风湿病与免疫111教学教材

1、风湿病与免疫111（二）结缔组织病（二）结缔组织病(CTD) 广义：指体内结缔组织各种疾病的总称。广义：指体内结缔组织各种疾病的总称。 狭义：指由于免疫反应等引起的发生于疏松狭义：指由于免疫反应等引起的发生于疏松 结缔组织的一类疾病。结缔组织的一类疾病。 目前我们所指的目前我们所指的CTD系指狭义的系指狭义的CTD，包括：，包括： 红斑狼疮，皮肌炎红斑狼疮，皮肌炎/多肌炎，硬皮病，类风湿多肌炎，硬皮病，类风湿性关节炎，混合性结缔组织病性关节炎，混合性结缔组织病, 干燥综合征干燥综合征, 白塞病白塞病, 结节性多动脉炎及重叠综合征等。结节性多动脉炎及重叠综合征等。(三）自身免疫病三）自身免疫病(

2、Autoimmune diease)： 可分为系统性和器官特异性两大类；可分为系统性和器官特异性两大类；具有以下特点：具有以下特点： 病变过程中有淋巴细胞对自身抗原的识别；病变过程中有淋巴细胞对自身抗原的识别； 产生包括自身免疫细胞在内的组织损伤；产生包括自身免疫细胞在内的组织损伤；自身反应性自身反应性T细胞参与病变过程细胞参与病变过程;发病过程几乎总有发病过程几乎总有 CD4+自身反应性自身反应性T细胞参与细胞参与. 二、二、 风湿病相关的自身抗体风湿病相关的自身抗体命名：尚未统一。命名：尚未统一。1 以对应抗原在细胞中所在的部位命名：以对应抗原在细胞中所在的部位命名： 如抗核如抗核抗体（抗

3、体（ANA），抗胞浆抗体，抗细胞膜抗体。），抗胞浆抗体，抗细胞膜抗体。2 以对应抗原的生物化学特性命名：以对应抗原的生物化学特性命名： 如抗如抗DNA抗抗体，抗组蛋白抗体。体，抗组蛋白抗体。3 以第一个检出该抗体患者或作者的名以第一个检出该抗体患者或作者的名 字缩写字缩写 命名：命名： 如抗如抗Sm抗体，抗抗体，抗Ro抗体。抗体。4 以其相关疾病的名称命名：以其相关疾病的名称命名： 如抗如抗SS-A抗体，抗抗体，抗SS-B抗体。抗体。风湿病常见的自身抗体、对应抗原及临床意义：风湿病常见的自身抗体、对应抗原及临床意义：n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相关疾病n细胞核：细胞核

4、：n抗核抗体抗核抗体(ANA) 各种细胞核及其组分各种细胞核及其组分 多种风湿病多种风湿病n抗抗dsDNA抗体抗体 dsDNA SLE(40%70%),高高n 滴度时为标记抗体滴度时为标记抗体n抗抗ssDNA抗体抗体 ssDNA SLE（70%）,药物药物n 引起的引起的LE（80%）n抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体 H1,H2A,H2B,H3,H4; SLE(50%70%)n DNA组蛋白复合体组蛋白复合体 药物引起的药物引起的 LE( n 95%),RA(15%) n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相关疾病n抗抗Sm抗体抗体 与与U1,U2,U4U6 SLE(30%)n Sn

5、RNAs相连的分子量相连的分子量 为标记抗体为标记抗体n 为为29(B), 28(B),16(D),n 13(E)kDa的蛋白的蛋白n抗抗nRNP抗体抗体 与与U1SnRNA相连的相连的 SLE(30%40%) n 分子量为分子量为70,33(A), MCTD(95%),RPn 22(C) kDa的蛋白的蛋白n抗抗SS-A/Ro抗体抗体 与与Y1,Y3Y5RNAs SLE(35%), n 相连的分子量为相连的分子量为60, SCLE(70%90%)n 52kDa的蛋白的蛋白 NLE（90%），）， n SS(60%),光敏感光敏感n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相关疾病n

6、抗抗SS-B/La抗体抗体 与与RNA多聚酶多聚酶 SLE（15%）n 转录产物复合的分子转录产物复合的分子 NLE（75%）n 量为量为48kDa的蛋白的蛋白 SS（40%）n抗抗Ku抗体抗体 DNA结合蛋白，结合蛋白， SLE（10%）n 分子量为分子量为86， PM/SSc重叠综合征重叠综合征 n 66kDa的蛋白的蛋白 (26%)n抗抗PCNA抗体抗体 DNA多聚酶多聚酶的辅的辅 SLE（3%）n 助蛋白，分子量为助蛋白，分子量为n 36kDa，只出现于，只出现于n 细胞增殖时细胞增殖时n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相关疾病n抗抗Scl-70抗体抗体 DNA拓扑

