检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质[1]

1、2还原性糖还原性糖+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖非还原性糖：蔗糖、淀粉等非还原性糖：蔗糖、淀粉等+3如果植物组织中积累的成如果植物组织中积累的成分是淀粉和蔗糖，那就无分是淀粉和蔗糖，那就无法检测到还原性糖。有些法检测到还原性糖。有些植物尽管含有较多的还原植物尽管含有较多的还原性糖，但如果本身含有叶性糖，但如果本身含有叶绿素或其他色素，这些色绿素或其他色素，这些色素就会影响实验现象起到素就会影响实验现象起到遮盖作用。这些都不适宜遮盖作用。这些都不适宜做实验材料。做实验材料。苹果和梨是比苹果和梨是比较理想的实验较理想的实验材料。材

2、料。4苹果、研钵、小刀苹果、研钵、小刀斐林试剂斐林试剂A液、斐林试剂液、斐林试剂B液、二氧化硅液、二氧化硅量筒、试管架、吸管、试量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管管夹、试管、滴管漏斗、纱布漏斗、纱布火柴、酒精灯、三脚架、火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯石棉网、烧杯5二二. .目的要求：目的要求： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质肪和蛋白质1 1、还原糖的检测和观察：、还原糖的检测和观察： 选材选材 应该选择含应该选择含 量高量高. .颜色为颜色为 植物组织植物组织 以以苹果苹果. .梨梨为最好。为最好。糖糖白色或近于白色白色或近于白色制备

3、组织样液：制备组织样液：三三. .实验过程实验过程: :制浆：去皮、切块、研磨制浆：去皮、切块、研磨过滤：（用单层纱布）过滤：（用单层纱布）取液：取液：（mL）6可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，程中生成砖红色沉淀，说明植物组织说明植物组织样液中含有还原糖。样液中含有还原糖。注入注入2mL2mL苹果组苹果组织样液织样液注入注入1mL1mL刚配制好的刚配制好的斐林试剂斐林试剂水浴加热约水浴加热约2min2min检测步骤检测步骤变成变成砖红色砖红色50-650C的温水的温水结论：结论：甲乙液等量混匀甲乙液等量混匀振荡、混振荡、混合摇匀合摇匀呈呈现蓝

4、色现蓝色7 还原糖有还原糖有 。 试剂：试剂： . （甲液：（甲液：0.1g/ml 的的 , 乙液：乙液：0.05g/ml的的 .）甲乙液必须甲乙液必须 后再加入样后再加入样 液中，液中， 。 必须必须 。葡萄糖，果糖，麦芽糖葡萄糖，果糖，麦芽糖用水浴加热用水浴加热斐林试剂斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀等量混合均匀现配现用现配现用注意事项：注意事项：颜色变化：颜色变化：浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色脂肪脂肪+苏丹苏丹橘黄色橘黄色脂肪脂肪+苏丹苏丹红色红色取少量脂肪样液，加入苏取少量脂肪样液，加入苏丹丹，震荡，可看到溶液，震荡，可看到溶液呈了橘黄色，本实验我们呈了橘黄色，本实验我们用苏

5、丹用苏丹做染液。做染液。芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒芝麻，脂肪含量丰富，但种子颗粒太小，不利于切片制作。太小，不利于切片制作。玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也玉米，脂肪含量较少，种子颗粒也较小，因此也不适合做实验材料。较小，因此也不适合做实验材料。花生是比较理花生是比较理想的实验材料想的实验材料我们选用花生我们选用花生显微镜、镊子、毛显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、载玻片、盖玻片、培养皿培养皿50% %的酒精的酒精、苏、苏丹丹、清水、清水取一粒浸泡过的花生种子，去皮，分开两取一粒浸泡过的花生种子，去皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将片子叶，将子叶

6、切成薄片，然后用毛笔将这些材料放入盛有清水的培养皿中。这些材料放入盛有清水的培养皿中。取一片载玻片，用纱布擦净，用毛取一片载玻片，用纱布擦净，用毛笔取一片最薄的材料，放在载玻片笔取一片最薄的材料，放在载玻片中央。中央。用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹染液，染色染液，染色2至至3分钟，用吸水纸吸去花分钟，用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。生种子薄片周围的染液。在薄片上滴在薄片上滴1至至2滴体积分数为滴体积分数为50%的酒精，洗去附色，用吸水的酒精，洗去附色，用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。纸洗去花生子叶周围的酒精。在薄片上滴一滴清水，盖上在薄片上滴一滴清水，盖上

