的重点任务是: 实验室感染的控制实验室感染的控制 实验室对周围环境影响的控制实验室对周围环境影响的控制 对实验室和感染性材料的管理控制对实验室和感染性材料的管理控制 WHO于于1983

3、年出版的实验室生物安全手年出版的实验室生物安全手册是第一本具有国际适用性的实验室生册是第一本具有国际适用性的实验室生物安全手册物安全手册 WHO于于1993年又组织了年又组织了7个国家和个国家和WHO的的生物安全专家及官员编写和发布了实验生物安全专家及官员编写和发布了实验室生物安全手册第二版室生物安全手册第二版 WHO于于2004年完成了第三版实验室生物年完成了第三版实验室生物安全手册的发布，内容上更全面、更科安全手册的发布，内容上更全面、更科学、更具时代感学、更具时代感 美国在不断的研究中于美国在不断的研究中于1999年发布了第四版年发布了第四版的微生物和生物医学实验室的生物安全及的微生物和

4、生物医学实验室的生物安全及年涉及重组研究的生物安全年涉及重组研究的生物安全南（指南）南（指南） 加拿大于年已发布第二版实验室生加拿大于年已发布第二版实验室生物安全指南物安全指南 欧洲：欧盟法规、英国的生物因子危害程度欧洲：欧盟法规、英国的生物因子危害程度及防护分类、德国病原体分类、法国与及防护分类、德国病原体分类、法国与比利时和荷兰的感染因子的危害等级分类、比利时和荷兰的感染因子的危害等级分类、瑞士基于对人和环境危险性的生物因子分类瑞士基于对人和环境危险性的生物因子分类等都在安全问题上进行了具体的规定等都在安全问题上进行了具体的规定 2003年了年了SARS给中国的实验室生物安全给中国的实验室

5、生物安全拉响了警钟！拉响了警钟！ 2004年年5月月GB194892004实验室实验室 生物生物安全通用要求作为国家强制性标准正式安全通用要求作为国家强制性标准正式颁布，在实验室生物安全管理、公共卫生颁布，在实验室生物安全管理、公共卫生体系和认证认可体系建设上是一件具有重体系和认证认可体系建设上是一件具有重要意义的大事，它标志着我国实验室生物要意义的大事，它标志着我国实验室生物安全管理进入了科学、规范的发展的新阶安全管理进入了科学、规范的发展的新阶段。段。第二章 实验室生物安全基本原则实验室生物安全基本原则 第一节第一节 基本概念基本概念 第二节第二节 微生物的危害等级微生物的危害等级 第三节

6、第三节 生物安全水平生物安全水平 第四节第四节 实验室生物安全及生物安全保障实验室生物安全及生物安全保障 第五节第五节 实验室生物安全保障措施实验室生物安全保障措施基本概念 病原体病原体：可使人、动物或植物致病的生物：可使人、动物或植物致病的生物因子。因子。 危险废弃物危险废弃物：有潜在生物危险、可燃、易：有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、放射和起破坏作用的，燃、腐蚀、有毒、放射和起破坏作用的，对人、环境有害的一切废弃物。对人、环境有害的一切废弃物。 气溶胶气溶胶：悬浮于气体介质中的粒径一般为：悬浮于气体介质中的粒径一般为0.001m-100m固态或液态微小粒子形成固态或液态微小粒子形成

7、的相对稳定的分散体系。的相对稳定的分散体系。 一级防护屏障一级防护屏障：实验室的生物安全柜和个：实验室的生物安全柜和个人防护装备等共同构成的防护屏障，用以人防护装备等共同构成的防护屏障，用以减少或消除危害性生物因子的暴露。减少或消除危害性生物因子的暴露。 二级防护屏障二级防护屏障：实验室的设施结构和通风：实验室的设施结构和通风系统等共同构成的防护屏障，除了保护实系统等共同构成的防护屏障，除了保护实验室人员，还能保护周围社区的人或动物验室人员，还能保护周围社区的人或动物免受生物因子意外扩散所造成的感染。免受生物因子意外扩散所造成的感染。 生物安全实验室（生物安全实验室（BSL）：通过规范的实：通

8、过规范的实验室设计建造、实验室设备的配置、个人验室设计建造、实验室设备的配置、个人防护装备的使用，通过严格遵从标准化的防护装备的使用，通过严格遵从标准化的工作操作程序和管理规程等综合措施，确工作操作程序和管理规程等综合措施，确保操作生物危险因子的工作人员不受实验保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害，确保周围环境不受其污染的对象的伤害，确保周围环境不受其污染的实验室。实验室。微生物危害等级 1 . 危害等级危害等级（低个体危害，低群体危（低个体危害，低群体危害）害） 不会导致健康工作者和动物致病的细菌、不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒、寄生虫等生物因子。真菌、病毒、寄生虫

9、等生物因子。 2危害等级危害等级（中等个体危害，有限群体（中等个体危害，有限群体危害）危害） 能引起人或动物发病，但一般情况下对健能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的生物因子。重危害的生物因子。 3危害等级危害等级（高个体危害，低群体危害）（高个体危害，低群体危害） 能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的生物因子。疗的生物因子。 4

10、危害等级危害等级（高个体危害，高群体危害）（高个体危害，高群体危害）能引起人类或动物能引起人类或动物非常非常严重疾病，一般不能严重疾病，一般不能治愈，容易直接或简接或偶然接触而在个治愈，容易直接或简接或偶然接触而在个体间传播体间传播生物安全水平危害危害等级等级 生物安全水平生物安全水平实验室类型实验室类型实验室操作实验室操作安全设备安全设备级基础实验室一级生物安全水平基础的教学 研究GMT不需要;开放实验台级基础实验室二级生物安全水平初级卫生服务;诊断 研究GMT加防护服 生物危险标志开放实验台,此外需BSC用于防护可能生成的气溶胶级屏障实验室三级生物安全水平特殊的诊断 研究在二级生物安全防护

