维生素C含量测定方法综述精学习教案

1、维生素维生素C含量含量(hnling)测定方法综述精测定方法综述精第一页，共50页。第1页/共50页第二页，共50页。第2页/共50页第三页，共50页。第3页/共50页第四页，共50页。CCCHOHOCHOOCHHOCH2OH第4页/共50页第五页，共50页。第5页/共50页第六页，共50页。第6页/共50页第七页，共50页。来测定维生素CCCOHOH第7页/共50页第八页，共50页。 原理原理(yunl)2，6-二氯靛酚是一种染料，其氧化型在酸性(sun xn)介质中为红色，碱性介质中为蓝色，与Vc反应后，生成无色的还原型酚亚胺，因此，在酸性(sun xn)条件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶

2、液显玫瑰红色，即为终点；无需另加指示剂。第8页/共50页第九页，共50页。方法方法(fngf)取本品适量（约相当于Vc50mg），用适量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸(c sun)试液20ml,再用水稀释置刻度，摇匀；精密量取稀释液适量（约相当于Vc2mg）置50ml的锥形瓶中,加偏磷酸-醋酸(c sun)试液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液显玫瑰红色,并持续5s不褪；空白试验：取偏磷酸-醋酸(c sun)试液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。计算： (V-V0) F T WW 标示(bio sh)量 标示量%=反应摩尔比反应摩尔比100第9页/共

3、50页第十页，共50页。CCCHOHOCHOOCHHOCH2OHOClClNOHOHClClNOHCCOCHCOOOCHCH2OHHO 维生素C 2,6-二氯酚靛酚 维生素C 2,6-二氯酚靛酚（还原型） （氧化(ynghu)型，粉红色） （氧化(ynghu)型） （还原型） + + = 第10页/共50页第十一页，共50页。第11页/共50页第十二页，共50页。222234622IS OIS O第12页/共50页第十三页，共50页。第13页/共50页第十四页，共50页。第14页/共50页第十五页，共50页。第15页/共50页第十六页，共50页。第16页/共50页第十七页，共50页。第17页/

4、共50页第十八页，共50页。第18页/共50页第十九页，共50页。HHHHHH第19页/共50页第二十页，共50页。第20页/共50页第二十一页，共50页。第21页/共50页第二十二页，共50页。第22页/共50页第二十三页，共50页。第23页/共50页第二十四页，共50页。原理原理(yunl)方法方法(fngf)结果结果(ji gu)维生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有显著差异，而片剂辅料旋光度保持不变差示旋光法消除辅料的影响，直接测出该制剂的含量讨论讨论与与第24页/共50页第二十五页，共50页。方法方法(fngf)TEXT1）标准溶液的配制准确称取维生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸钠

5、0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷却(lngqu)的蒸馏水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的维生素C标准溶液。TEXT原理原理(yunl)方法方法结果结果讨论讨论与与第25页/共50页第二十六页，共50页。2）比旋光度与溶液pH值的关系量取10.0mL维生素C标准液于50mL量瓶中,用水稀释至50mL。测定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氢氧化钠(qn yn hu n)固体(每次约50mg),每次溶解后,测定一次溶液的pH及其旋光度,得到维生素C溶液的pH及旋光度关系原理原理(yunl)方法方法(fngf)结果结果讨论讨论与与第26页/共50页第二十七页，共50页。选定

6、选定(xun dn)pH为为2.2和和6.2第27页/共50页第二十八页，共50页。2）差示旋光度与溶液浓度(nngd)关系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的维生素C标准液各两份,分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容；一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容，静置3min后,用220mm测定管，以前者为空白，测定后者的差示旋光度(a)。文献结果：线性方程为a=0 205*C+ 005，r=09964原理原理(yunl)方法方法(fngf)结果结果讨论讨论与与第28页/共50页第二十九页，共50页。3）辅料干扰试验取混合(hnh)辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、

7、EDTA、糊精等按处方比例混匀)两份分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲液定容,一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容,滤去不溶物,滤液在两种pH值测定差示旋光度。文献结果：辅料的差示旋光度为零，说明辅料对维生素C含量的测定不干扰。原理原理(yunl)方法方法(fngf)结果结果讨论讨论与与第29页/共50页第三十页，共50页。4）稳定性试验(shyn)同一测试样品，在120min内，每隔3min测定一次差示旋光度。文献结果：差示旋光度基本不变原理原理(yunl)方法方法(fngf)结果结果讨论讨论与与第30页/共50页第三十一页，共50页。5）回收率试验精密称取维生素C精制品5

