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文档简介
1、教材中实验专题复习第一部分生物技术与实践光学显微镜操作技术临时装片的染色低倍镜和高倍镜的使用掌握参考要求(2)实验与探究生物体内物质的分离、鉴定技术光合色素的分离糖、蛋白质、脂肪的鉴定DNA的粗提取与鉴定调查遗传学调查:群体调查、家系分析生态学调查:样方法、标志重捕法考试说明考试说明中的中的内容要求(第一部分)内容要求(第一部分)考试说明考试说明中的能力要求:中的能力要求:(2)实验与探究能力实验与探究能力 能独立完成生物学教材所规定的生物实验完成生物学教材所规定的生物实验。包括理解实验实验目的目的、原理原理、方法方法和操作步骤操作步骤,掌握相关的操作技能操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技
2、能进行综合的运用综合的运用。具备验证简单生物学事实验证简单生物学事实的能力,并能对实验现象现象和结果结果进行解释解释、分析分析和处理处理。具有对一些生物学问题进行初步探究初步探究的能力。包括运用观察观察、试验试验与调查调查,假说演绎假说演绎、建立模型建立模型与系统分析系统分析等科学研究方法。能对一些简单的实验方案实验方案作出恰当的评价评价和修订修订。实验目的实验目的实验方法实验方法原理原理(2013北京)5.关于高中生物学实验的基本原理,叙述不正确的是A.噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统B.提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异C.成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分
3、离是因为细胞壁具有选择透(过)性D.PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应的产物可作为下一轮反应的模板教材中实验专题复习的目标是什么? 掌握实验原理、目的、方法、步骤 解释、分析、处理实验现象和结果 综合运用实验的方法和技能怎样能达到这样的教学目标? 梳理、重现实验原理、目的、方法、步骤 设置问题引领学生分析实验现象和结果 联系本学科研究挖掘实验的“真”意义一、光学显微镜操作技术考试说明的要求光学显微镜操作技术制作临时装片临时装片的染色低倍镜和高倍镜的使用检测生物组织中的油脂检测细胞中的DNA和RNA观察多种多样的细胞观察叶绿体和线粒体(人教版)观察洋葱表皮细胞的质壁分离及质壁分离复原探究
4、洋葱表皮细胞细胞液的浓度范围(浙科版)观察细胞的有丝分裂制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片(人教版)低温诱导植物染色体数目的变化(人教版)探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化(浙科版)表示学生做过的实验目镜目镜镜筒镜筒转换器转换器物镜物镜通光孔通光孔遮光器遮光器粗准焦粗准焦螺旋螺旋细准焦细准焦螺旋螺旋镜臂镜臂镜柱镜柱反光镜反光镜镜座镜座压片夹压片夹载物台载物台(一)(一)显微镜结构图及各部位名称:显微镜结构图及各部位名称:思考思考1.光学显微镜的光路图如何?光学显微镜的光路图如何?2.能调光的有关部位是什么?能调光的有关部位是什么?3.调节清晰度的部位是什么?