11、水平上增加特殊防护服 准入制度 定向气流BSC 和/或其他所有实验室工作所需要的基本设备级高度屏障实验室四级生物安全水平危险生物因子研究在三级生物安全防护水平上增加气锁入口 外出淋浴 污染物品的特殊处理级BSC或级BSC并穿着 正压服, 双开门高压灭菌器(穿过墙体),过滤空气实验室生物安全保障措施实验室生物安全保障措施 要认识到实验室防护与实验室安全虽然相要认识到实验室防护与实验室安全虽然相关，但二者并不等同关，但二者并不等同 使用和贮存病原体或毒素的区域应控制人使用和贮存病原体或毒素的区域应控制人员的出入员的出入 明确在实验区有人员明确在实验区有人员 明确被带入实验区的物质明确被带入实验区的

12、物质 明确被带出实验区的物质明确被带出实验区的物质 制定应急措施制定应急措施 制定事故报告方案制定事故报告方案第三章生物安全实验室 第一节第一节 一级和二级生物安全水平实验室一级和二级生物安全水平实验室 第二节第二节 三级生物安全水平实验室三级生物安全水平实验室 第三节第三节 四级生物安全水平实验室四级生物安全水平实验室 第四节第四节 动物实验设施动物实验设施一级生物安全水平实验室BSL-1 适用于具有以下特适用于具有以下特征的生物因子的操征的生物因子的操作：已知不会导致作：已知不会导致健康工作者和动物健康工作者和动物致病的细菌、真菌、致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等，病毒和寄生虫等，并且对实

13、验室工作并且对实验室工作人员和环境的潜在人员和环境的潜在危害性最小危害性最小。一级生物安全水平实验室BSL-1 进入进入BSL-1 实验室实验室的工作人员要通过的工作人员要通过实验室操作程序的实验室操作程序的特殊培训，并由一特殊培训，并由一位受过微生物学及位受过微生物学及相关科学一般培训相关科学一般培训的实验室工作人员的实验室工作人员监督管理监督管理一级生物安全水平实验室BSL-1 BSL-1 实验室标准微生物操作准则： 1. 实验正在进行或正在操作组织和标本时，实实验正在进行或正在操作组织和标本时，实验室主任应限制人员进入实验室。验室主任应限制人员进入实验室。 2. 操作潜在危险物和摘下手套

14、后要洗手，离开操作潜在危险物和摘下手套后要洗手，离开实验室之前也要洗手。实验室之前也要洗手。 3. 工作区内禁止吃东西、喝水、抽烟、操作隐工作区内禁止吃东西、喝水、抽烟、操作隐形眼镜、使用化妆品及储存食物。在实验室戴隐形眼镜、使用化妆品及储存食物。在实验室戴隐形眼镜的人员应佩戴护目镜和防护面具。食物要形眼镜的人员应佩戴护目镜和防护面具。食物要储存在工作区外的专用柜子或冰箱里。储存在工作区外的专用柜子或冰箱里。 一级生物安全水平实验室BSL-1 4. 严格禁止用嘴吸移液管，要使用机械吸液装置严格禁止用嘴吸移液管，要使用机械吸液装置。 5.制定尖锐物品的安全操作规范。制定尖锐物品的安全操作规范。

15、6. 所有的实验操作步骤尽可能小心，减少气溶胶或飞溅所有的实验操作步骤尽可能小心，减少气溶胶或飞溅物的形成。物的形成。 7. 工作日结束后，应实行终末消毒处理。如有任何潜在工作日结束后，应实行终末消毒处理。如有任何潜在危险物溅出时，工作台表面应立即净化消毒处理。危险物溅出时，工作台表面应立即净化消毒处理。 8. 所有培养基、保存物和其它系统管理的废弃物，在处所有培养基、保存物和其它系统管理的废弃物，在处理之前应使用经审定批准的净化方法（如：高压灭菌法）理之前应使用经审定批准的净化方法（如：高压灭菌法）进行净化处理。进行净化处理。 9.实验室应具备防止昆虫和啮齿类动物在实验室孳生的防实验室应具备

16、防止昆虫和啮齿类动物在实验室孳生的防护设备护设备一级生物安全水平实验室BSL-1 一级屏障一级屏障 1.操作属于生物安全一级的生物因子一般不需操作属于生物安全一级的生物因子一般不需要特殊防护装置和设备，如生物安全柜。要特殊防护装置和设备，如生物安全柜。 2.实验服、实验袍或实验制服，防止便服被污实验服、实验袍或实验制服，防止便服被污染或弄染或弄3. 如果手部皮肤破损或起疹时应戴上手套；要如果手部皮肤破损或起疹时应戴上手套；要配备可替换的胶乳手套。配备可替换的胶乳手套。 4.操作中遇到可能有微生物或其它有毒害物质操作中遇到可能有微生物或其它有毒害物质飞溅出来时，应佩戴保护性眼罩。飞溅出来时，应佩

17、戴保护性眼罩。 一级生物安全水平实验室BSL-1 二级屏障二级屏障 1.BSL-1 实验室应该有控制进入的门。实验室应该有控制进入的门。 2.每个实验室应配备一个洗手用的洗涤槽。每个实验室应配备一个洗手用的洗涤槽。 3.实验室的设计应使实验室易于清洁，不适合铺实验室的设计应使实验室易于清洁，不适合铺设地毯。设地毯。4.实验台面应是防水的，并且能够耐受中等程度实验台面应是防水的，并且能够耐受中等程度的热、有机溶剂、酸碱及其它用于净化处理台面的热、有机溶剂、酸碱及其它用于净化处理台面和设备的化学药品和设备的化学药品5.实验室器材设施应能支持预期的承重和使用需实验室器材设施应能支持预期的承重和使用需