7、异构酶拓扑异构酶 SSc（70%）n 分子量为分子量为100kDa的的 为标记抗体为标记抗体n 天然蛋白及其天然蛋白及其70 kDan 的降解产物的降解产物n抗着丝点抗体抗着丝点抗体 着丝点上分子量为着丝点上分子量为 CREST n 17,80,140kDa的蛋白的蛋白 (70%90%)n 为标记抗体，为标记抗体， n SSc（8%）n抗抗PM-Scl抗体抗体 分子量为分子量为110至至20 SSc（3%）n kDa的的11种蛋白种蛋白 PM/SSc重叠综合征重叠综合征n 复合体复合体 (24%)n DM/PM(8%)n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相关疾病n抗抗Jo-1

8、抗体抗体 组氨酰组氨酰tRNA合成酶，合成酶， PM(20%40%)n 分子量为分子量为50kDa 为标记抗体为标记抗体n 的蛋白的蛋白 DM少见少见n抗抗PL-7抗体抗体 苏氨酰苏氨酰tRNA合成酶，合成酶， DM/PM(3%5%)n 分子量为分子量为80kDa的蛋白的蛋白n抗抗PL-12抗体抗体 丙氨酰丙氨酰tRNA合成酶，合成酶， DM/PM（3%）n 分子量为分子量为110kDa的蛋白的蛋白n抗抗Mi-2抗体抗体 分子量为分子量为61和和53kDa DM(成人成人22%,n 的蛋白的蛋白 儿童儿童14%),n 为标记抗体为标记抗体n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相

9、关疾病n细胞浆：细胞浆：n抗抗Ribosomal抗体抗体 与核糖体与核糖体(Ribosomal) SLE（10%）n 相关的分子量为相关的分子量为38, 有人认为系标记有人认为系标记 n 16,15kDa的蛋白的蛋白 抗体抗体n抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体 心磷脂（线粒体心磷脂（线粒体 SLE(30%40%)n 内膜含量多）内膜含量多） RA（30%）n抗体种类抗体种类 对应抗原对应抗原 主要相关疾病主要相关疾病n细胞膜细胞膜n抗红细胞抗体抗红细胞抗体 细胞膜成分等细胞膜成分等 SLEn抗血小板抗体抗血小板抗体 细胞膜成分等细胞膜成分等 SLEn抗白细胞抗体抗白细胞抗体 细胞膜成分等细胞膜成分等

10、SLEn抗神经元抗体抗神经元抗体 细胞膜成分等细胞膜成分等 SLEn抗肌细胞抗体抗肌细胞抗体 细胞膜成分等细胞膜成分等 SLE,PM/DM,n RA风湿病自身抗体的常用检测方法：风湿病自身抗体的常用检测方法： 1 、间接免疫荧光法（、间接免疫荧光法（IIF）：）：n底物常选用底物常选用Hep-2,Hela细胞，也有的单位仍使用大白细胞，也有的单位仍使用大白鼠肝印片。常用于检测鼠肝印片。常用于检测ANA。通常滴度。通常滴度1:80有临床有临床意义。意义。n ANA的核型主要有四种：的核型主要有四种：n均质型（均质型（Homogeneous）：常见抗原为脱氧核糖核）：常见抗原为脱氧核糖核蛋白（蛋白

11、（DNP），组蛋白，偶见），组蛋白，偶见ds-DNA。n周边型（周边型（Periphral）：主要抗原为）：主要抗原为dsDNA，其次为，其次为ssDNA，DNP或组蛋白。或组蛋白。n斑点型斑点型(Speckled)：常见抗原为：常见抗原为Sm,RNP,Ro,La抗原。抗原。n核仁型核仁型(Nucleolar) ：常见抗原为：常见抗原为Scl-70,Ku抗原等核抗原等核仁成分。仁成分。2、免疫印迹测定（、免疫印迹测定（IBT）：也称）：也称Western Blotting n是将是将SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-自身免疫自身免疫细胞细胞PAGE）、蛋白转移电泳（印迹电

12、泳）和）、蛋白转移电泳（印迹电泳）和固相免疫标记技术融合为一体的分析技术。固相免疫标记技术融合为一体的分析技术。该技术包括三个基本步骤：该技术包括三个基本步骤：n聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质进行分离聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质进行分离;n将凝胶电泳已分离的蛋白质印到固相膜上将凝胶电泳已分离的蛋白质印到固相膜上;n将转印到固相膜上的蛋白质区带进行免疫将转印到固相膜上的蛋白质区带进行免疫检测和鉴定。检测和鉴定。3 、对流免疫电泳法（、对流免疫电泳法（CIE）4 、酶联免疫吸附试验（、酶联免疫吸附试验（ELISA）(四四)自身抗体产生的机制：自身抗体产生的机制： 比较公认的观点认为：自身抗体是由自身抗原

