常用实验动物模型

1、常用实验动物模型目录一、神经系统疾病常用动物模型二、心脑血管系统疾病常用动物模型三、呼吸系统疾病常用动物模型四、胃肠道系统疾病常用动物模型五、泌尿生殖系统疾病常用动物模型六、内分泌系统疾病常用动物模型七、疼痛常用动物模型八、转基因动物模型九、中医证候动物模型p使用动物模型是现代医学研究中极为重要的方法和手段，它有助于人们更方便、更有效地认识人类疾病发生、发展的规律及生物学机制，并为进一步探索针灸机制和作用规律等奠定基础。p人类疾病动物模型种类很多，可按不同方法进行分类，本节按照各系统疾病，如神经、心脑血管、消化、呼吸、泌尿系统等介绍几种常见动物模型的特点和造模方法，同时还简要介绍了部分常用的转

2、基因动物模型及中医研究中几种常用的证候动物模型。在具体运用中，应根据针灸研究课题的构思与设计的需要，选择最适合的动物模型进行实验。一、神经系统疾病常用动物模型目录（一）实验性老年痴呆模型（二）实验性血管痴呆模型（三）焦虑动物模型（四）抑郁动物模型（一）实验性老年痴呆模型目录p1.D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型p2.快速老化小鼠（SAM）模型1.D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型【实验动物】p6月龄Wistar大鼠或3月龄昆明种小鼠。【操作方法】p大鼠每日腹腔注射D-半乳糖400mg/kg，连续8周；小鼠每日颈背部皮下注射D-半乳糖溶液120mg/kg，连续注射68周（各报道略有不同）。【模型评价】

3、p使用Morris水迷宫，染色及生化指标等，可测试出该模型小鼠的学习和记忆缺陷、胆碱能系统变化，以及脑组织神经元的丢失和线粒体膨胀呈空泡样变性的现象，这与老年动物的生理表现一致。该模型造价低廉、操作简便、可重复性高、模拟损伤较为全面。2.快速老化小鼠（SAM）模型p通过对AKR/J自然变异小鼠进行近交延代培养得到的一种快速老化小鼠，该品系中的SAMP8和SAMP10表现出明显的学习记忆功能减退，处于一种低紧张、低恐怖的痴呆状态。其中SAMP8具备老年痴呆（seniledementiaofAlzheimertype，AD）的许多特征，诸如皮质萎缩、皮质和海马锥体神经细胞数目下降、PAS阳性颗粒和

4、A样颗粒广泛沉着、脑干网状结构大细胞群背侧部出现海绵状变化、星状胶质细胞反应等。pSAMP10则表现出一个生命周期中脑神经元减少、皮质增龄性萎缩等特征。另外，SAMP8和SAMP10还存在神经递质、脑内葡萄糖、一氧化氮（nitricoxide，NO）、一氧化氮合酶（nitricoxidesynthetase，NOS）以及自由基代谢障碍等方面的病理变化，寿命短、老化快、老化特征显著，目前可认为是相对理想的痴呆模型。实验时，对照动物一般为SAMR1小鼠。（二）实验性血管痴呆模型目录p1.血管阻断VD模型p2.多发性脑梗死VD模型1.血管阻断VD模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重300g

5、左右，术前24小时禁食不禁水。【操作方法】p电凝针阻断双侧椎动脉造成永久性闭塞，分离双侧颈总动脉（commoncarotidarteries，CCA），穿结备用。24h后用微动脉夹夹闭双侧CCA5min，共夹闭3次，每次间隔1h，最终制备成全脑反复缺血再灌注模型。【模型评价】p模型制作过程与血管性痴呆（vasculardementia，VD）的发病机制（反复脑缺血）相接近；病理改变较为充分、明确，海马损伤明显；可显示学习、记忆等认知功能的减退；缺血后生理指标稳定，无明显的肢体运动障碍。但操作复杂，死亡率较高。2.多发性脑梗死VD模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重300g左右，术前2

