糖的测定-高效液相色谱法

1、 食品营养与检测专业教学资源库 目录页2一一二二三三四四试剂和材料仪器和设备分析步骤分析结果表述 食品营养与检测专业教学资源库 1.1.乙腈乙腈 2.2.乙腈乙腈：色谱纯：色谱纯。 3.3.标准溶液标准溶液 （1 1）乳糖标准贮备液（）乳糖标准贮备液（20mg/20mg/mLmL）：称取在）：称取在94942 2烘箱中干燥烘箱中干燥2h2h的乳糖标样的乳糖标样2g2g（精确至（精确至0.1mg0.1mg），溶于水中，用水稀释至），溶于水中，用水稀释至100mL 100mL 容量瓶容量瓶中。放置中。放置4 4冰箱中。冰箱中。 （2 2）乳糖标准工作液：分别吸取乳糖标准贮备液）乳糖标准工作液：分别

2、吸取乳糖标准贮备液0 0 mLmL，1 1 mLmL，2mL2mL，3mL3mL，4mL4mL，5mL5mL于于10mL 10mL 容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成乳糖标准容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成乳糖标准系列工作液，浓度分别为系列工作液，浓度分别为0mg/0mg/mLmL，2mg/2mg/mLmL，4mg/4mg/mLmL，6mg/6mg/mLmL，8mg/8mg/mLmL，10mg/10mg/mLmL。（试剂和材料）3 检测的试剂和材料 食品营养与检测专业教学资源库 （3 3）蔗糖标准溶液（）蔗糖标准溶液（10 mg/10 mg/mLmL）：称取在）：称取在105 105 2 2 烘

3、箱中干燥烘箱中干燥2h 2h 的蔗糖标样的蔗糖标样1 g1 g（精确到（精确到0.1 mg0.1 mg），溶于水中，用水稀释至），溶于水中，用水稀释至100mL100mL容容量瓶中。放置量瓶中。放置4 4 冰箱中。冰箱中。 （4 4）蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶液）蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶液0mL0mL，1mL1mL，2mL2mL，3mL3mL，4mL4mL，5mL5mL于于10 10 mLmL 容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成蔗糖标准系列容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为工作液，浓度分别为0mg/0mg/mLmL，1mg/1mg/mLmL，2mg/

4、2mg/mLmL，3mg/3mg/mLmL，4mg/4mg/mLmL，5mg/5mg/mLmL。（试剂和材料）4 检测的试剂和材料 食品营养与检测专业教学资源库 1. 1. 天平（感量为天平（感量为0.1 mg0.1 mg）2. 2. 高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器3. 3. 超声波振荡器超声波振荡器（仪器和设备）5 检测的仪器和设备 食品营养与检测专业教学资源库 （分析步骤）6 1. 试样处理固态试样固态试样1g1g或液态试样或液态试样2.5g2.5g50mL50mL容量瓶中容量瓶中加加15mL15mL、50506060水

5、水溶解溶解超声超声波振荡波振荡10min10min 乙腈定容乙腈定容静置数分钟静置数分钟过滤。过滤。取取5.0mL5.0mL滤液滤液 10mL10mL容量瓶容量瓶中中乙腈定容乙腈定容0.45m0.45m滤膜滤膜过滤过滤滤液供色谱分析。滤液供色谱分析。 食品营养与检测专业教学资源库 （分析步骤）7 2. 测定参考色谱条件 气流量：气流量：2.5 L/min2.5 L/min； 色谱柱：氨基柱色谱柱：氨基柱4.6mm 250mm，5m ； 示差折光检测器条件：温度示差折光检测器条件：温度33 33 3737； 进样量：进样量：10L10L； 柱温：柱温：3535； 流速：流速：1mL/min1mL

6、/min； 流动相：乙腈流动相：乙腈: :水水=70:30 =70:30 ； 蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：85859090； 撞击器：关。撞击器：关。 食品营养与检测专业教学资源库 （分析步骤）8 2. 测定标准曲线的制作将标准系列工作液分别注入高将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰面积或峰峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐标，以标准工作液的高为纵坐标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。浓度为横坐标绘制标准曲线。标准曲线示例图标准曲线示例图 食品营养与检测专业教学资源库 （分析步骤）9 2. 测定试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱将试样溶液注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。的浓度。 食品营养与检测专业教学资源库 （分析结果表述）10 计算公式 cV100n X= m1000 式中：式中： X