18、要。桌凳、柜子和设备之间的间距应便于清扫。要。桌凳、柜子和设备之间的间距应便于清扫。 二级生物安全水平实验室BSL-2 实验室布局应分清实验室布局应分清洁区、半污染区和洁区、半污染区和污染区，人流、物污染区，人流、物流、信息流应有效流、信息流应有效分隔分隔二级生物安全水平实验室BSL-2 BSL-2设计要求设计要求 ：1.首先要符合首先要符合BSL-1实验室建筑设计和设施要求实验室建筑设计和设施要求2.实验室门宜带锁、可自动关闭。实验室的门应有实验室门宜带锁、可自动关闭。实验室的门应有可视窗。可视窗。3.实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。4.实验室

19、宜有不少于每小时实验室宜有不少于每小时34次的通风换气次数。次的通风换气次数。5. 应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗二级生物安全水平实验室BSL-26.应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域外还应当有供长期使用在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间的存储空间7.在实验室工作区域外应有存放个人衣物的在实验室工作区域外应有存放个人衣物的条件条件8.在实验室门口应有生物安全二级实验室标在实验室门口应有生物安全二级实验室标识识。二级生物安全水平实验室BSL-2防护设备防护设备1.应在实验室内配

20、备生物安全柜。应在实验室内配备生物安全柜。2.应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。3.在实验室所在的建筑物内应配备高压蒸汽在实验室所在的建筑物内应配备高压蒸汽灭菌器。灭菌器。三级生物安全水平实验室BSL-3 是一个按特殊要求建造的是一个按特殊要求建造的实验室，适合操作、研实验室，适合操作、研究会引起严重的、可能究会引起严重的、可能致死的疾病的病原微生致死的疾病的病原微生物。整个实验室完全密物。整个实验室完全密封，室内气压比室外低封，室内气压比室外低40帕斯卡，处于负压状帕斯卡，处于负压状态，从而避免实验室内态，从而避免实验室内部的可能含有病源微生部的可能

21、含有病源微生物的气体跑到外面而造物的气体跑到外面而造成污染。成污染。三级生物安全水平实验室BSL-3 操作准则：操作准则：1实验器材应避免使用玻璃制品和锐器。实验器材应避免使用玻璃制品和锐器。 2所有的实验、检测操作都必须在指定区域所有的实验、检测操作都必须在指定区域内进行内进行 3菌毒种的使用严格执行菌毒种有关管理规菌毒种的使用严格执行菌毒种有关管理规定，责任人签订责任书，做到双人双锁保管定，责任人签订责任书，做到双人双锁保管 4.实验中不得不使用玻璃制品和锐器时，应通实验中不得不使用玻璃制品和锐器时，应通过镊子等工具夹取，尽量避免直接用手接触。过镊子等工具夹取，尽量避免直接用手接触。 三级

22、生物安全水平实验室BSL-35必须使用螺口可密闭的离心管或试管进行离心必须使用螺口可密闭的离心管或试管进行离心6实验动物放在负压饲养箱内饲养，每天至少观实验动物放在负压饲养箱内饲养，每天至少观察察12次，做好观察记录次，做好观察记录7. 完成每一项试验（感染性材料的操作、动物解剖）完成每一项试验（感染性材料的操作、动物解剖）或转换实验区时都应更换第二层手套，摘下的手或转换实验区时都应更换第二层手套，摘下的手套应立即置于盛有消毒剂的容器中。套应立即置于盛有消毒剂的容器中。8. 每次实验、检测工作结束后，工作人员应对涉及每次实验、检测工作结束后，工作人员应对涉及的所有工作区域、仪器设备和试验台面进

23、行清洁的所有工作区域、仪器设备和试验台面进行清洁整理和消毒处置。整理和消毒处置。四级生物安全水平实验室BSL-4 四级生物安全水平实验室是为进行与危害四级生物安全水平实验室是为进行与危害等级等级的微生物相关的工作而设计的，根的微生物相关的工作而设计的，根据所使用的生物安全柜的类型和穿着防护据所使用的生物安全柜的类型和穿着防护服的不同，可以分为安全柜型、正压服型服的不同，可以分为安全柜型、正压服型和混合型实验室。和混合型实验室。在建设和投入使用前，在建设和投入使用前，应充分咨询有运作类似设施经验的机构，应充分咨询有运作类似设施经验的机构，其运作应在国家有关部门的管理之下进行。其运作应在国家有关部

24、门的管理之下进行。第四节 动物实验设施 动物实验室的生物安全防护动物实验室的生物安全防护（ABSL）设施参照设施参照 BSL-1 BSL-4实验室的要实验室的要求，此外还应考虑对动物呼吸、排泄、求，此外还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验、动物饲养动物饲养 、动物尸体及排泄物的处置、动物尸体及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危害的防护。等过程产生的潜在生物危害的防护。动物实验设施水平危害等危害等级级 防护水平防护水平实验室操作和安全设施实验室操作和安全设施级ABSL-1限制出入，穿戴防护服和手套级ABSL-2ABSL-1的操作加：生物危害

25、警告标志。可产生气溶胶的操作应使用级或级BSC。废弃物和饲养笼舍在清洗前先清除污染级ABSL-3ABSL-2的操作加：准入控制。所有操作均在BSC内进行，并穿着特殊防护服级ABSL-4ABSL-3的操作加：严格限制出入。进入前更衣。配备级BSC或正压防护服。离开时淋浴。所有废弃物在清除出设施前需先清除污染第四章 危害评估 第一节第一节 概述概述 第二节第二节 危害评估的影响因素危害评估的影响因素 第三节第三节 危害评估的范围危害评估的范围第一节 概述 生物安全工作的生物安全工作的核心是危害评估核心是危害评估，也指风，也指风险评估险评估。 当实验室活动涉及感染或潜在感染因子时，当实验室活动涉及感