6、4小时禁食不禁水。【操作方法】p生理盐水中加入同种大鼠血凝块制成的混悬液，从实验大鼠CCA推注栓子盐水混悬液，在注入栓子的同时开放CCA，利用CCA的血液栓子通过ICA送入颅内至鼠脑各动脉，造成多灶性脑梗死。【模型评价】p多灶和不均匀性使得该模型类似于临床上多发性脑梗死或腔隙性卒中。缺点是由于栓子的随机性，无法预测梗死的部位和大小，侧支循环的影响使组织缺血程度不一，不利于神经症状观察和组织定量分析。（三）焦虑动物模型目录p1.高架十字迷宫实验（EMP）p2.创伤后应激障碍（PTSD）1.高架十字迷宫实验（EMP）【实验动物】pSD大鼠，体重200g左右；或C57小鼠，体重20g左右。【操作方法

7、】p将大鼠或小鼠置于高架十字迷宫的中央平台区，使其头部面向其中一个开放臂，释放实验动物后立即开始记录其在5min内分别进入开臂和闭臂的次数以及在两臂内的滞留时间，计算进入开臂次数（open-armsentries，OE）的百分数（OE%）和开臂停留时间（open-armstime，OT）的百分数（OT%），焦虑动物的OE%和OT%值明显降低。【模型评价】pEMP实验利用啮齿类动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐惧心理，形成矛盾的心理应激，较好地模拟了焦虑样症状。该模型操作简单，能够简单直观地反映动物的焦虑状态，是一种较为成熟经典的焦虑动物模型。2.创伤后应激障碍（PTSD）【实验动物】p

8、雄性SD大鼠，200g左右。【操作方法】p将大鼠用束缚装置束缚2h，结束后将其放入水深40cm、水温2325的游泳缸中强迫游泳20min，休息15min后再用乙醚麻醉至失去知觉，随后将大鼠置于通风处至自然苏醒，并放回原笼饲养。以EMP及旷场实验等测定PTSD模型的行为学改变。【模型评价】pPTSD是灾害后精神及行为障碍的一种重要表现形式。运用连续单一刺激（singleprolongedstress，SPS）方法复制PTSD大鼠焦虑模型已较为广泛。该模型是以疲劳作为环境条件刺激建立的PTSD动物模型，适用于研究疲劳导致PTSD发生的相关机制研究。（四）抑郁动物模型目录p1.慢性应激致抑郁模型p2

9、.强迫游泳实验（FST）1.慢性应激致抑郁模型【实验动物】pSD大鼠，体重200g左右；或C57小鼠，体重20g左右。【操作方法】p选取电击、翻转昼夜节律、闪光刺激、噪声、禁食、禁水、潮湿垫料、束缚、夹尾、隔离、冰水游泳等应激刺激随机组合，使实验动物每天接受一种应激处理，连续34周，运用糖水偏爱实验对该模型进行测定。慢性应激模型动物的糖水溶液的摄入量明显降低。在选择刺激组合时，应注意所选刺激的强度，刺激强度不宜过高，否则容易引起动物焦虑情绪反应，使得抑郁模型的有效性降低。【模型评价】p慢性应激更真实地模拟了人们在现实生活中遭遇的“困难”，动物对甜溶液的饮用量降低反映了抑郁的核心症状，即快感缺乏

10、。动物的行为特征改变、血浆皮质激素升高等都与抑郁的表现类似，具有较高的应用价值。2.强迫游泳实验（FST）【实验动物】pSD大鼠，体重200g左右；C57小鼠，体重20g左右。【操作方法】p测试前把动物放于盛水玻璃缸中游泳15min，要确保动物不能逃脱。15min后将动物取出置于加热的环境（32）中干燥15min，再放回各自的笼子。24h后再次将动物分别放入水缸中，强迫游泳6min。当动物停止挣扎漂浮在水中，只做必要的轻微动作保持头在水面上的时候，被认为是不动。记录后4min的不动时间。在抑郁症的药理学和行为学的干预存在下不动时间将会明显减少。【模型评价】pFST操作简单，对抗抑郁措施有很好的