5、调节清晰度的部位是什么? 显微镜的对光、调光显微镜的对光、调光 低、高倍镜使用方法低、高倍镜使用方法不同直径的不同直径的光圈光圈 视野明暗问题视野明暗问题(二)成像原理(二)成像原理成像效果:上下颠倒、左右对称。成像效果:上下颠倒、左右对称。目镜成的是放大倒立的虚像,目镜成的是放大倒立的虚像,焦距越短(镜头越短),焦距越短(镜头越短),放大倍放大倍数越大。数越大。物镜成的是放大物镜成的是放大倒立倒立的实像,的实像,焦距越长(镜头越长),焦距越长(镜头越长),放大倍放大倍数越大;数越大; 目镜、物镜差异目镜、物镜差异 装片移动问题装片移动问题 放大倍数问题放大倍数问题回顾:显微镜显微镜的使用方法
6、的使用方法1、取镜、安放、取镜、安放2、对光、对光3、压片、压片4、调焦、调焦5、观察、观察【低倍镜下对焦低倍镜下对焦将观察目标移至视野中央将观察目标移至视野中央转动转换转动转换器高倍镜器高倍镜增加光量增加光量调焦(只能细准焦螺旋)调焦(只能细准焦螺旋)】(三)玻片标本制作(三)玻片标本制作1.材料选择:薄、透、小材料选择:薄、透、小(为什么?)(为什么?)2.临时玻片制作方法临时玻片制作方法(了解)(了解)黑藻黑藻观察叶观察叶绿体和胞质环流绿体和胞质环流口腔上皮细胞口腔上皮细胞观观察线粒体察线粒体紫色洋葱外表皮紫色洋葱外表皮观察观察质壁分离和复原质壁分离和复原2.临时玻片常用制作方法(了解)
7、:临时玻片常用制作方法(了解):涂片法:即用涂布的方法制成玻片标本。此法适用于生物涂片法:即用涂布的方法制成玻片标本。此法适用于生物游离细胞和比较疏松的组织。如:单细胞生物、小型群体游离细胞和比较疏松的组织。如:单细胞生物、小型群体藻类、藻类、血液血液、含有细菌的培养液、花粉母细胞等材料均可用、含有细菌的培养液、花粉母细胞等材料均可用此法制成玻片标本。此法制成玻片标本。装片法:装片法是把较小的生物体或某些器官的一部分整个装片法:装片法是把较小的生物体或某些器官的一部分整个装于玻片上的制片方法,它适用于装于玻片上的制片方法,它适用于小而薄小而薄的材料。如洋葱的的材料。如洋葱的表皮、人口腔上皮、昆
8、虫的口器、翅、足等。表皮、人口腔上皮、昆虫的口器、翅、足等。切片法:用手工或机械将植物或动物组织切成薄片,进而制切片法:用手工或机械将植物或动物组织切成薄片,进而制成装片的方法。成装片的方法。压片法:将植物、动物压片法:将植物、动物较疏松的材料较疏松的材料用较小的压力压碎在载用较小的压力压碎在载玻片上,使之成一薄片的制片方法。花药、根尖、果蝇幼玻片上,使之成一薄片的制片方法。花药、根尖、果蝇幼虫的唾液腺等均可用此法制成玻片标本。虫的唾液腺等均可用此法制成玻片标本。检测生物组织中的油脂检测生物组织中的油脂浙科版:实验原理:实验原理: 各种生物组织和细胞中,有机化合物含量各各种生物组织和细胞中,有
9、机化合物含量各不相同。对于某些化合物,可使用指示剂染色后不相同。对于某些化合物,可使用指示剂染色后在显微镜下进行检查。苏丹在显微镜下进行检查。苏丹染液能使细胞中染液能使细胞中的油脂呈橙黄色。的油脂呈橙黄色。 生物组织必须制成薄片才能在显微镜下观生物组织必须制成薄片才能在显微镜下观察。察。检测生物组织中的油脂检测生物组织中的油脂浙科版:实验步骤:实验步骤:(1)取材切片:)取材切片:浸泡后浸泡后花生种子去种皮花生种子去种皮(2)染色:)染色:苏丹苏丹(橙黄色)苏丹(橙黄色)苏丹(红色)(红色)(3)制片:用吸水纸吸取染液,再滴加)制片:用吸水纸吸取染液,再滴加1-2滴体滴体积分数为积分数为_,_
10、,用吸水纸吸,用吸水纸吸去子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻去子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。片,制成临时装片。(4)观察:)观察:检测生物组织中的油脂检测生物组织中的油脂浙科版:思考思考1.1.为什么选择花生子叶做实验材料?为什么选择花生子叶做实验材料?2.2.如果不使用酒精洗浮色,实验结果会有什么不如果不使用酒精洗浮色,实验结果会有什么不同?同?苏丹染液染色后的脂肪滴观察(检测)细胞中的DNA和RNA的分布实验原理:实验原理:生物组织材料必须制成薄片才能用于显微镜下观察生物组织材料必须制成薄片才能用于显微镜下观察DNA与与RNA在细胞中的分布部位不同,在细胞中的
