常用缓冲溶液配制方法

1、常用缓冲溶液配制方法常用缓冲溶液的配制方法1 甘氨酸盐酸缓冲液（L）X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pHXYpHXY5050505050505050甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含克/升。 2邻苯二甲酸盐酸缓冲液（ mol/L）X毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH(20)XYpH(20)XY555555555邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含克/升 3磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液pHL Na2HPO4（毫升）L柠檬酸（毫升）pHL Na2HPO4 （毫升）

2、L柠檬酸（毫升）Na2HPO4分子量 = ， mol/L溶液为克/升。Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液含克/升。C4H2O7·H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。 4柠檬酸氢氧化钠-盐酸缓冲液pH钠离子浓度（mol/L）柠檬酸（克）C6H8O7·H2O氢氧化钠(克)NaOH 97%盐酸（毫升）HCl（浓）最终体积（升）21021021021024528526684838383144186156160116106456810512610101010101010     使用时可以每升中

3、加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5柠檬酸柠檬酸钠缓冲液（ mol/L）pH   mol/L柠檬酸（毫升）   mol/L柠檬酸钠（毫升）pH   mol/L柠檬酸（毫升）   mol/L柠檬酸钠（毫升）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量， mol/L溶液为克/升。柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量， mol/L溶液为克/毫升。 6乙酸乙酸钠缓冲液（ mol/L） pH(18)  

4、mol/L NaAc(毫升)   mol/L HAc(毫升) pH(18)   mol/LNaAc(毫升)   mol/LHAc(毫升)Na2Ac·3H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。 7磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠磷酸二氢钠缓冲液（） pH   mol/L Na2HPO4(毫升)  mol/L NaH2PO4(毫升) pH   mol/L Na2HPO4(毫升)   mol/L NaH2PO4(毫升)

5、Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。Na2HPO4·12H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。NaH2PO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1，pKa2； Na2HPO4：pKa1，pKa2配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH14，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH68，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH1012。用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，

6、但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液的优点为：容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH 范围宽；pH 受温度的影响小；缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于。其缺点为：易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。（2）磷酸氢二钠磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）pHmol/L/15Na2HPO4(毫升)mol/L1M溶液为克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用

7、时注意将瓶盖严。 11硼酸硼砂缓冲液（硼酸根）pH硼砂（毫升）硼酸（毫升）pH硼砂（毫升）硼酸（毫升）硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;溶液（=硼酸根）含克/升。硼酸H3BO3,分子量=,溶液为克/升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。12甘氨酸氢氧化钠缓冲液（）X毫升甘氨酸+Y毫升加水稀释至200毫升pHXYpHXY50505050505050505050甘氨酸分子量=;溶液含克/升。 13硼砂-氢氧化钠缓冲液（硼酸根）X毫升硼砂+Y毫升加水稀释至200毫升pHXYpHXY505050505050硼砂Na2B4O7·10H2O,分子量=;

8、溶液为克/升。 14碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（）Ca2+、Mg2+存在时不得使用pH(毫升)(毫升)2037123456789987654321Na2CO2·10H2O分子量=;溶液为克/升。N2HCO3分子量=;溶液为克/升。 15“PBS”缓冲液pHH2ONaClNa2HPO4NaH2PO4100010001000100mlpH标准缓冲溶液 Standard pH Buffer Solutions名称(Name) 配  制 (Compounding way) 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0 5 10

9、15 20 25 30 35 40 草酸盐标准缓冲溶液 cKH3(C2O4)2·2H2O为L。称取四草酸钾KH3(C2O4)2·2H2O溶于无二氧化碳的水中，稀释至1000ml 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 45 50 55 60 70 80 90 95 - - 酒石酸盐标准缓冲溶液 在25时，用无二氧化碳的水溶解外消旋的酒石酸氢钾(KHC4H4O6)，并剧烈振摇至成饱和溶液 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 - - - - -

10、不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 45 50 55 60 70 80 90 95 - - 苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液 c(C6H4CO2HCO2K)为L，称取于±干燥 23h的邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），溶于无CO2的蒸馏水，并稀释至1000ml （注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 45 50 55 60 70 80 90 95 - -

11、 磷酸盐标准缓冲溶液 分别称取在±干燥23h的磷酸氢二钠（Na2HPO4）(353±001)g和磷酸二氢钾（KH2PO4） (339±001)g，溶于预先煮沸过1530min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml（注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 45 50 55 60 70 80 90 95 - - 硼酸盐标准缓冲溶液 c(Na2B4O7·10H2O)

12、称取硼砂（Na2B4O7·10H2O）(380± 001)g（注意：不能烘！），溶于预先煮沸过 1530min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。存放时要防止空气中的CO2的进入（注：可用于酸度计校准） 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 45 50 55 60 70 80 90 95 - - 氢氧化钙标准缓冲溶液 在25，用无二氧化碳的蒸馏水制备氢氧化钙的饱和溶液。氢

13、氧化钙溶液的浓度c1/2Ca(OH)2应在（）mol/L。氢氧化钙溶液的浓度可以酚红为指示剂，用盐酸标准溶液c(HCl)=L滴定测出。存放时要防止空气中的二氧化碳的进入。出现混浊应弃去重新配制 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 不同温度时的pH值(pH in different temperatures) 45 50 55 60 70 80 90 95 - - - - - - 注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation a

14、nd pH Values of Common pH Buffer Solutions序号(No.)溶液名称 (Solution name)配制方法 (Preparation)pH值(pH value)1 氯化钾-盐酸 ml mol/L HCl 与 ml mol/L  KCl混合均匀后，加水稀释至100 ml 2 氨基乙酸-盐酸 在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g，加480 ml浓盐酸，再加水稀释至1L 3 一氯乙酸-氢氧化钠 在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g  NaOH，溶解完全后再加水稀释至1 L 4 邻苯二甲酸氢钾-盐酸 把 ml mol/

15、L的邻苯二甲酸氢钾溶液与 ml mol/L HCl混合均匀，加水稀释至100 ml 5 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠 把 ml mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与  ml mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml 6 六亚甲基四胺-盐酸 在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g，加浓HCl 10 ml，再加水稀释至1 L 7 磷酸二氢钾-氢氧化钠 把 ml mol/L的磷酸二氢钾与 ml mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml 8 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把 ml mol/L的硼酸-氯化钾与 ml mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml 9 氯化铵-氨水 把 mol/L 氯化铵与 mol/L 氨水以2：1比例混合均匀 10 硼酸-氯化钾-氢氧化钠 把 ml mol/L 的硼酸