11、预测效度，被广泛用于抗抑郁治疗行为改变的评价。但也有人认为动物强迫游泳中表现出的不动状态可能是对应激的一种适应，或者是一种疲劳现象，并非等同于抑郁症患者的绝望行为，目前尚存争议。二、心脑血管系统疾病常用动物模型目录（一）大鼠脑缺血/再灌注损伤模型（二）脑出血动物模型（三）心肌梗死动物模型（四）高血压动物模型（一）大鼠脑缺血/再灌注损伤模型目录p1.全脑缺血模型p2.局灶性脑缺血模型1.全脑缺血模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重300g左右，术前24h禁食不禁水。【操作方法】p动物常规麻醉固定后备皮、消毒，颈正中部切口，逐层分离组织，暴露并分离左右颈总动脉。双侧股部切口，分离左右双侧

12、股静脉。从左侧股静脉注射0.3mL肝素；从右侧股动脉插入充满肝素的聚乙烯导管，与压力换能器连接，从右侧颈总动脉向远心端插入直径约0.1mm的聚乙烯导管，从左侧股静脉插入硅胶管，与微型输液器连接。p结扎左侧颈总动脉，同时从右侧颈总动脉放血，可选择在放血后30min、60min、90min及120min解除左侧颈总动脉结扎，同时结扎右侧颈总动脉停止放血。可将放出的血液经股静脉输回体内，以继续观察。【模型评价】p本手术全部在直观下进行，一边从右侧颈动脉放血，一边将放出的血液从股静脉输入，既能直接观察，又能方便地控制分流量和速度，较为实用。2.局灶性脑缺血模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重

13、300g左右，术前24h禁食不禁水。【操作方法】p动物常规麻醉固定后备皮，颈正中部切口，逐层分离组织，暴露并分离结扎一侧颈总动脉、颈外动脉及其分支。在颈总动脉分叉处剪一切口，用直径约0.2mm的尼龙线，烧灼头端使其直径约为0.25mm，经小口插入颈内动脉约18mm，遇有轻微阻力，表明线栓穿过大脑中动脉起始端至近端，将大脑中动脉起始端阻塞，结扎颈内动脉备线，线栓外端留出约15mm长，缝合皮肤。再灌注时只需将线栓抽至颈内动脉起始部即可恢复大脑中动脉血供。【模型评价】p该模型具简便、易行、稳定、可靠的特点，为脑缺血再灌注损伤模型的进一步研究提供了动物模型。（二）脑出血动物模型目录p1.自体血液注入法

14、脑出血模型p2.胶原酶注入法脑出血模型1.自体血液注入法脑出血模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重300g左右。【操作方法】p麻醉后俯卧位固定，头部皮肤消毒，沿颅顶部正中线纵行切开皮肤，充分暴露前囟、后囟、冠状缝与矢状缝。采用脑立体定位仪，于前囟1mm，矢状缝旁3mm处，用牙科钻钻一直径约2mm的孔。使用微量注射器穿刺尾静脉抽取6070L静脉血（不加抗凝剂）后，通过颅骨的钻孔垂直缓慢插入微量注射器，进针深度约5mm，缓慢（约2min）注入50L自体静脉血，注射完毕后，将针留置10min后缓慢将针退出，然后用牙科水泥封闭颅骨孔。缝合头部皮肤，包扎尾部伤口，待观察。【模型评价】p本法可以

15、通过控制血液注射量模拟不同程度脑出血，可观察血液凝固过程中释放的血管活性物质对脑循环及脑组织的影响，与临床脑出血过程较相似，适合于脑实质出血的自然过程与病理学形态特点等的研究。还可以更好地观察血液凝固过程中各种因子对脑组织代谢和血流的影响，为临床治疗提供参考依据。2.胶原酶注入法脑出血模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重300g左右。【操作方法】p头颅部手术操作如上法，不同的是由微量注射器注入约0.3units的胶原酶1L生理盐水溶液。【模型评价】p胶原酶诱导脑出血模型的制作方法具有简单、快捷、重复性好，与人脑出血的病理、生化及病理生理有许多相似性，且出血区面积大小较易控制。但由于出