26、染或潜在感染因子时，对某一个特定的操作程序或实验进行危害对某一个特定的操作程序或实验进行危害评估，可以帮助正确选择生物安全水平，评估，可以帮助正确选择生物安全水平，评估职业性疾病风险、采取相应安全防护评估职业性疾病风险、采取相应安全防护措施、减少所危险性时间发生。措施、减少所危险性时间发生。第二节第二节 危害评估的影响因素危害评估的影响因素病原体的致病性病原体的致病性 传播途径传播途径病原体的稳定性病原体的稳定性病原体的感染力量病原体的感染力量病原体的浓度病原体的浓度感染性物质的来源感染性物质的来源动物研究结果动物研究结果基因技术基因技术实验室操作实验室操作预防措施或治疗方预防措施或治疗方法法

27、医疗监督医疗监督其他其他 第三节第三节 危害评估的范围危害评估的范围 含有已知感染性病原体的物质含有已知感染性病原体的物质 含有未知感染性病原体的物质含有未知感染性病原体的物质 含有遗传修饰微生物的物质含有遗传修饰微生物的物质 可能含有（或没有）未知感染性病原体的可能含有（或没有）未知感染性病原体的物质物质 动物研究动物研究 其他应用其他应用(包括操作人本身包括操作人本身)第五章 实验室危害化学品危害电的危害电离辐射的危害紫外线和激光光源危害噪声危害第一节 化学品的危害 定义和分类： 可以根据危险性货可以根据危险性货物运输规定或化学物运输规定或化学品本身所具有的危品本身所具有的危害和危害程度来

28、对害和危害程度来对危害性化学品进行危害性化学品进行定义和分类定义和分类。 可以根据化学药品可以根据化学药品其反应性、不稳定其反应性、不稳定性、燃烧性或健康性、燃烧性或健康危害程度来进行分危害程度来进行分类类 可以根据其毒性作可以根据其毒性作用进行分类用进行分类第一节 化学品的危害 暴露途径暴露途径：1.吸入：化学品可能引起刺激性、致敏性、变态反吸入：化学品可能引起刺激性、致敏性、变态反应性、呼吸道的疾病或癌症应性、呼吸道的疾病或癌症2.接触：皮肤接触时可能引起化学烧伤、眼结膜炎接触：皮肤接触时可能引起化学烧伤、眼结膜炎或全身性中毒或全身性中毒3. 食入：危险性化学品可能经口吸入或污染食物和食入

29、：危险性化学品可能经口吸入或污染食物和饮料而意外食入饮料而意外食入4. 通过损伤皮肤：危险性化学品可能经皮肤切口、通过损伤皮肤：危险性化学品可能经皮肤切口、擦伤或针刺伤口进入体内擦伤或针刺伤口进入体内第二节 压缩气体和液化气的危害容器容器贮存要求贮存要求压缩气体钢瓶和液化气容器1. 安全地固定在墙上或坚固的实验台上，以确保钢瓶不会因为自然灾害而移动2. 运输时必须戴好盖帽，并用手推车运送3. 大量储备用钢瓶应存放在与实验室有一定距离的适当设施内。4. 不应放置在散热器、明火或其他热源或会产生电火花的电器附近，也不应置于阳光下直晒小型、单次使用的气体钢瓶 不得焚烧压缩气体和液化气压缩气体和液化气

30、的危害的危害第三节 火的危害火的危害火灾的通常原因火灾的通常原因：1.超负荷用电；超负荷用电；2.电器保养不良，例如电缆的绝缘层破坏或损坏电器保养不良，例如电缆的绝缘层破坏或损坏3.供气管或电线过长供气管或电线过长4.仪器设备在不使用时未关闭电源仪器设备在不使用时未关闭电源5.使用不是专为实验室环境设计的仪器设备使用不是专为实验室环境设计的仪器设备6.明火明火7.供气管老化锈蚀供气管老化锈蚀8.易燃、易爆品处理或保存不当易燃、易爆品处理或保存不当9.不相容化学品没有正确隔离不相容化学品没有正确隔离10.在易燃物品或蒸气附近有能产生火花的设备在易燃物品或蒸气附近有能产生火花的设备11.通风系统不

31、当或不充分通风系统不当或不充分 灭火器的类型和用途种类种类应用范围应用范围不宜应用范围不宜应用范围水纸、木质纤维电路和电器火灾、易燃液体、金属燃烧CO2易燃液体和气体、电火灾碱金属、纸开粉易燃液体和气体、碱金属、电路和电器火灾可重复使用的仪器和设备，因为其残渣难以清除干净泡沫易燃液体电火灾第四节 电的危害实验室成员应该了解的危险情况：实验室成员应该了解的危险情况：1、电器接近潮湿物体表面、电器接近潮湿物体表面2、使用过长的软线、使用过长的软线3、电线绝缘性能差并已老化、电线绝缘性能差并已老化4、由于使用适配器使电路过载、由于使用适配器使电路过载5、可能产生电火花的电器接近易燃、可能产生电火花的

32、电器接近易燃物质及其蒸气物质及其蒸气6、电器在无人看管时处于通电状态、电器在无人看管时处于通电状态7、电器着火时使用错误类型的灭火、电器着火时使用错误类型的灭火器器第五节 电离辐射的危害 电离辐射能造成皮肤损伤、电离辐射能造成皮肤损伤、脱发、贫血、胃肠系统损脱发、贫血、胃肠系统损伤及白内障和癌症等疾病伤及白内障和癌症等疾病;也会造成染色体损害或基也会造成染色体损害或基因突变等遗传疾病因突变等遗传疾病第五节 电离辐射的危害操作原则辐射区域辐射区域实验区域实验区域 1 只能在指定区域使用放只能在指定区域使用放射活性物质射活性物质 2 只允许必要的工作人员只允许必要的工作人员参与参与 3 使用个人防