11、分布部位不同,DNA主要分主要分布在细胞核中,布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中,甲基绿可主要分布在细胞质中,甲基绿可使使DNA着色,即使得细胞核呈蓝绿色,吡罗红可着色,即使得细胞核呈蓝绿色,吡罗红可使细胞中的使细胞中的RNA着色,即使得细胞质呈红色。着色,即使得细胞质呈红色。盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质的胞,同时使染色质的DNA和蛋白质分离,有利于和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。与染色剂结合。方法步骤:方法步骤:制片制片 水解水解漂洗漂洗染色染色观察观察人口腔上皮细胞人口腔上皮细胞/洋葱内表皮洋葱内表皮盐酸,
12、保温盐酸,保温蒸馏水,缓流蒸馏水,缓流甲基绿甲基绿-吡罗红混合染剂吡罗红混合染剂细胞核呈绿色,细胞质呈红色细胞核呈绿色,细胞质呈红色观察(检测)细胞中的DNA和RNA的分布烘干烘干后水浴保温水解蒸馏水缓缓冲洗观察(检测)细胞中的DNA和RNA的分布 烘干目的:杀死固定细胞烘干目的:杀死固定细胞观察(检测)细胞中的DNA和RNA的分布染液:甲基绿染液:甲基绿-吡咯红混合染液吡咯红混合染液结果:细胞质呈绿色,细胞核呈红色。结果:细胞质呈绿色,细胞核呈红色。结果分析:结果分析:RNA主要在细胞质中,主要在细胞质中,DNA主要在细胞核中主要在细胞核中。观察(检测)细胞中的DNA和RNA的分布思考思考1
13、.1.该实验为什么选择洋葱鳞片叶内表皮细胞?该实验为什么选择洋葱鳞片叶内表皮细胞?2.2.加入盐酸水解时,为何需要保温一段时间?加入盐酸水解时,为何需要保温一段时间?3.3.该实验能否看得到该实验能否看得到DNADNA和和RNARNA分子?分子?观察(检测)细胞中的DNA和RNA的分布观察叶绿体和线粒体实验原理:实验原理:叶肉细胞中的叶绿体,散布于细胞质中,呈绿叶肉细胞中的叶绿体,散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形。可在高倍显微镜下色、扁平的椭球形或球形。可在高倍显微镜下观察它的形态和分布。观察它的形态和分布。线粒体普遍存在于植物和动物细胞中。线粒体线粒体普遍存在于植物和动物细胞中。线
14、粒体形态多样,呈短棒状、圆球状、线形、哑铃形形态多样,呈短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。健那绿染液是将等。健那绿染液是将活细胞活细胞线粒体染色的专一线粒体染色的专一性染料,可使线粒体呈蓝绿色,而细胞质接近无性染料,可使线粒体呈蓝绿色,而细胞质接近无色。色。观察叶绿体和线粒体思考思考1.1.观察叶绿体和线粒体的材料细胞是活的还是死的?为观察叶绿体和线粒体的材料细胞是活的还是死的?为什么?什么?2.2.为什么为什么选选用用黑藻叶片或黑藻叶片或藓类的小叶或者菠菜叶的藓类的小叶或者菠菜叶的下表皮(稍带叶肉)作观察叶绿体的材料?下表皮(稍带叶肉)作观察叶绿体的材料?3.3.可以推测黑藻细胞中的液泡位置吗
15、?可以推测黑藻细胞中的液泡位置吗?4.4.叶绿体为什么会运动?叶绿体为什么会运动?5.5.胞质环流对于细胞生活的意义何在?胞质环流对于细胞生活的意义何在?观察叶绿体和线粒体观察叶绿体和线粒体分泌泡沿着细胞骨架移动分泌泡沿着细胞骨架移动线粒体沿着细胞骨架移动线粒体沿着细胞骨架移动观察叶绿体和线粒体 细胞质基质中含有多种无机物和有机物,还有多种酶,细胞质基质中含有多种无机物和有机物,还有多种酶,细胞质流动有利于物质的运输和细胞器的移动,为细胞细胞质流动有利于物质的运输和细胞器的移动,为细胞内新陈代谢提供所需要的物质和有关条件。内新陈代谢提供所需要的物质和有关条件。Theinnerlifeinthe