16、血主要以弥漫性出血为主，不能形成真正意义上的血肿，且出血灶中常混有正常脑组织，与临床自发性脑出血的发病不同，故该模型较适用于研究血肿及脑水肿在脑出血中的作用及评价脑出血后神经功能的恢复状况和药物等的治疗效果。（三）心肌梗死动物模型目录p1.心脏左前降支结扎模型p2.心肌缺血再灌注损伤模型1.心脏左前降支结扎模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重400450g。【操作方法】p7%水合氯醛腹腔注射麻醉，8万单位青霉素腹腔注射预防术后感染；仰卧位固定于手术台上，胸部备皮，常规消毒；明视经口气管插管后连接呼吸机，供给空气或医用氧气；剪开左侧胸部皮肤，钝性分离肌肉层，暴露并用止血钳穿破第三肋间，

17、开睑器撑开第三肋间，暴露心脏，除去心包膜；于左心耳与肺动脉圆锥之间找到左冠状静脉，以其为标志结扎冠状动脉左前降支；逐层缝合肋层、肌肉层与皮肤，注意恢复胸腔负压，待大鼠情况稳定，撤下呼吸机，右侧卧位放归鼠笼，注意保暖待其苏醒。【模型评价】p因本模型的心肌缺血病理改变与临床较为相似，故本法得到广泛认证，为传统的心肌缺血动物模型。但本法手术较为复杂，冠状动脉左前降支的结扎位置选择是操作中的关键，与模型的准确率和术后大鼠的存活率密切相关，需术者反复练习以熟练掌握。2.心肌缺血再灌注损伤模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重400450g。【操作方法】p手术过程基本同冠状动脉左前降支结扎法制作心

18、肌梗死模型。在结扎时将一小段硅胶管与冠状动脉左前降支一起结扎，待缺血30min、60min、90min或120min后将结扎线剪断，实施再灌注。【模型评价】p本法是该模型的传统制备方法，与心肌缺血模型制备方法类似，需术者反复练习手术操作，以期熟练掌握。（四）高血压动物模型目录p1.肾性高血压模型p2.自发性高血压大鼠模型1.肾性高血压模型【实验动物】pSD/Wistar大鼠，体重400450g。【操作方法】p麻醉后大鼠仰卧位固定于手术台上。胸骨下2.53cm手术区域备皮；沿腹中做手术切口打开腹腔，手术钳固定两侧腹壁切口充分暴露手术视野，寻找左侧肾脏及肾动脉，钝性分离左侧肾动脉；穿入无菌缝合线，

19、结扎左侧肾动脉，右侧不涉及，造成单侧肾动脉狭窄；逐层缝合，关闭腹腔。p术中一定要注意保持环境温度，如果温度过低，动物容易出现休克。术后给动物喂食葡萄糖注射液，以助动物的清醒与体能的恢复。为防止误夹，在关闭银夹前观察银夹是否有规律性波动，如有，说明夹在了肾动脉上。【模型评价】p该动物模型可模拟人单侧肾动脉狭窄所致的高血压，成模率较高，操作简便，存活率也较好。但因为肾脏在该模型中免除了高血压的作用，故不适宜研究肾脏功能及结构损害。2.自发性高血压大鼠模型p自发性高血压大鼠（spontaneouslyhypertensiverat，SHR）由Wistar品系大鼠培育而成。SHR出生后血压随鼠龄不断升

20、高，幼年SHR交感活性增高，4周龄时虽然血压正常但已出现心脏重量增加，34个月时为高血压确立期，收缩压可21.28kPa，6个月时血压升到最高水平，以后随血压升高进一步出现心血管并发症，但无明显原发性肾脏或肾上腺损伤。pSHR与人类原发性高血压形成机制有相似之处，血压的升高均与外周血管阻力的增加有关，且对抗高血压药物有反应，因此，它是人类原发性高血压的研究及高血压药物筛选的较为理想的动物模型。但SHR的繁育有一定的难度，有发生高血压特性变异的可能性，此外，该模型存在甲状腺和免疫功能的异常。SHR的正常血压对照组为WKY（Wistar-Kyotorats）鼠，但目前不少研究者认为WKY作为对照组