13、驱动比较公认的观点认为：自身抗体是由自身抗原驱动产生的产生的 (Antigen driven antibody production)。 自身抗原是细胞中重要的成分，行使重要的功能。自身抗原是细胞中重要的成分，行使重要的功能。例如：例如：Scl-70抗原为抗原为DNA拓扑异构酶拓扑异构酶 Jo-1抗原为组氨酰抗原为组氨酰tRNA合成酶合成酶 PL-7抗原为苏氨酰抗原为苏氨酰tRNA合成酶合成酶 PL-12抗原为丙氨酰抗原为丙氨酰tRNA合成酶合成酶 PCNA抗原为抗原为DNA多聚酶多聚酶的辅助蛋白的辅助蛋白 许多自身抗原在许多自身抗原在DNA复制、转录、复制、转录、mRNA合成和合成和蛋白翻译

14、等过程中起重要作用。蛋白翻译等过程中起重要作用。 采用自身抗体筛选鉴别采用自身抗体筛选鉴别cDNA表达文库、分离表达文库、分离cDNA克隆的方法，可鉴定自身抗原的结构，探讨其功能。克隆的方法，可鉴定自身抗原的结构，探讨其功能。几种风湿病的比较几种风湿病的比较比较比较项目项目 SLE SLE SSc SScDM/PMDM/PMMCTDMCTD SS SS RA RA皮皮 损损蝶形红斑蝶形红斑 甲周红斑甲周红斑 指、趾腹指、趾腹红斑红斑 盘状红斑盘状红斑 口腔溃疡口腔溃疡 光敏感光敏感皮肤硬化皮肤硬化超过掌指超过掌指关节以上，关节以上，对称发生；对称发生； 或手指硬或手指硬化，指端化，指端凹陷性疤

15、凹陷性疤痕或指腹痕或指腹萎缩萎缩双上睑暗双上睑暗紫红色水紫红色水肿性斑疹肿性斑疹Gottron丘疹丘疹 皮肤异色皮肤异色病样表现病样表现手指肿胀手指肿胀 手背肿胀手背肿胀 手指硬化手指硬化 面部肿胀面部肿胀口干、眼口干、眼干、舌质干、舌质红绛苔少红绛苔少皮下结节皮下结节n 比较比较项目项目 SLE SLE SSc SScDM/PMDM/PMMCTDMCTD SS SS RA RA关 节关 节炎炎多发，一多发，一般无畸形般无畸形多发，可多发，可有手指不有手指不规则畸形规则畸形 可有可有多发，一多发，一般无畸形般无畸形 可有可有对称性手、对称性手、足、腕、足、腕、踝等小关踝等小关节受损，节受损，手

16、指关节手指关节成梭形或成梭形或畸形，畸畸形，畸形最常见形最常见的是掌指的是掌指关节半脱关节半脱位和手指位和手指尺侧偏斜尺侧偏斜比较比较项目项目 SLE SLE SSc SScDM/PMDM/PMMCTDMCTD SS SS RA RA肌肌 炎炎 较轻较轻较轻，较轻，肌肉可肌肉可有硬化有硬化轻重不轻重不一，肌一，肌无力最无力最常见，常见，四肢近四肢近端或肩端或肩胛带、胛带、骨盆带骨盆带肌易受肌易受累及，累及，出现各出现各种运动种运动障碍障碍可有重可有重度肌炎度肌炎 少见少见 可有可有比较比较项目项目SLESLESScSScDM/PMDM/PMMCTDMCTDSSSSRARA内脏内脏器官器官损害损

17、害 狼疮肾炎狼疮肾炎脑损害脑损害 血液系统血液系统损害损害 狼疮肺炎狼疮肺炎 心肌炎心肌炎心包炎心包炎 胸膜炎胸膜炎肺纤维化肺纤维化肺心病肺心病 弥散功能弥散功能障碍障碍 胃肠损害胃肠损害 心肌炎心肌炎心包炎心包炎 心肌纤维心肌纤维化化食道蠕动食道蠕动障碍障碍间质性肺间质性肺炎炎 肺纤维化肺纤维化肺动脉高肺动脉高压压 肺纤维化肺纤维化 肺弥散功肺弥散功能降低能降低 心肌炎心肌炎心包炎心包炎肾小管功肾小管功能缺陷能缺陷 间质性肺间质性肺炎炎 消化道损消化道损害害间质性肺间质性肺炎炎 心包炎心包炎 心肌炎心肌炎比较比较项目项目SLESLESScSScDM/PMDM/PMMCTDMCTDSSSSRA

