实验二环境中微生物的检测

1、实验二实验二 环境中微生物的检测环境中微生物的检测一、目的要求一、目的要求1、了解环境中微生物的存在。、了解环境中微生物的存在。2、比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。、比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。3、观察不同类型微生物的菌落形态特征。、观察不同类型微生物的菌落形态特征。4、体会无菌操作的重要性，初步建立微生物工作者必须、体会无菌操作的重要性，初步建立微生物工作者必须具有的具有的“无菌无菌”概念。概念。二、基本原理二、基本原理微生个体微小，种类繁多且无处不在，但肉眼不可见。若用营微生个体微小，种类繁多且无处不在，但肉眼不可见。若用营养琼脂平板法进行检测，可以看到其群

2、体结构。养琼脂平板法进行检测，可以看到其群体结构。平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，12 d内每一菌内每一菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。群体的集落，称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整表面干燥或湿润、隆起

3、或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明、半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。齐，菌落透明、半透明或不透明，颜色以及质地疏松或紧密等。因此，可通过平板培养来检测环境中细菌的数量和类型。因此，可通过平板培养来检测环境中细菌的数量和类型。三、实验器材三、实验器材1、牛肉膏蛋白胨琼脂平板、牛肉膏蛋白胨琼脂平板2、仪器或其他用具、仪器或其他用具、记号笔等记号笔等四、实验步骤四、实验步骤 1、编号、编号任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号，写上班级、姓名、日期，本次实验号笔做上记号，写上班级、姓名、日期，本次实验还要注明处理号，

4、写在皿底的一边，不要写在当中，还要注明处理号，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。以免影响观察结果。培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时，容同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时，容易混淆。易混淆。 2、环境中微生物的检测、环境中微生物的检测 （1）空气）空气 将一个牛肉膏蛋白胨平板放在桌面上，移去皿将一个牛肉膏蛋白胨平板放在桌面上，移去皿盖，使其暴露在空气中盖，使其暴露在空气中5-10min后盖上皿盖。后盖上皿盖。（2）手指）手指 移去皿盖，用手指在琼脂平板的表面轻轻地来移去皿盖，用手指

5、在琼脂平板的表面轻轻地来回划线，盖上皿盖。回划线，盖上皿盖。（3）头发）头发 取头发一根，在平板表面任一方向划线取头发一根，在平板表面任一方向划线35条，条，盖上皿盖。盖上皿盖。（4）咳嗽）咳嗽 将揭开皿盖的琼脂平板放在离口约将揭开皿盖的琼脂平板放在离口约68cm处，处，对着琼脂表面用力咳嗽，然后盖上皿盖。对着琼脂表面用力咳嗽，然后盖上皿盖。 3、将所有的琼脂平板翻转、将所有的琼脂平板翻转使皿底朝上，放使皿底朝上，放28培养箱，培养培养箱，培养23 d。（1）菌落计数）菌落计数 在划线的平板上，如果菌落很多而在划线的平板上，如果菌落很多而重叠，则数平板最后重叠，则数平板最后1/4面积内的菌落数

6、。不是划线面积内的菌落数。不是划线的平板，也一分为四，数的平板，也一分为四，数1/4面积的菌落数。面积的菌落数。（2）根据菌落大小、形态、高度、干湿等特征观察）根据菌落大小、形态、高度、干湿等特征观察不同的菌落特征。但要注意，如果细菌数量太多，不同的菌落特征。但要注意，如果细菌数量太多，会使很多菌落生长在一起，或者限制了菌落生长而会使很多菌落生长在一起，或者限制了菌落生长而变得很小，因而外观不典型，故观察菌落的特点时，变得很小，因而外观不典型，故观察菌落的特点时，要选择分离的很开的单个菌落。要选择分离的很开的单个菌落。五、实验报告五、实验报告将你自己的平板结果记录于下表中将你自己的平板结果记录

7、于下表中。皿号皿号菌落数菌落数(近似近似值值)特特 征征 描描 写写形状形状大小大小色泽色泽光泽光泽高度高度透明透明度度表面表面 边缘边缘1234CK菌落特征描写方法如下：菌落特征描写方法如下： 形状：圆状、丝状、不规则状、假根状形状：圆状、丝状、不规则状、假根状 。 大小：以直径表示。大小：以直径表示。 表面：光滑、干燥、湿润、皱褶。表面：光滑、干燥、湿润、皱褶。 光泽：玻璃状、蜡质状、油脂状。光泽：玻璃状、蜡质状、油脂状。 高度：扁平、隆起、凹下。高度：扁平、隆起、凹下。 透明程度：透明、半通明、不透明。透明程度：透明、半通明、不透明。 边缘：整齐、不整齐。边缘：整齐、不整齐。1.比较各种来源的样品，哪一种样品的平板菌落比较各种来源的样品