21、不够理想，原因是WKY的自发性高血压发生率也较高。三、呼吸系统疾病常用动物模型目录（一）慢性支气管肺炎模型（二）支气管痉挛、哮喘模型（一）慢性支气管肺炎模型【实验动物】p常选用大鼠、豚鼠、猴或兔。【操作方法】p主要方法有吸入刺激性气体（如二氧化硫、氯、镍、氨水、丙烯醛、硝酸、烟雾等）法、管内滴注丝氨酸蛋白酶如弹性蛋白酶等方法。吸入刺激性气体导致气道内嗜中性粒细胞和巨噬细胞浸润与活化及炎症细胞因子释放，形成炎症，而气管内滴注丝氨酸蛋白酶可引起以中央支气管为主的黏液细胞化生炎症和弹性蛋白酶快速溶解，形成炎症，可在1个月内恢复。【模型评价】p现发现猪黏膜下腺体与人类相似，且经常发生气管炎及肺炎，故认

22、为是复制人类慢性气管炎较合适的动物。用去甲肾上腺素可以引起与人类相似的气管腺体肥大。（二）支气管痉挛、哮喘模型【实验动物】p常选用豚鼠，体重20g30g左右。【操作方法】p每只豚鼠于第1d、14d腹腔注射卵清蛋白混悬液（100g卵清蛋白+10mg氢氧化铝+0.2mL生理盐水）0.2mL致敏，并于第14d以2%卵清蛋白溶液5mL雾化吸入激发1次，第25d起予以1%卵清蛋白溶液5mL雾化吸入激发，每日1次，每次30min，连续激发10d。【模型评价】p小鼠出现呼吸急促、烦躁不安、腹肌痉挛、两便失禁等阳性反应。该模型免疫性强。四、胃肠道系统疾病常用动物模型目录（一）急性胃炎动物模型（二）葡聚糖硫酸钠

23、诱发溃疡性结肠炎模型（一）急性胃炎动物模型【实验动物】pSD/Wista大鼠，体重300g左右。【操作方法】p酸制剂诱发急性胃炎模型。大鼠禁食24h，清醒状态下，用下述试剂或物质灌胃（可单独或几种合用，2mL左右灌胃）：水杨酸制剂（如20mmol/L阿司匹林或水杨酸溶液）按100mg/kg体重灌胃；2mL的10mmol/L的醋酸或2mL不同浓度的盐酸；2mL同种动物胆汁或2mmol/L的牛磺胆酸；15%的乙醇2mL。【模型评价】p4h后处死动物，剖检可见胃内发生急性弥漫性炎症改变。胃黏膜表面有浅表糜烂、出血，黏膜层内见中性粒细胞浸润。该模型造模方法简单，适合于研究急性胃炎相关研究。（二）葡聚糖

24、硫酸钠诱发溃疡性结肠炎模型【实验动物】p实验常用大、小鼠。【操作方法】p通常采用在蒸馏水（纯水）中加入葡聚糖硫酸钠（dextransulfatesodium，DSS）制成溶液给予动物自由饮用造模，浓度采用W/V计算。采用不同的DSS溶液浓度、给药时间和给药频率，可制成急性和慢性两种结肠炎模型。一般来说，急性结肠炎模型常采用相对高浓度的DSS溶液、相对短的给药时间建立。p如予小鼠2%5%DSS自由饮用47d可成功制成急性溃疡性结肠炎模型。慢性结肠炎模型则可采用低浓度DSS建立。此外，慢性模型还可采用相对高浓度的DSS周期给药建立，如予小鼠2.5%DSS自由饮用7d，随后予水自由饮用7d，如此反复

25、2个周期即可建立慢性结肠炎模型；予大鼠4%DSS自由饮用6d，随后予水自由饮用6d，如此反复3个周期可建立。【模型评价】p采用疾病活动指数进行评估，模型症状表现包括腹泻、黏液样便、粪便潜血阳性、肉眼血便、动物体重下降、进食量减少、活动度减弱、毛色变差、贫血，甚至死亡等。同时取结肠进行组织病理学检查。急性模型可看到结肠黏膜炎细胞浸润、多发性糜烂、隐窝脓肿等急性炎症表现。p慢性模型可见结肠黏膜不仅有糜烂、炎性细胞浸润，且有淋巴滤泡形成及黏膜再生改变，部分黏膜出现异型增生，同时可见肉芽组织增生和肿瘤样改变。此模型病理改变酷似人类溃疡性结肠炎模型，不仅可用于发病机制、治疗药物的研究，而且适用于与结肠癌