33、护设备（包使用个人防护设备（包括实验室工作服、安全眼括实验室工作服、安全眼镜以及一次性手套）镜以及一次性手套） 4 监测实验人员的辐射暴监测实验人员的辐射暴露露 1 使用溢出盘，内衬一次性吸使用溢出盘，内衬一次性吸收材料收材料 2 限制放射核素的用量限制放射核素的用量 3 在辐射区域、工作区域以及在辐射区域、工作区域以及放射性废气物区设置辐射源的放射性废气物区设置辐射源的隔离防护装置隔离防护装置 4 辐射容器用辐射标志进行标辐射容器用辐射标志进行标记记 5 工作结束后，用辐射计测量工作结束后，用辐射计测量工作区域、防护服和手的辐射工作区域、防护服和手的辐射情况情况 6 使用经适当保护的运输容器

34、使用经适当保护的运输容器第五节 电离辐射的危害操作原则放射性废弃物区域放射性废弃物区域 1 要经常从工作区域清除放射性废弃物要经常从工作区域清除放射性废弃物 2 要正确记录放射性材料的使用和处理情况要正确记录放射性材料的使用和处理情况 3 要筛查超过剂量限度材料的剂量要筛查超过剂量限度材料的剂量 测定记录测定记录 4 要制定并经常性操练应急反应计划要制定并经常性操练应急反应计划 5 应急反应中首先要帮助受伤人员应急反应中首先要帮助受伤人员 6要彻底清洁受污染区域要彻底清洁受污染区域 7如果可能，从安全办公室请求协助如果可能，从安全办公室请求协助 8 书写并保存事故报告书写并保存事故报告第七章

35、其他安全设备注射针头 2009年年3月月12日日,德国汉堡本哈德德国汉堡本哈德诺诺赫特热带医学研究所的一名女科学家，赫特热带医学研究所的一名女科学家，因被含有因被含有埃博拉病毒埃博拉病毒的注射器刺伤，的注射器刺伤，被怀疑已感染埃博拉病毒被怀疑已感染埃博拉病毒,目前还没有目前还没有拯救女科学家的治疗方案，而它的致拯救女科学家的治疗方案，而它的致死率则高达死率则高达90第七章 其他安全设备注射针头 如何消除或减少伤害如何消除或减少伤害 不要重新给针头戴护不要重新给针头戴护套或截断枕头套或截断枕头; 使用针头锁定型注射使用针头锁定型注射器以避免枕头和注射器以避免枕头和注射器的分离器的分离; 使用针头

36、和注射器为使用针头和注射器为一体的一次性注射器一体的一次性注射器第七章 其他安全设备注射针头 如何消除或减少危害如何消除或减少危害 注射液抽液时要尽可能减注射液抽液时要尽可能减少形成气泡少形成气泡 避免用注射器来混合感染避免用注射器来混合感染性液体性液体,避免用力过大避免用力过大 竖直向上将注射器中过量竖直向上将注射器中过量的液体和气泡排到经适当的液体和气泡排到经适当消毒剂浸湿的脱脂棉或有消毒剂浸湿的脱脂棉或有棉花的小瓶棉花的小瓶第七章 其他安全设备注射针头 如何消除或减少危险如何消除或减少危险 操作感染性物质时应该操作感染性物质时应该再生物安全柜进行再生物安全柜进行 在对动物进行接种时要在对

37、动物进行接种时要进行固定进行固定 使用后要进行高压灭菌使用后要进行高压灭菌并确保进行了妥善处理并确保进行了妥善处理!第七章 其他安全设备离心机 1998年年12月月16日日,Beckman公司的一公司的一个超速离心机发生爆个超速离心机发生爆炸炸,离心机完全损坏离心机完全损坏,爆爆炸原因是用了不匹配炸原因是用了不匹配的转子的转子,所幸当时实验所幸当时实验室无人室无人,没有造成人员没有造成人员伤亡。伤亡。第七章 其他安全设备离心机 防止气溶胶喷溅，使用可防止气溶胶喷溅，使用可封闭的容器封闭的容器 ； 每个转子每个转子 均有运转时间均有运转时间记录，并应制定预防性维记录，并应制定预防性维修保养措施以

38、减少发生机修保养措施以减少发生机械故障的危险械故障的危险 ; 安装转子应该正确，做到安装转子应该正确，做到平衡平衡 第七章 其他安全设备水浴锅 确保定期清洁和消确保定期清洁和消毒毒,避免微生物的生避免微生物的生长长! 不用叠氮化钠不用叠氮化钠作抑作抑菌剂菌剂,因为叠氮化钠因为叠氮化钠与有些金属形成爆与有些金属形成爆炸性混合物炸性混合物.第七章 其他安全设备超声处理器 容易产生气溶胶容易产生气溶胶 损伤听力损伤听力 清洁剂外溅导致化学清洁剂外溅导致化学伤害伤害 因此要因此要: 在密封单元中打开仪器在密封单元中打开仪器 确保隔离以免受次谐波确保隔离以免受次谐波影响影响 戴上手套避免清洁剂的戴上手套

39、避免清洁剂的伤害伤害第七章 其他安全设备匀浆器 在打开匀浆器以前先等候在打开匀浆器以前先等候30min以使气溶胶沉积以使气溶胶沉积,冷冷却以使气溶胶凝聚却以使气溶胶凝聚 ; 使用手动研磨器使用手动研磨器,管外用可管外用可吸收材料包裹吸收材料包裹; 使用专门设计可以避免在转使用专门设计可以避免在转子轴承和子轴承和O型垫型垫 圈处泄漏的圈处泄漏的仪器型号仪器型号 第七章 其他安全设备干燥器烘箱 人离实验室，烘箱等干燥器必人离实验室，烘箱等干燥器必须关闭，避免温度过高而发生须关闭，避免温度过高而发生火灾或者爆炸事故火灾或者爆炸事故 第七章 仪器设备相关事故的原因分类分类事故事故事故原因事故原因减少或