16、cell中视频截图观察洋葱表皮细胞的质壁分离及质壁分离复原+探究细胞液浓度(浙科版)紫色洋葱表皮细胞紫色洋葱表皮细胞质壁分离复原质壁分离复原紫色洋葱表紫色洋葱表皮细胞皮细胞紫色洋葱表皮细胞紫色洋葱表皮细胞质壁分离质壁分离1.1.细胞发生质壁分离发生的条件?细胞发生质壁分离发生的条件?2.2.为何选择紫色洋葱鳞片叶外表皮做观察材料?为何选择紫色洋葱鳞片叶外表皮做观察材料?3.3.为什么要先制作正常状态的植物细胞装片,且滴为什么要先制作正常状态的植物细胞装片,且滴加蔗糖溶液、清水都在载物台上操作?加蔗糖溶液、清水都在载物台上操作?4.4.如何探究洋葱表皮细胞液浓度范围?如何探究洋葱表皮细胞液浓度范
17、围?观察洋葱表皮细胞的质壁分离及质壁分离复原+探究细胞液浓度(浙科版) 及时了解植物细胞液浓度,对于指导农业生产及时了解植物细胞液浓度,对于指导农业生产很有意义。很有意义。 能引起约能引起约50%的细胞发生初始质壁分离的蔗糖的细胞发生初始质壁分离的蔗糖浓度就是细胞液的浓度浓度就是细胞液的浓度 初始质壁分离是指细胞的角隅处开始出现细初始质壁分离是指细胞的角隅处开始出现细胞膜及其内部分离开细胞壁的状态。胞膜及其内部分离开细胞壁的状态。培养洋葱、适时取根培养洋葱、适时取根剪取根尖剪取根尖2-3mm(1)解离)解离(2)漂洗)漂洗(3)染色)染色(4)制片)制片试剂试剂 作用作用盐酸盐酸使细胞分离使细
18、胞分离清水清水防止盐酸与碱性染料作用,保证防止盐酸与碱性染料作用,保证正常染色;正常染色;防止盐酸继续起作用,甚防止盐酸继续起作用,甚至破坏细胞。至破坏细胞。碱性碱性染料染料主要染细胞的染色质和染色体。主要染细胞的染色质和染色体。压片压片使细胞分散,便于观察使细胞分散,便于观察制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片1.临时玻片制作2.显微镜下观察制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片1.为什么要适时取根?为什么要剪取根尖为什么要适时取根?为什么要剪取根尖2-3mm?2.为什么在显微镜下找分生区细胞?如何找到?为什么在显微镜下找分生区细胞?如何找到?3.制作装片时,使用何种试剂其作用分别是什么?制作
19、装片时,使用何种试剂其作用分别是什么?4.视野中个时期细胞数量是否相等?每一时期细胞数占视野中个时期细胞数量是否相等?每一时期细胞数占总细胞数的比例代表了什么?总细胞数的比例代表了什么?适时取根适时取根剪取根尖剪取根尖2-3mm洋葱根尖分生区细胞有丝分裂结果图洋葱根尖分生区细胞有丝分裂结果图1 12 23 34 45 56 67 7制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片低温诱导植物染色体数目的变化实验步骤:实验步骤:1 1洋葱生根至洋葱生根至1cm1cm左右时,将整套装置于左右时,将整套装置于44低温诱导培养低温诱导培养36h36h。2 2剪取根尖剪取根尖0.50.51cm1cm,放入卡诺氏液浸
20、泡,放入卡诺氏液浸泡0.50.51h1h,以固定细,以固定细胞形态,然后用体积分数为胞形态,然后用体积分数为95%95%的酒精冲洗的酒精冲洗2 2次。次。3 3制作临时装片:解离制作临时装片:解离漂洗漂洗染色染色制片制片4 4低倍镜找到染色体形态较好的分裂相。视野中既有二倍体低倍镜找到染色体形态较好的分裂相。视野中既有二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞。确认某个细胞发生细胞,也有染色体数目发生改变的细胞。确认某个细胞发生染色体数目改变后,再用高倍镜观察。染色体数目改变后,再用高倍镜观察。对照对照室温培养室温培养0处理处理秋水仙素处理秋水仙素处理有丝分裂中期对照组和实验组的染色体图低温诱导