26、相关的研究。五、泌尿生殖系统疾病常用动物模型目录（一）卵巢去势模型（二）去势结合雌激素诱导的前列腺炎模型（一）卵巢去势模型【实验动物】p雌性成年SD/Wista大鼠，体重300g左右。【操作方法】p动物禁食过夜，麻醉后腹卧位固定于手术板上，备皮消毒，于背部脊柱侧面1cm肋弓下行约1cm斜下切口，逐层切开皮肤、皮下组织、肌肉、腹膜，提起性腺周围脂肪组织找到卵巢，像黄豆粒大小，颗粒状粉红色，小心分离卵巢周围脂肪组织，结扎卵巢周围血管，切除卵巢，逐层缝合。【模型评价】p手术后大约13周大鼠子宫切片示子宫明显萎缩，体积明显缩小变细，子宫壁层、肌层变薄，子宫内膜也有一定程度的萎缩，腺体数目减少，间质纤维

27、组织透明样变。血清雌二醇、睾酮、促卵泡刺激素、黄体生成素、钙、磷、碱性磷酸酶、骨钙素等均会出现类似人类绝经期骨质疏松的表现。该造模方法简单，成本低，稳定性好。（二）去势结合雌激素诱导的前列腺炎模型【实验动物】p雄性老龄SD/Wista大鼠，体重300g左右。【操作方法】p取老龄雄性大鼠，腹腔注射麻醉后，无菌条件下做去势手术，缝合皮肤，消毒包扎，放回鼠笼自由饮食。于次日，在背部皮下注射苯甲酸雌二醇每日0.25mg/kg，连续30d。【模型评价】p该模型是采用雌激素和去势的方法，造成动物机体内激素水平的异常和雌雄激素平衡的破坏，从而造成前列腺非细菌性的炎症反应。造模方法简单，成本低，稳定性好，模型

28、持续时间长；与临床慢性非细菌性前列腺炎病理变化相似，有较好的特异性，观察胸腺，脾脏等，未发生类似的慢性炎症改变。六、内分泌系统疾病常用动物模型目录（一）糖尿病动物模型（二）甲状腺疾病动物模型（一）糖尿病动物模型1.链脲佐菌素所致糖尿病模型【实验动物】pSD大鼠，体重200g左右。【操作方法】pSD大鼠按照25mg/kg间隔1d连续3次给药，空腹12h后腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin，STZ），STZ给药浓度为1%，溶解于pH为4.24.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，将第1次给药时间设定为0点，之后尾尖刺破取血，测量第0、1、3、7、11、24、48、72h的血糖值。连续3d

29、血糖值16.67mmol/L为模型成立，其成模率高且高血糖稳定。【模型评价】pSTZ是一种抗菌及抗肿瘤药物，可以对某些种属的动物（狗、兔、猴、大鼠、小鼠等）胰岛B细胞选择性破坏，而产生糖尿病。大剂量STZ腹腔或静脉注射可直接破坏胰岛B细胞，多次小剂量注射STZ可能是通过免疫机制使B细胞不断破坏而致糖尿病，与T淋巴细胞介导的B细胞不断破坏有关。该模型是研究1型糖尿病的较好模型。2.GK大鼠2型糖尿病模型p该模型是一种自发性遗传性糖尿病模型，该模型以葡萄糖刺激的胰岛B细胞胰岛素释放受损为特征。葡萄糖刺激GK大鼠的胰岛B细胞胰岛素分泌受损，这个缺陷可能部分与胰岛线粒体、葡萄糖氧化代谢缺陷有关。该模型

