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文档简介

1、间接血凝试验（操作）间接血凝试验（操作）主要内容主要内容 一、目的要求一、目的要求 二、仪器及材料二、仪器及材料 三、方法与步骤三、方法与步骤一、目的要求一、目的要求 初步学会间接血凝的操作及结果判定。二、仪器材料二、仪器材料96孔110120V型医用血凝板、10100l可调微量移液器、加样头、微型振荡器、猪瘟间接血凝抗原（猪瘟正向血凝诊断液）、猪瘟标准阳性血清和阴性血清、被检血清（56水浴灭活30min）、2%兔血清PBS液（取pH7.6、0.01mol/LPBS98ml，灭能兔血清2ml，于4冰箱保存即成2%NRS液）。三、方法与步骤三、方法与步骤（以猪瘟的间接血凝为例）1.按表按表1进行

2、操作。进行操作。表1猪瘟间接血凝操作术式V型板孔号12345678血清稀释倍数1:21:41:81:161:321:641:128对照2%NRS (l )待检血清 (l )抗原 (l )50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 弃去50 25 25 25 25 25 25 25 25振荡1min 室温下（15以上）静置1.52h。三、方法与步骤三、方法与步骤2 2阴性和阳性对照阴性和阳性对照 在血凝板上的第12排孔加2 %NRS60l，取阴性血清20l加入后混匀，取出30l弃去，然后加入抗原25l，为阴性血清对照孔。三、方法与步骤三、方法与步骤2

3、 2阴性和阳性对照阴性和阳性对照 在血凝板的第12排第1孔加2%NRS70l，第2至第7孔各加2%NRS50l，取阳性血清10l，加第1孔混匀，并从中取出50l加入第2孔混匀后取出50l加入第3孔直到第7孔混匀后弃去50l，该孔的阳性血清稀释度为1:512，然后每孔各加抗原25l，此即为阳性血清对照。三、方法与步骤三、方法与步骤3 3判断方法和标准判断方法和标准先观察阴性血清对照孔和2%NRS对照孔，红细胞应全部沉入孔底，无凝集现象（）或呈（）的轻度凝集为合格；阳性血清对照应呈（）凝集为合格。在以上3孔对照合格的前提下，观察待检血清各孔的凝集程度，以呈“”凝集的被检血清最大稀释度为其血凝效价（血凝价）。血清的血凝价达到1:16为免疫合格。三、方法与步骤三、方法与步骤3 3判断方法和标准判断方法和标准“+”表示100%红细胞凝集“+” 表示75%红细胞凝集“

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