21、植物染色体数目的变化1.1.为什么视野中的细胞染色体数不都加倍?为什么视野中的细胞染色体数不都加倍?2.2.什么时期的细胞分裂相更易于观察?什么时期的细胞分裂相更易于观察?3.3.视野中细胞能否继续分裂?视野中细胞能否继续分裂?探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化 探究酵母菌种群数量在封闭环境中随时间发生的变化 使用取样法(间隔)、利用血细胞计数板,显微镜下计数思考:思考:1.1.设置不接种酵母菌的无菌葡萄糖溶液这一组设置不接种酵母菌的无菌葡萄糖溶液这一组别的意义在于?别的意义在于?2.2.如何能保证随机取样?如何能保证随机取样?3.3.计数过程中可能碰到计数过程中可能碰到什么问题?如何科学地
22、什么问题?如何科学地处理?处理?(左上、独立个体)(左上、独立个体)4.4.如何算出试管内的细如何算出试管内的细胞总数?胞总数?5.5.还有其他方法能估测还有其他方法能估测细胞中的菌液浓度吗?细胞中的菌液浓度吗?(比色法,使用比色计)(比色法,使用比色计)探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化计数室深计数室深0.1mmABCDEFGHI1234567891011121314151612345678910111213141516171819202122232425计数板平面图计数板平面图计数板侧面图计数板侧面图放大放大计数区共计数区共9个大格个大格放大放大25个中格个中格16个小格个小格80个小格
23、内细菌数个小格内细菌数放大放大细菌细胞数细菌细胞数/ml=80个小格内细菌数个小格内细菌数/80 x 400 x 104 x 稀释倍数稀释倍数计数区容积?计数区容积?1mm盖玻片盖玻片(先先)0.1mm3经典题:(经典题:(2011海淀海淀0模)模)31显微镜是生物学实验显微镜是生物学实验常用的工具,请回答下列有关问题。常用的工具,请回答下列有关问题。(1)要在显微镜下观察到清晰的物像,首先要保证)要在显微镜下观察到清晰的物像,首先要保证被观察的标本能够透光,其次是结构之间有一定被观察的标本能够透光,其次是结构之间有一定的对比度。例如,的对比度。例如,观察叶绿体观察叶绿体的实验选择黑的实验选择
24、黑藻叶片为实验材料,一是因为黑藻叶片藻叶片为实验材料,一是因为黑藻叶片,二是因为被观察的主要,二是因为被观察的主要结构;而在结构;而在制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片的的实验中,需要对实验材料进行一些处理,经实验中,需要对实验材料进行一些处理,经处理后解决了原始材料不透处理后解决了原始材料不透光的问题,经处理后增大了光的问题,经处理后增大了结构之间的对比度。结构之间的对比度。很薄,细胞层数少很薄,细胞层数少自身有颜色自身有颜色解离和压片解离和压片染色染色(2)低倍镜换高倍镜后,常出现视野变暗和物像模糊的)低倍镜换高倍镜后,常出现视野变暗和物像模糊的现象,
25、请说出一种调亮视野的操作方法和使物像清晰的现象,请说出一种调亮视野的操作方法和使物像清晰的操作方法:操作方法:调节反光镜(调节光圈、调节电光源的亮调节反光镜(调节光圈、调节电光源的亮度);度);用细准焦螺旋调整焦距用细准焦螺旋调整焦距 光学显微镜技术的应用 细胞学方面观察细胞结构(如细胞器的变化)观察细胞中目标蛋白质的位置(使用荧光分子标记等) 遗传学方面观察染色体(如观察染色体结构变异、观察交叉互换现象、观察染色体数目变异等)观察细胞形态(如镰刀形红细胞等) 考试说明的要求考试说明的要求生物体内物质的生物体内物质的分离、鉴定技术分离、鉴定技术光合色素的分离光合色素的分离糖、蛋白质、脂肪的鉴定
26、糖、蛋白质、脂肪的鉴定DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定检测生物组织中的油脂检测生物组织中的油脂检测生物组织中的糖类和蛋白质检测生物组织中的糖类和蛋白质光合色素的提取与分离光合色素的提取与分离 DNA的粗提取与鉴定(人教版)的粗提取与鉴定(人教版)二、生物体内物质的分离、鉴定技术表示学生做过的实验思考思考1.1.分别选择哪些材料来进行实验?分别选择哪些材料来进行实验?2.2.如何确定反应后的颜色就是还原性糖检测后的颜色?如何确定反应后的颜色就是还原性糖检测后的颜色?(用指(用指示剂检测葡萄糖溶液)示剂检测葡萄糖溶液)3.3.双缩脲试剂和斐林试剂的异同(成分、使用方法、双缩脲试剂和斐林试剂的异同