30、肝糖原生成过多，肌肉和脂肪组织中度胰岛素抵抗，并且该鼠胰岛组织的减少明显早于糖尿病的发生（高血糖）。因此，B细胞总数的减少和胰岛纤维化是导致GK大鼠糖尿病的病理结果的一个原发特色。此模型是2型糖尿病发病机制及胰岛素抵抗方面研究的一个很好模型。（二）甲状腺疾病动物模型1.优甲乐诱导的甲亢模型【实验动物】pSD雌性大鼠，体重200g左右。【操作方法】p灌胃给予优甲乐3060g/100g鼠重，每日灌胃一次，持续给药25d。模型大鼠从第14d左右开始，出现烦躁不安、活动频繁、饮水量多，鼠笼内潮湿，排泄物增多，毛发无光泽，造模后一周基本恢复正常。【模型评价】p优甲乐有效成分是左甲状腺素钠，为人工合成药物

31、，但其生化、生理性能与甲状腺分泌的内源性T4相同，可在外周转换为T3，然后与细胞核内的T3受体结合发挥其生理功能。此模型的病理指标改变明显，并且代谢组学结果也显示内源性代谢的改变明显，但此模型持续性较差。2.亚成年期甲状腺功能减退大鼠模型【实验动物】pWistar雌性大鼠，体重180g左右。【操作方法】p大鼠麻醉后颈部备皮，切开颈部皮肤，钝性分离其结缔组织和胸骨舌骨肌，剪断双侧甲状腺肌，从根部摘除两侧和峡部甲状腺，然后缝合。术后饲以普通饲料和高钙水（0.1%Ca2+）。正常组则釆用甲状腺切除假手术，仅暴露甲状腺而不伤及甲状腺，随后缝合。普通饲料加蒸馏水饲养。均给予青霉素5万单位/只，腹腔注射，

32、连续应用3d，以预防感染。p2周后开始，每天腹部或腹股沟区皮下注射计量0.95g/100g（体重）的左甲状腺素钠针剂，正常组每天腹部或腹股沟区皮下注射安慰剂（生理盐水），连续注射16d。第17d剪尾取血，测定甲功三项，取正常组数据的可信90%区间为正常值范围，当实验组血清TSH高于对照组，FT3、FT4正常即为造模成功。【模型评价】p初步模拟了原发性甲低，应用于普遍意义上甲减的研究，但仍存在耗时、不能较好模拟自然病程等缺点。七、疼痛常用动物模型目录（一）周围神经性疼痛模型（二）福尔马林致痛模型（三）硝酸甘油注射致偏头痛模型（四）佐剂性关节炎模型（一）周围神经性疼痛模型【实验动物】p实验常用大、

33、小鼠。【操作方法】p麻醉和无菌操作下，在动物股段中部切开皮肤和肌肉，暴露坐骨神经干。将神经游离出来，并用铬制肠线在其上结扎。结扎程度以在40倍放大镜下观察有形变但不影响神经被膜表面的血管流通为准，有时可见暴露区周围肌肉的短暂收缩。结扎后按层缝合。对侧坐骨神经也同样暴露但不予结扎。p术后710d，动物即出现明显的热痛敏，而且动物后肢出现异常痛觉现象，患肢不敢触地，对寒冷刺激也更加敏感。此外，也可以采用“坐骨神经半结扎”模型：大鼠在麻醉及无菌操作下在股段高位暴露单侧坐骨神经，在25倍放大镜下，p在坐骨神经干向后二头肌和半腱肌分支处的远端小心地将神经背侧与周围组织分离开来，用小止血钳夹住神经背侧，用

34、硅制丝线缝入神经干内，使神经的背侧1/31/2被收在线套内。常规缝合肌肉和皮肤。从术后数小时起直到此后数月之内，动物均表现出明显的同侧后肢保护行为和舔足行为的增加，提示自发痛的存在。【模型评价】p疼痛模型建立的方法可以多种多样，评价痛的方法主要是观察舔爪、提足、跛行、过度的自洁行为和咬爪、探勘行为等的改变。此外，负重的改变及自舔都可以看作是自发痛的表现。也可以通过观察动物对伤害性温度和机械刺激的逃避反应实现对疼痛反应的观察。研究证实该模型的痛敏现象与交感神经传出的关系极为密切。（二）福尔马林致痛模型【实验动物】p一般以大鼠为实验对象。【操作方法】p在动物一肢足背皮下注射稀释的福尔马林（form

