实验二、特殊光学显微镜技术

1、实验二、特殊光学显微镜技术实验二、特殊光学显微镜技术 倒置显微镜倒置显微镜 荧光显微镜技术荧光显微镜技术（Fluorescence Microscopy） 激光共焦扫描显微镜技术激光共焦扫描显微镜技术（Laser Confocal Microscopy） 相差显微镜相差显微镜（phase-contrast microscope） 微分干涉显微镜微分干涉显微镜 （differential interference contrast microscope, DIC） 录像增差显微镜技术录像增差显微镜技术（video-enhance microscopyvideo-enhance microscop

2、y）荧光显微镜技术荧光显微镜技术（Fluorescence Microscopy）原理与应用原理与应用 直接荧光标记技术直接荧光标记技术 自发荧光、诱发荧光自发荧光、诱发荧光 间接免疫荧光标记技术间接免疫荧光标记技术 在光镜水平用于特异蛋白质在光镜水平用于特异蛋白质 等生物大分子的定性定位：等生物大分子的定性定位： 如绿色荧光蛋白如绿色荧光蛋白(GFP)的应用的应用 激光共焦扫描显微镜技术激光共焦扫描显微镜技术（Laser Scanning Confocal Microscopy）原理原理 共焦点：物镜与聚光镜同时聚焦到同一个共焦点：物镜与聚光镜同时聚焦到同一个小点，即它们互相共焦点。小点，即

3、它们互相共焦点。应用：应用：排除焦平面以外光的干扰，增强排除焦平面以外光的干扰，增强 图像反差和提高分辨率图像反差和提高分辨率(1.41.7)， 可重构样品的三维结构。可重构样品的三维结构。 相差显微镜相差显微镜（phase-contrast microscope） 将光程差或相位差转换成振幅差，可用于将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞观察活细胞 。 微分干涉显微镜微分干涉显微镜（differential-interference microscope） 偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成明暗区别，偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成明暗区别， 增加了样品反差

4、且具有立体增加了样品反差且具有立体 感。适于研究活细胞中较大的细胞感。适于研究活细胞中较大的细胞 器。器。 录像增差显微镜技术录像增差显微镜技术（video-enhance microscopyvideo-enhance microscopy） 计算机辅助的计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研显微镜可在高分辨率下研 究活细胞中的颗粒究活细胞中的颗粒 及细胞器的运动。及细胞器的运动。LCSM Image of a Xenopus Melanophore microtubule cytoskeleton (green) and the nucleus (blue)A comparison of yeast cells that were growing on the vaginal epithelium seen with different types of LM.a)under bright-field;b)phase-contrast;c)DIC 倒置显微镜倒置显微镜 i