40、消除灾害减少或消除灾害设计或建造有缺陷培养箱有电火花、电休克没有温度过高断路装置没用提供可靠的接地符合国家标准使用不当离心事故转轴上的离心桶没有平衡培训和监督工作人员厌氧培养箱不正确使用气体不正确配用家用保温瓶爆炸液氮运输不当使用专门设计的仪器设备家用型冰箱爆炸危险性化学品没有储存在防火/防暴容器中低熔点溶剂和提取物仅储存在具有火花/爆炸保护作用的冰箱或安全柜中缺乏正确的维护火焰光度计产生的火焰维护过程中各组件的重新组装不正确培训和监督工作人员第七章 一些实验室常用的个人防护装置 实验服、隔离衣、塑料实验服、隔离衣、塑料围裙：围裙： 防水、罩在日常服装外，防水、罩在日常服装外，避免污染衣服；避

41、免污染衣服； 不得穿离实验室区域，不得穿离实验室区域，应在实验室所在机构进应在实验室所在机构进行洗烫工作行洗烫工作 第七章 一些实验室常用的个人防护装置 护目镜、安全眼睛和面罩：护目镜、安全眼睛和面罩： 避免实验物品飞溅对眼睛和避免实验物品飞溅对眼睛和面部造成的危害；面部造成的危害； 实验室佩戴隐性眼镜必须戴实验室佩戴隐性眼镜必须戴上护目镜保护上护目镜保护 不得戴离实验室区域不得戴离实验室区域 第七章 一些实验室常用的个人防护装置 呼吸防护装置：呼吸防护装置： 为了达到理想的防为了达到理想的防护效果，应对呼吸护效果，应对呼吸器作个体适合性测器作个体适合性测试；试； 应按照作业指导书应按照作业指

42、导书及培训的要求使用及培训的要求使用 不得戴离实验室区不得戴离实验室区域域呼吸器正压服第七章 一些实验室常用的个人防护装置 手套：手套： 进行实验时，手可能会进行实验时，手可能会被污染，而且容易受被污染，而且容易受“锐器锐器”所伤！所伤！选择手套时，应符合舒选择手套时，应符合舒服、合适、灵活、握服、合适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求撕的要求第七章 一些实验室常用的个人防护装置 手套：手套：1.一般性工作，以及处理感染性物质、血液一般性工作，以及处理感染性物质、血液和体液时，广泛使用一次性乳胶、乙烯树和体液时，广泛使用一次性乳胶、乙烯树脂等材料的手术用手套；脂等材料的手术

43、用手套；2.尸体解剖等可能接触尖锐器械的情况下，尸体解剖等可能接触尖锐器械的情况下，应该戴不绣钢网孔手套应该戴不绣钢网孔手套 使用过的一次性手套应与实验室的感染使用过的一次性手套应与实验室的感染性废弃物一起丢弃，手套不得戴离实验室性废弃物一起丢弃，手套不得戴离实验室区域！区域！第七章 一些实验室常用的个人防护装置 鞋：鞋： 鞋应舒适，鞋底防滑；鞋应舒适，鞋底防滑； 推荐使用皮制或合成推荐使用皮制或合成材料的不渗液体的鞋材料的不渗液体的鞋 在在BSL-3和和BSL-4实验实验室要求使用专用鞋，室要求使用专用鞋，如防静电工作鞋等如防静电工作鞋等防静电工作鞋工作鞋第八章 重组DNA技术和生物安全 下

44、列情况需要较高的生物安全水平：下列情况需要较高的生物安全水平： 1、来源于病原生物体的、来源于病原生物体的DNA序列序列的表达可能增加的表达可能增加GMO的毒性的毒性 2、插入的、插入的DNA序列性质不确定序列性质不确定 ，例如在制备病原微生物基因组例如在制备病原微生物基因组DNA库的过程中库的过程中 3、基因产物具有潜在的药理学活、基因产物具有潜在的药理学活性性 4、毒素的基因产物、毒素的基因产物 编码编码 第八章 重组DNA技术和生物安全 生物表达载体由宿主生物表达载体由宿主细胞和载体组成细胞和载体组成 ，必须有效、安全地使必须有效、安全地使用用 ； 工程大肠杆菌是非致工程大肠杆菌是非致病

45、菌，不能在健康人病菌，不能在健康人和动物的消化道中持和动物的消化道中持久克隆久克隆; 当当克隆的克隆的DNA来自来自病原微生物时病原微生物时，特别，特别是克隆编码毒素一类是克隆编码毒素一类的蛋白时，需要较高的蛋白时，需要较高的生物安全说水平的生物安全说水平 第八章 重组DNA技术和生物安全 病毒载体病毒载体可以用于可以用于将基因有效地转移将基因有效地转移到其他细胞；到其他细胞； 但是这类病毒载体但是这类病毒载体的贮存液中可能污的贮存液中可能污染了可复制病毒而染了可复制病毒而存在生物安全存在生物安全第八章 重组DNA技术和生物安全 插入基因所直接引插入基因所直接引起的危害起的危害： 1、毒素、毒

46、素 2、细胞因子、细胞因子 3、激素、激素 4、基因表达调节、基因表达调节剂剂 5、毒力因子或增、毒力因子或增强子强子 6、致瘤基因序列、致瘤基因序列 7、抗生素耐药性、抗生素耐药性 8、变态反应原、变态反应原第八章 重组DNA技术和生物安全 与受体与受体/宿主有关的危害宿主有关的危害： 1、宿主的易感性、宿主的易感性 2、宿主菌株的致病性，包括毒力、感染性、宿主菌株的致病性，包括毒力、感染性和毒素产物和毒素产物 3、宿主范围的变化、宿主范围的变化 4、接受免疫状况、接受免疫状况 5、暴露后果、暴露后果第八章 重组DNA技术和生物安全 携带外源性遗传信携带外源性遗传信息的动物（息的动物（转基因