35、alin）溶液，导致动物的行为改变，如安静时的屈腿、运动时的跛行以及舔足等。这些行为的程度（如舔足时间）与福尔马林浓度成正比，一般认为它是疼痛的象征。【模型评价】p本模型的目的是模拟急性组织损伤所致的持续性疼痛。除上述症状外，其他行为如理毛、探索和运动活动等也受福尔马林注射的影响。（三）硝酸甘油注射致偏头痛模型【实验动物】p一般以大鼠为实验对象。【操作方法】p大鼠皮下注射硝酸甘油10mg/kg，造模后动物出现双耳发红、前肢频繁挠头、活动增多等表现。可能机理为硝酸甘油在体内生成NO，NO通过强烈的扩张脑血管作用造成无菌性炎症；另一方面，NO具有神经毒性作用，可激发三叉神经的血管反射，诱发实验性偏

36、头疼。【模型评价】p该模型具有经济、简便、相似性好、实用性强等特点，已被广泛用在偏头疼的研究领域。（四）佐剂性关节炎模型【实验动物】p一般以大鼠为实验对象。【操作方法】p将卡介苗或死结核分枝杆菌80水浴灭活1h，与高压灭菌的液体石蜡充分研磨、混匀，制成10mg/mL的佐剂。于每只大鼠右后足跖皮下注射佐剂0.1mL致炎。雄性大鼠造模后67天发病，如果关节肿胀不明显，可考虑加强免疫一次。【模型评价】p该模型可使大鼠多个关节发生肿胀，但模型成败的关键是佐剂的制备，主要是结核杆菌的研碎和乳化程度。八、转基因动物模型（一）老年痴呆（AD）转基因动物模型pAD转基因动物模型具有明确的AD病因，并具有AD的

37、病理与功能变化，包括转淀粉样蛋白前体（amyloidproteinprecursor，APP）基因小鼠，转早老蛋白基因小鼠，双转基因小鼠等。（二）帕金森转基因动物模型pNurrl（nuclearreceptor）基因敲除小鼠模型表现为大量多巴胺能前体神经元凋亡，最终导致黑质多巴胺能神经元发育不全。当Nurrl+/-小鼠长到15个月或更大的时候，开始呈现出帕金森病（parkinsonsdisease，PD）的症状。p表现为在旋转爬杆试验中运动执行功能的明显损害，在行为、生物化学及病理组织学的许多特征与在PD所见到的慢性进行性的黑质多巴胺能神经元退化相似。因此，Nurrl+/-小鼠具有症状类似、病

38、理一致、慢性进行性及可早期神经保护介入等特点，可作为PD理想的动物模型。（三）载脂蛋白（Apo）E基因敲除小鼠p与野生型小鼠相比，由于富含胆固醇的脂蛋白清除障碍，导致了ApoE基因敲除小鼠复杂的动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）斑块的形成。AS各阶段的病理表现均存在于ApoE基因敲除小鼠中，而且它能够在所有胸腹动脉中形成广泛的粥样硬化病变，因此认为ApoE基因敲除小鼠的AS病变的发展同人类极其相似，已成为研究AS发病机制以及抗AS药理学研究等方面最重要的动物模型之一。（四）肾素（Ren）转基因模型p小鼠有两种肾素基因，即Ren-1和Ren-2。将小鼠Ren-2基因转入大鼠，获

39、得转小鼠Ren-2基因大鼠模型，该模型血压升高，并出现了心脏肥大、内皮细胞功能障碍等相应并发症。（五）GK/IRS-1双基因剔除小鼠pIRS-1-/-小鼠表现为胰岛素抵抗，但由于B细胞代偿性增生，胰岛素分泌增多，糖耐量正常。B细胞特异GK表达降低的小鼠，显示轻度糖耐量异常。两者杂交产生的GK/IRS-1双基因剔除小鼠，表现为2型糖尿病症状，既有胰岛素抵抗又有糖耐量异常。九、中医证候动物模型p中医证候模型是利用动物的某些生物体表特征来模拟人体证候特征的一类生物表征模型。这些模型都不同程度地模拟了不同证型的临床表现和生物学特点，对中医药的研究具有重要意义。但是，目前有关证候动物模型的研究存在模型症状缺乏客观量