27、(成分、使用方法、鉴定条件等)?鉴定条件等)?4.4.不同组织中某成分含量是否有差异?不同组织中某成分含量是否有差异?( (颜色深浅颜色深浅) )检测生物组织中的脂肪(油脂)、糖类和蛋白质光合色素的提取与分离实验原理:实验原理:1、提取色素的原理:、提取色素的原理:2、分离色素的原理:、分离色素的原理: 叶绿体中的色素是有机物,可以溶解在叶绿体中的色素是有机物,可以溶解在_中中( (如如_、_)_),所以可以用,所以可以用_或或_等提取叶绿体色素等提取叶绿体色素。用用_分离色素,因为叶绿体中的分离色素,因为叶绿体中的4 4种色种色素在层析液中的素在层析液中的_不同,溶解度高的色素随不同,溶解度
28、高的色素随着层析液在滤纸上扩散的速度着层析液在滤纸上扩散的速度_,反之则,反之则_,所以,所以据此原理据此原理4 4种色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而种色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。分离开。有机溶剂有机溶剂 酒精、丙酮等酒精、丙酮等纸层析法纸层析法无水乙醇无水乙醇 丙酮丙酮溶解度溶解度快快慢慢光合色素的提取与分离思考思考1.1.研磨提取时加入碳酸钙、二氧化硅、无水乙醇的研磨提取时加入碳酸钙、二氧化硅、无水乙醇的目的分别是什么?目的分别是什么?2.2.分离时为什么滤液细线不能超过层析液?分离时为什么滤液细线不能超过层析液?3.3.不同季节的叶片其色素条带数、颜色深浅是否一致?不同季
29、节的叶片其色素条带数、颜色深浅是否一致?DNA的粗提取与鉴定一、粗提取原理:一、粗提取原理:二、鉴定原理:二、鉴定原理:3、DNA遇遇_、_条件下会变成条件下会变成_色色。二苯胺试剂二苯胺试剂沸水浴沸水浴蓝蓝1、DNA在不同浓度的在不同浓度的_中中_不同。不同。氯化钠溶液氯化钠溶液溶解度溶解度2、DNA_酒精溶液,细胞中的某些蛋白质酒精溶液,细胞中的某些蛋白质_酒精溶液。酒精溶液。不溶于不溶于可溶于可溶于1A、根据酶的专一性。使用蛋白酶如嫩肉粉;、根据酶的专一性。使用蛋白酶如嫩肉粉;1B、根据热稳定性。、根据热稳定性。大多数蛋白质不能忍受大多数蛋白质不能忍受6080的高的高温,而温,而DNA在
30、在80以上才会变性以上才会变性。DNA的粗提取与鉴定思考思考1.1.使用动物或植物细胞分别使用什么方法破碎使用动物或植物细胞分别使用什么方法破碎细胞?细胞?2.2.加入冷酒精、缓慢搅拌的目的是什么?加入冷酒精、缓慢搅拌的目的是什么?3.3.鉴定鉴定DNADNA时,设置时,设置A A组的目的是什么?组的目的是什么?AB粗提取得到的粗提取得到的DNA进一步粗提取得到的进一步粗提取得到的DNA鉴定结果鉴定结果DNA的粗提取与鉴定实验操作小结:实验操作小结:制备鸡血细胞液制备鸡血细胞液加柠檬酸钠,静置或离心加柠檬酸钠,静置或离心破碎细胞,释放破碎细胞,释放DNADNA 加蒸馏水,同一方向快速加蒸馏水,
31、同一方向快速 通通方向搅拌方向搅拌过滤,除去细胞壁、细胞膜等。过滤,除去细胞壁、细胞膜等。溶解核内溶解核内DNADNA 加入加入NaClNaCl至至2mol/L2mol/L,同一方向,同一方向缓慢搅拌缓慢搅拌DNADNA析出析出 加蒸馏水至加蒸馏水至0.14mol/L0.14mol/L,过,过滤,再溶解到滤,再溶解到2mol/L2mol/L溶液中溶液中除去细胞质中的大部分物质。除去细胞质中的大部分物质。DNADNA初步纯化初步纯化 与等体积与等体积9595冷却酒精冷却酒精混合,析出白色丝状物混合,析出白色丝状物除去核蛋白、除去核蛋白、RNARNA、多糖等。、多糖等。DNADNA鉴定鉴定 二苯胺