18、RA实验实验检查检查特点特点抗抗dsDNAdsDNA抗体抗体(+) (+) 抗抗SmSm抗体抗体(+) (+) LELE细胞细胞(+) (+) ANA(+) ANA(+) 抗心磷脂抗心磷脂抗体抗体(+) (+) 梅毒血清梅毒血清假阳性假阳性蛋白尿蛋白尿尿细胞管尿细胞管形形 贫血贫血WBCWBC减少、减少、血小板减血小板减少少 LBT(+) LBT(+) C C3 3减低减低ANAANA（+ +） 抗抗Scl-70Scl-70抗体抗体(+)(+)抗着丝点抗着丝点抗体抗体(+) (+) 食道钡透食道钡透示蠕动降示蠕动降低低 肺纤维化肺纤维化CPKCPK，ASTAST，ALT LDH ALT LDH

19、 ，ALDALD可增可增高高 24h24h尿肌尿肌酸酸200mg 200mg 血血尿肌酐减尿肌酐减少少抗抗Jo-1Jo-1抗体抗体(+)(+)抗抗PM-SclPM-Scl抗体抗体(+)(+)抗抗Mi-2Mi-2抗抗体体(+) (+) 抗抗ANAANA（+ +） 肌电图：肌电图：肌病图形肌病图形抗抗U U1 1-RNP-RNP抗体抗体(+) (+) 抗抗SmSm抗体抗体(-) (-) DLcoDLco70% 70% ANAANA（+ +）抗抗SS-ASS-A抗抗体体(+) (+) 抗抗SS-BSS-B抗抗体体(+)(+)口干证据口干证据唾液流量唾液流量下降，腮下降，腮腺影象异腺影象异常，小唇常，

20、小唇腺淋巴细腺淋巴细胞灶胞灶眼干证据眼干证据SchirmerSchirmer试验试验(+), (+), 泪膜破裂泪膜破裂时间减少时间减少, ,角膜活角膜活体染色体染色(+)(+)RF(+)RF(+)X X线检查线检查: :关节间隙关节间隙狭窄狭窄, ,关关节面模糊节面模糊, ,骨质受骨质受侵蚀侵蚀比较比较项目项目SLESLESScSScDM/PMDM/PMMCTDMCTDSSSSRARA诊诊 断断ARA1982标准标准 蝶形红斑蝶形红斑; 盘状红斑盘状红斑; 光敏感光敏感; 口腔或鼻口腔或鼻腔溃疡腔溃疡; 关节炎关节炎; 浆膜炎浆膜炎; 肾损害肾损害; 中枢神经中枢神经损害损害;血液系统血液系

21、统异常异常; LE细胞细胞(+)或抗或抗dsDNA 抗体抗体(+) 或或 抗抗Sm抗体抗体(+)或梅毒或梅毒血清假血清假(+) ANA(+) 符合四项符合四项以上或相以上或相继出现继出现Masi1980标标准准 主要标准：主要标准： 对称性手对称性手指或掌指指或掌指关节或关节或 跖跖趾关节趾关节 近端的皮近端的皮肤增厚、肤增厚、绷紧硬化绷紧硬化次要标准次要标准: 手指硬化手指硬化，指端凹，指端凹陷性疤痕陷性疤痕或指垫实或指垫实质丧失质丧失 双侧肺底双侧肺底纤维化纤维化符合主要符合主要标准或两标准或两个次要标个次要标准准Bohan和和Peter 1975标准标准 对称性近对称性近端肌无力端肌无力

22、; 血清肌浆血清肌浆酶增高酶增高; 典型肌电典型肌电图异常图异常; 典型肌活典型肌活检异常检异常; 典型的典型的DM皮疹皮疹确诊确诊DM除除有皮疹外有皮疹外,尚需具备尚需具备三条；三条； 确诊确诊PM，除皮疹外除皮疹外尚需具备尚需具备四条四条Sharp1986年标准年标准 肌炎严重肌炎严重 肺部损害：肺部损害： DLco70% 肺动肺动脉高压或脉高压或 肺活检示肺活检示血管增殖血管增殖性损害性损害 雷诺现象雷诺现象或食道蠕或食道蠕动功能动功能手肿胀或手肿胀或手指硬化手指硬化抗抗ENA抗抗体滴度体滴度1:10000且且抗抗U1-RNP 抗体抗体(+)抗抗Sm抗体抗体(-)符合符合 4项项 干燥性角干燥性角结膜炎结膜炎2项项:滤纸滤纸试验试验(+) 泪膜破裂泪膜破裂时间减少时间减少 角膜活体角膜活体染色增多染色增多 口干燥征口干燥征2项项: 唾唾液流量下液流量下降降 唇腺唇腺炎炎:含含1个个灶性淋巴灶性淋巴细胞浸润细胞浸润腮腺造影腮腺造影异常异常 抗抗SS-A抗体抗体(+)