7、盖玻片，制成临时装片。盖玻片，制成临时装片。在低倍镜下寻找花生种子薄在低倍镜下寻找花生种子薄片的最薄处，将这部分移至片的最薄处，将这部分移至视野中央。视野中央。用显微镜观察花生种子用显微镜观察花生种子薄片。薄片。我们可以看到细胞中一个个我们可以看到细胞中一个个圆形的小颗粒，这就是脂肪圆形的小颗粒，这就是脂肪颗粒。颗粒。低倍镜下观察低倍镜下观察高倍镜下观察高倍镜下观察显微镜下观察到橘黄色的颗粒。显微镜下观察到橘黄色的颗粒。花生种子细胞中含有脂肪。花生种子细胞中含有脂肪。14 注意事项：注意事项： 切片要薄，切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。有的地

8、方清晰有的地方模糊。 酒精的作用是：酒精的作用是： 。 需使用显微镜观察需使用显微镜观察 使用不同的染色剂染色使用不同的染色剂染色时间时间不同，不同，颜色变化：颜色变化： 。洗去浮色洗去浮色橘黄色或红色橘黄色或红色蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂紫色络合物紫色络合物豆浆、蛋清、牛奶都是很豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。好的实验材料。本实验我们用蛋清做实验材料，在本实验我们用蛋清做实验材料，在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。不容易彻

9、底。试管架、试管、吸管试管架、试管、吸管蛋清稀释液蛋清稀释液双缩脲试剂双缩脲试剂A液、液、双缩脲试剂双缩脲试剂B液、液、量筒量筒Page 17LOGO3 3、蛋白质的检测和观察：、蛋白质的检测和观察： 选材选材 应该选择含应该选择含 丰富的丰富的豆浆豆浆或或鸡鸡 蛋清蛋清溶液。（避免材料自身的颜色对溶液。（避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖）实验变化颜色的掩盖）蛋白质蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液制备组织样液呈色反应呈色反应组织组织样液样液2mL2mL双缩脲试双缩脲试剂剂A A液液1mL1mL双缩脲试双缩脲试剂剂B B液液4 4滴滴摇匀后变摇匀后变成紫色成

10、紫色结论：结论：说明组织样液中存在蛋白质。说明组织样液中存在蛋白质。Page 18LOGO（3 3）注意事项：）注意事项： 试剂：试剂： （A液：液：0.1g/ml的的 ； B液：液： 0.01g/ml的的 ） 先加先加 ，再加，再加 。 B液要求量适中，否则液要求量适中，否则多余的多余的B液液将会将会与与A液液发发生反应生成生反应生成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色显色而遮盖原有的颜色。 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比双缩脲试剂双缩脲试剂A A液液1ml1mlB B液液4 4滴滴NaOH用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释

11、，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷实验后粘住试管壁，不易洗刷CuSO4蛋白质的检测结果Page 19LOGO斐林试剂与双缩脲试剂的比较：斐林试剂与双缩脲试剂的比较：A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液，再加B液，不需加热甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂Page 20LOGO问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液

12、只能加34滴而不能滴而不能过量？过量？ 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应，使溶液呈蓝色，反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，时间太长，Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。无法参与反应。l深化深化用量筒量取两毫升的蛋清稀用量筒量取两毫升的蛋清稀释液。再用脲尿试剂释液。再用脲尿试剂A液液将量取的蛋清液和双缩脲试将量取的蛋清液和双缩脲试剂剂A液分别倒入到试管中，震液分别倒入到试管中，震荡均匀，此时可

13、见试管内仍荡均匀，此时可见试管内仍然是透明的。然是透明的。再向试管中加入再向试管中加入1至至2滴双滴双缩脲试剂缩脲试剂B液。液。震荡均匀，此时可见试管内震荡均匀，此时可见试管内溶液呈紫色吗，这就表明蛋溶液呈紫色吗，这就表明蛋清液中含有蛋白质。清液中含有蛋白质。蛋清液呈紫色。蛋清液呈紫色。蛋清液中含有蛋白质。蛋清液中含有蛋白质。Page 23LOGO4 4、淀粉的检测和观察：、淀粉的检测和观察： 取材：取材： 马铃薯匀浆马铃薯匀浆检测检测组织组织样液样液2mL2mL碘液碘液2 2滴滴结论：结论：说明组织样液中存在淀粉。说明组织样液中存在淀粉。注意：注意：常用材料：马铃薯常用材料：马铃薯 试剂：试

14、剂： 。颜色变化：。颜色变化： 。碘液碘液变蓝变蓝摇匀后变摇匀后变成蓝色成蓝色Page 24LOGO1.在下列四支试管中分别加入一些物质，在下列四支试管中分别加入一些物质，甲试管甲试管:豆浆豆浆;乙试管乙试管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙试丙试管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁试管丁试管:人血液中的红人血液中的红细胞和蒸馏水细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是有紫色反应的是( ) A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 对应训练对应训练DPage 25LOGO2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用 Page 26LOGO3、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是理的是 ( ) A青苹果汁中有淀粉，不含还原糖青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉熟苹果汁