8、00.0mg两份，分别(fnbi)置于50mL容量瓶中，各加入20mg辅料，分别(fnbi)用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液，测定差示旋光度。文献结果：平均回收率为97.8，变异系数cv为1.03原理原理(yunl)方法方法(fngf)结果结果讨论讨论与与第31页/共50页第三十二页，共50页。方法方法(fngf)TEXT6）样品测定(cdng)取维生素C片剂10片，称重研碎后分别用盐酸盐缓冲液及磷酸盐缓冲液配制成50mL溶液(相当于含Vc 20mg/mL)，滤去不溶物，测定(cdng)滤液的差示旋光度，根据回归方程计算其含量。TEXT原理原理(yunl)讨论讨论方法方法结果结果

9、与与第32页/共50页第三十三页，共50页。方法方法(fngf)TEXT1）维生素易被氧化,空气及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液时使用新沸冷却水,同时加人EDTA作为稳定剂；2）样品测定时，片剂部分物质不能完全溶解，必须过滤除去(ch q)，然后测定滤液的差示旋光度。TEXT原理原理(yunl)讨论讨论方法方法结果结果与与第33页/共50页第三十四页，共50页。第34页/共50页第三十五页，共50页。第35页/共50页第三十六页，共50页。第36页/共50页第三十七页，共50页。第37页/共50页第三十八页，共50页。操作方法与结果（1）试纸的制备 2,6-二氯靛酚钠 (DCP-Na)溶于

10、无水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，滤纸在盛有DCP-Na乙醇溶液的展开缸中浸渍3min，边浸边摇展开缸，使滤纸均匀着色，充分被染料溶液所饱和。取出悬挂于暗处，晾干后，立即放入干燥器中避光保存(bocn)，备用。 第38页/共50页第三十九页，共50页。（2）缓冲溶液的配制(pizh) 称取柠檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M 氢氧化钠 420ml，并用蒸馏水稀释至刻度，此溶液的pH应为3.5。否则，用酸或碱调整 pH值，保存于冰箱中。 第39页/共50页第四十页，共50页。3）扫描条件确定 在制备的染料试纸(shzh)上定量点上维生素C对照品进行扫描 ，维 生素

11、C在 290nm 处有最大吸收，420nm处无吸收，故选择1=290nm， 2=420nm双波长反射式锯齿扫描。原理原理(yunl)方法方法结果结果讨论讨论与与第40页/共50页第四十一页，共50页。4）线性实验）线性实验 4.1）对照品溶液的配制）对照品溶液的配制 精密称取维生素精密称取维生素C标准品标准品100mg，用缓冲溶液配成，用缓冲溶液配成lmg/ml的标准的标准溶液。精密称取维生素溶液。精密称取维生素C标准溶液标准溶液1、2、3、4、5ml，分别置于，分别置于10ml容量瓶中，用缓冲溶容量瓶中，用缓冲溶液稀释至刻度。液稀释至刻度。4.2）测定）测定 用用5l定量毛细管，分别吸取上述

12、溶液各定量毛细管，分别吸取上述溶液各5 l，点于试纸上，点于试纸上 。点样后晾干，并。点样后晾干，并将试纸将试纸 固定在固定在20cm20cm玻璃板上，放入薄层扫描仪。测定玻璃板上，放入薄层扫描仪。测定A 的积分值的积分值 (峰面积峰面积)作作为纵坐标为纵坐标Y ，点样量为横，点样量为横 坐标坐标X，得一直线，得一直线(zhxin)方程方程 Y=15692X+130225，r= 09991 原理原理(yunl)方法方法结果结果讨论讨论与与第41页/共50页第四十二页，共50页。方法方法(fngf)TEXT5）样品的含量测定 取维生素 C片10片，研细，精密称取平均片重一片的粉末，放入100ml

13、容量瓶中，加入缓冲液至刻度，振摇，使维生 素 C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用缓冲液稀释至刻度。用 5 l定量毛细管点样品溶液与不同浓度(nngd)的标准液于同一试纸上 ，然后扫描 测定峰面积，由工作曲线法计算维生素C片中的维生素C含量。TEXT原理原理方法方法结果结果讨论讨论与与第42页/共50页第四十三页，共50页。6）回收率实验 精密称取维生素C对照(duzho)品20mg，其它原辅料适量，置 10ml容量瓶中，加缓冲液稀释至刻度，振摇，滤过 ，弃初滤液。分别吸取续滤液与对照(duzho)品维生 素 C液各5 l点于同一试纸上，按上述条件进行扫描测定。第43页/共50页第四十四页，共50页。点样时各点间距应大于10mm，扫描测不定期波长可做少量变