47、转基因动物动物 ）应当在适合）应当在适合外源性基因产物特外源性基因产物特性的防护水平下进性的防护水平下进行操作行操作 ！蜘蛛羊 翡翠海参 第八章 重组DNA技术和生物安全 表达了能够耐受除表达了能够耐受除草剂或抵抗昆虫能草剂或抵抗昆虫能力的转基因植物还力的转基因植物还饱受争议；饱受争议； 争议焦点主要是这争议焦点主要是这类植物作为食物的类植物作为食物的安全性安全性第八章 重组DNA技术和生物安全 对于转基因食品，对于转基因食品，可以通过危害评估可以通过危害评估确定它们转基因产确定它们转基因产品所需的生物安全品所需的生物安全水平，并进行相关水平，并进行相关要求操作要求操作第九章 实验室生物安全操

48、作规程 样品容器：样品容器： 样品容器可以是玻璃的，样品容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品；但最好使用塑料制品； 正确地使用盖子或塞子盖正确地使用盖子或塞子盖好后应无泄漏好后应无泄漏 在容器外部不能有残留物在容器外部不能有残留物 容器上应当正确地粘贴标容器上应当正确地粘贴标签以便于识别签以便于识别 样品的要求或说明书得放样品的要求或说明书得放防水的袋子里防水的袋子里第九章 实验室生物安全操作规程 样品在设施内的传递样品在设施内的传递 为了避免意外泄露或溢为了避免意外泄露或溢出出,应将容器固定在架子应将容器固定在架子上使其直立上使其直立; 或者将其放置于盒子等或者将其放置于盒子等二级容器二级容

49、器; 如果是密封的最好有个如果是密封的最好有个垫圈垫圈,定期的清除架子或定期的清除架子或者是二级容器的污染者是二级容器的污染第九章 实验室生物安全操作规程 样品接收样品接收: 需要接收大量样品需要接收大量样品的实验室应当安排的实验室应当安排专门的房间或空间专门的房间或空间第九章 实验室生物安全操作规程 打开包装打开包装: 接收和打开的人员应当了接收和打开的人员应当了解样品对身体健康的潜在解样品对身体健康的潜在危害危害; 对于处理破损或泄漏的容对于处理破损或泄漏的容器器,应接收过如何采用标准应接收过如何采用标准防护方法的培训防护方法的培训; 样品的内层容器要在生物样品的内层容器要在生物安全柜内打

50、开安全柜内打开,并准备好消并准备好消毒剂毒剂第九章 实验室生物安全操作规程 生物安全柜的使用生物安全柜的使用: 1 正常运行时才能使用正常运行时才能使用 2 使用中不能打开玻璃观察挡板使用中不能打开玻璃观察挡板 3 尽量少放置器材或样品尽量少放置器材或样品,不影响后部压力排风系统不影响后部压力排风系统的气流循环的气流循环 4 所有工作必须在工作后面的中后部进行所有工作必须在工作后面的中后部进行 5 尽量减少操作者身后的人员流动尽量减少操作者身后的人员流动第九章 实验室生物安全操作规程 生物安全柜的使用生物安全柜的使用: 6 操作者不应反复移动和伸出手臂以免干扰气流操作者不应反复移动和伸出手臂以

51、免干扰气流 7 不要使实验记录本不要使实验记录本/移液管以及其他物品阻挡空移液管以及其他物品阻挡空气隔栅气隔栅 8 工作完成以后用适当的消毒剂清洁工作完成以后用适当的消毒剂清洁 9 在操作时在操作时,不能进行文字工作不能进行文字工作 10 工作开始和结束后工作开始和结束后,分机应运行至少分机应运行至少5min第九章 实验室生物安全操作规程 离心机的使用离心机的使用 1 离心管应当由厚壁玻璃制成离心管应当由厚壁玻璃制成,最好为塑料制品最好为塑料制品 2 用于离心的试管和样品容器应当牢固盖紧用于离心的试管和样品容器应当牢固盖紧(最最好使用螺旋盖好使用螺旋盖) 3离心桶和十字轴应按重量配对，并在装载

52、离心离心桶和十字轴应按重量配对，并在装载离心管后正确平衡管后正确平衡 4 应给出液面距离离心管管口需要留出的空间大应给出液面距离离心管管口需要留出的空间大小小 第九章 实验室生物安全操作规程 离心机的使用离心机的使用 5 每次使用后每次使用后,要清除离心桶、转子要清除离心桶、转子和离心机腔的污染和离心机腔的污染 6 使用后应当将离心桶导致存放使使用后应当将离心桶导致存放使平衡液流干平衡液流干 7 如果离心机内转子部位的腔壁污如果离心机内转子部位的腔壁污染明显，需要重新评估离心操作规染明显，需要重新评估离心操作规程程 第九章 实验室生物安全操作规程 移液管和移液辅助器：移液管和移液辅助器： 1

53、严禁用口吸取严禁用口吸取 2 移液管应带有棉塞以减少污移液管应带有棉塞以减少污染染 3 感染性物质不能反复吹吸感染性物质不能反复吹吸 4 不能将液体从移液管内用力不能将液体从移液管内用力吹出吹出 5 污染的移液管应该完全浸泡污染的移液管应该完全浸泡在消毒液中在消毒液中 6 固定皮下注射针头的注射固定皮下注射针头的注射器不能用于移液器不能用于移液 第九章 实验室生物安全操作规程 冰箱和冷柜的维护和冰箱和冷柜的维护和使用使用 1、应当定期除霜和清洁、应当定期除霜和清洁 2、储存物应表面学名、储存物应表面学名、储存日前和储存者的姓名，储存日前和储存者的姓名，未标明的应灭菌后丢弃未标明的应灭菌后丢弃

54、3、不能放置易燃溶液、不能放置易燃溶液第十章 消毒和灭菌概念 消毒消毒是指杀灭或清除是指杀灭或清除病原微生物的物理或病原微生物的物理或化学手段，使其达到化学手段，使其达到无害化，但不一定杀无害化，但不一定杀死其孢子；死其孢子； 灭菌灭菌是指杀死和是指杀死和/或去或去除所有微生物除所有微生物第十章 消毒和灭菌概念 清除污染清除污染：与消毒：与消毒和灭菌相比，应用和灭菌相比，应用范围更广，也用于范围更广，也用于去除或中和有害的去除或中和有害的化学品以及放射性化学品以及放射性物质物质 清洁清洁：是指去除污是指去除污垢、有机物和污渍垢、有机物和污渍等等第十章 消毒和灭菌概念 熏蒸消毒熏蒸消毒： 利用消

