动物实验基本操作技术

1、2022-4-81第四部分 动物实验基本操作技术常规采血方法给药途径与方法麻醉方法处死方法2022-4-82第一节 实验动物的抓取与固定2022-4-83小鼠固定盒固定2022-4-84大鼠固定盒固定2022-4-85二、豚鼠的抓取固定法2022-4-86三、家兔的抓取固定法2022-4-872022-4-88第二节 性别鉴定2022-4-89Female Male 2022-4-810第三节 年龄的大致判断2022-4-8112022-4-8122022-4-8132022-4-8142022-4-8152022-4-8162022-4-8172022-4-8182022-4-8192022

2、-4-8202022-4-821 三、家兔 家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。2022-4-822 五、犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即

3、开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。 2022-4-8232022-4-824第四节 妊娠检查 雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断(pregnancy diagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发

4、育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确，且及早确诊更为重要。2022-4-8252022-4-826第五节 分组与编号 动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。 一、随机分组 （一） 当分为二组时 例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。 分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个随机数字，如下：2022-4-827 动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字：78 38

5、69 57 91 0 37 45 66 82 65 41 组 别：乙 乙 甲 甲 甲 乙 甲 甲 乙 乙 甲 甲 现在以随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组，则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲组，而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字不等，继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之(因甲组原分配7只)得6，即把原分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。2022-4-828 如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后各组鼠的编号为： 组别

6、 鼠的编号 甲组 3 4 5 7 8 12 乙组 1 2 6 9 10 112022-4-829 (二)当分为三组时 例：设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为A、B、C三组。 分组方法：假设所定的点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字： 动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字：08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10 除 3 余数： 2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1 组 别： B C A B C B C C A A C A 调整

7、组别：B2022-4-8302022-4-831 （三） 当每个动物一组时： 例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试用完全随机法将其每只分为一组。 分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即将余数写下。除尽的，写余数时即将其除数写下。如下： 2022-4-832 随机数字 33 46 9 52 68 7 除 数 6 5 4 3 2 1 余 数 3 1 1 1 2 1 随机排列 C A B D F E 上列第一个随机数字余数为3，意即将6个字母中列在第三位的字母C写在该数下，第二个数

8、宇的余数为1，即在剩下的5个字母列在第一位的A写在该数字下面，余此类推。2022-4-8332022-4-834 右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色表示个位数，红色表示十位数。2022-4-8352022-4-836第六节 常规采血方法 一、大、小鼠的采血方法 1颈静脉或颈动脉采血 2股静脉或股动脉采血 3心脏采血 4尾部采血 5眼眶采血 6断头取血2022-4-837颈静脉或颈动脉采血尾部采血2022-4-838心脏采血2022-4-839二、豚鼠的采血方法 1耳缘剪口采血 2心脏采血方法同大、小鼠。 3股动脉采血方法同大、小鼠。 4后肢背中足静脉采血2022-4-840三、家兔的采血方法

9、 1心脏采血 2耳中央动脉采血 3耳静脉采血2022-4-841 四、狗、猫的采血方法 1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血 2股动脉采血 3. 心脏采血同大、小鼠心脏采血 4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血2022-4-8422022-4-8432022-4-844取少量血2022-4-845取中量血2022-4-846取大量血2022-4-8474. 最大安全采血量与最小致死采血量2022-4-848第七节 给药途径与方法 在动物实验过程中，应根据不同的实验目的、动物种类、药物类型来决定动物的给药途径与方法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，不同方法按给药途径又分为很

10、多具体类型。注射法分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主要给药途径和方法做一介绍。2022-4-8492022-4-850为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。2022-4-8512022-4-8522022-4-8532022-4-854几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升） 2022-4-8552022-4-8562022-4-8572022-4-858

11、2022-4-8592022-4-8602022-4-8612022-4-8622022-4-8632022-4-864第八节 麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉剂 动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥发 性 麻 醉 剂 和 中 药 麻 醉 剂 。2022-4-8652022-4-8662022-4-8672022-4-8682022-4-8692022-4-8702022-4-8712022-4-8722022-4-8732022-4-874第九节 处死方法 当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也