32、,沸水浴,呈现蓝二苯胺,沸水浴,呈现蓝色色实验名称实验名称 选材选材及特点及特点提取分离提取分离原理原理鉴定试剂鉴定试剂/ /方法方法结果结果检测生物组织中的检测生物组织中的油脂油脂含量大、含量大、色浅色浅研磨破碎研磨破碎细胞,释细胞,释放物质放物质苏丹苏丹或或染染液液 特定的颜色反应特定的颜色反应橙黄橙黄或红或红色色检测生物组织中的检测生物组织中的糖类(淀粉、还原糖类(淀粉、还原性糖)性糖)碘液;碘液;斐林试斐林试剂剂蓝色;蓝色;砖红砖红色沉色沉淀淀检测生物组织中的检测生物组织中的蛋白质蛋白质双缩脲双缩脲试剂试剂紫色紫色物质物质光合色素的提取与光合色素的提取与分离分离含量大含量大易研磨易研磨
33、提取原理;提取原理;分离原理分离原理4 4条色条色素带素带DNADNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定含量大含量大粗提取;粗提取;进一步粗进一步粗提取提取二苯胺二苯胺试剂试剂溶液溶液变蓝变蓝色色破碎细胞破碎细胞提取分离提取分离鉴定反应鉴定反应破碎细胞壁、细胞膜、细胞器膜 如:动物细胞低渗涨破、洗涤剂处理等 植物细胞研磨、榨汁等可根据物理或化学性质的差异如:溶解度、热稳定性可根据特定的颜色反应如:二苯胺试剂鉴定DNA、斐林试剂与还原性糖反应产生砖红色沉淀二、生物体内物质的分离、鉴定技术PCR的概念的概念 PCRPCR( Polymerase Chain Reaction,Polymerase Cha
34、in Reaction,聚合酶链反聚合酶链反应)是指在体外,通过特异应)是指在体外,通过特异DNADNA引物延伸(扩增)引物延伸(扩增)核酸分子中某个特定区域的技术。核酸分子中某个特定区域的技术。 PCRPCR可在几小时内,将特定核酸序列扩增百万倍。可在几小时内,将特定核酸序列扩增百万倍。 “变性、退火、延伸”1.变性:双链DNA解链成为单链DNA2.退火:引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合3.延伸:以目的基因为模板,合成互补的新DNA链DNA片段的PCR扩增(及电泳)DNA片段的PCR扩增(及电泳) DNA聚合酶的催化特点DNA片段的PCR扩增(及电泳)PCR结果的鉴定:1.比
35、色法测DNA含量2.电泳法测DNA片段长度和大致含量DNA片段的PCR扩增(及电泳) 电泳是指带电颗粒在电场的作用下,向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。 电泳过程必须在一种支持介质中进行。目前使用得最多的是琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。 蛋白质电泳主要使用聚丙烯酰胺凝胶。DNA片段的PCR扩增(及电泳)电泳槽电泳槽DNA片段的PCR扩增(及电泳)电泳实验结果观察电泳结果,发黄色亮光的为观察电泳结果,发黄色亮光的为DNA条带条带M,maker,已知不同分子量的
36、,已知不同分子量的DNA对照对照 产物产物 M1000kb2000kbDNA片段的PCR扩增(及电泳)三、调查*调查人群中的遗传病调查人群中的遗传病调查转基因食品发展的现状调查体温的日变化规律调查青少年中常见的免疫异常(浙科)*模拟用标志重捕法进行种群密度的调查模拟用标志重捕法进行种群密度的调查(浙科)*探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化(略)*不同群落中土壤动物类群丰度的研究(浙科)调查当地农田生态系统中的能量流动情况调查社区、村镇或学校附近一个淡水区域的水质(浙科)考试说明的要求调查遗传学调查:群体调查、家系分析生态学调查:样方法、标志重捕法调查人群中的遗传病遗传病的群体调查是一项多学科的综合性调查研究,对于遗传病的预防有十分重要意义。查清群体中遗传病的种类、遗传病的发病率、致病基因频率和携带者频率是遗传病群体调查的重要内容之一。调查人群中的遗传病 调查目的 调查对象 调查结果 结果分析调查目的(以山东省
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