55、毒药物的气体或烟利用消毒药物的气体或烟雾，在密闭空间内熏蒸以雾，在密闭空间内熏蒸以达到消毒目的，优点：达到消毒目的，优点： 1、方法简单，节省人力、方法简单，节省人力 2、可在缺水情况下消毒、可在缺水情况下消毒 3、能同时处理大批物品、能同时处理大批物品 4、不会浸湿消毒物品、不会浸湿消毒物品熏蒸消毒机熏蒸消毒间第十章 消毒和灭菌概念 抗菌剂：抗菌剂： 是指能够杀死微生物是指能够杀死微生物或抑制它们生长和繁或抑制它们生长和繁殖的制剂，用于活组殖的制剂，用于活组织（如皮肤、粘膜）织（如皮肤、粘膜）防制微生物防制微生物 防腐剂：防腐剂： 是指不必杀死微生物是指不必杀死微生物但能够抑制其生长和但能够

56、抑制其生长和繁殖的物质，常应用繁殖的物质，常应用于体表于体表第十章 消毒和灭菌化学杀菌剂常见的化学杀菌剂：常见的化学杀菌剂： 许多杀菌剂对人或环许多杀菌剂对人或环境有害，应当按说明境有害，应当按说明小心地进行选择、贮小心地进行选择、贮存、操作、使用和废存、操作、使用和废弃弃 为了个人安全，建议为了个人安全，建议应在稀释化学杀菌剂应在稀释化学杀菌剂时戴手套、围裙和保时戴手套、围裙和保护眼睛的器具护眼睛的器具 氯（次氯酸钠） 二氯异氰尿酸钠 氯胺 二氧化氯 甲醛 戊二醛 酚类化合物 季铵盐类化合物 乙醇 碘和碘伏 过氧化氢和过氧乙酸第十章 消毒和灭菌热力灭菌和消毒高压灭菌高压灭菌高压灭菌锅的使用注

57、意：高压灭菌锅的使用注意： 高压灭菌是对实验材高压灭菌是对实验材料进行灭菌的最有效料进行灭菌的最有效和最可靠的方法和最可靠的方法 、锅内放置物总量不超过容量的、锅内放置物总量不超过容量的，以便均匀地作用于装载物，以便均匀地作用于装载物 、要正确认识压力和温度的关系，、要正确认识压力和温度的关系， 、取出液体可能因过热而沸腾，、取出液体可能因过热而沸腾，应采用慢排式设置应采用慢排式设置 、取物品时温度应下降到、取物品时温度应下降到以下以下 、保证灭菌器的安全阀没有被纸、保证灭菌器的安全阀没有被纸品等堵塞品等堵塞第十章 消毒和灭菌热力灭菌和消毒煮沸煮沸 煮沸消毒法是将物品放于煮沸消毒法是将物品放于

58、水中加热至沸点的消毒方水中加热至沸点的消毒方法法 对繁殖体型微生物作用对繁殖体型微生物作用min可灭活可灭活 对芽孢需数十分钟乃至数对芽孢需数十分钟乃至数小时，故一般不用作灭菌小时，故一般不用作灭菌 煮沸时，应将物品完全浸煮沸时，应将物品完全浸入水中入水中沸水消毒器第十章 消毒和灭菌热力灭菌和消毒焚烧焚烧 对于那些经过或事先未对于那些经过或事先未经清除污染的动物尸体经清除污染的动物尸体以及解剖组织或其他实以及解剖组织或其他实验室废气物，焚烧是一验室废气物，焚烧是一种有效的方法种有效的方法 但是微生物、有毒化学但是微生物、有毒化学品和烟尘还可能通过烟品和烟尘还可能通过烟囱排放而污染大气。囱排放而

59、污染大气。 电影电影卡桑德拉大桥卡桑德拉大桥中中的肺鼠疫病毒肆虐的情形：的肺鼠疫病毒肆虐的情形：冷战时期，美国在实验室中冷战时期，美国在实验室中秘密存放了致命的肺鼠疫病秘密存放了致命的肺鼠疫病毒，恐怖分子闯入时，盛病毒，恐怖分子闯入时，盛病毒的容器被子弹打破，带有毒的容器被子弹打破，带有病毒的幸存者逃上了一辆从病毒的幸存者逃上了一辆从日内瓦开往斯德哥尔摩的列日内瓦开往斯德哥尔摩的列车，列车上车，列车上1000多人受到多人受到这种空气传播的病毒威胁这种空气传播的病毒威胁 早在早在2004年，一部名年，一部名为为257实验室实验室的美的美国纪录片就披露了从国纪录片就披露了从上世纪上世纪60年代到本

60、世年代到本世纪，在美国本土先后纪，在美国本土先后莫名奇妙出现的莱姆莫名奇妙出现的莱姆关节炎、变异口蹄疫、关节炎、变异口蹄疫、西尼罗河病毒等怪异西尼罗河病毒等怪异的疾病，均是源自纽的疾病，均是源自纽约繁华市区一个绝密约繁华市区一个绝密生化实验室。生化实验室。 有可能影片中的故事成为现实吗？有可能影片中的故事成为现实吗？ 俄罗斯在上世纪俄罗斯在上世纪70年代时，西伯利亚一个城市就年代时，西伯利亚一个城市就曾发生实验室病毒遭人窃取，造成数十名民众感曾发生实验室病毒遭人窃取，造成数十名民众感染死亡的事件，由于当时新闻遭到封锁，染死亡的事件，由于当时新闻遭到封锁，20年后年后消息才解密消息才解密 曾令全