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文档简介
1、现代生物科技专题第1讲基因工程考纲要求目录Contents考点一基因工程的操作工具考点二基因工程的基本操作程序课堂练真题明高考规律课下练模拟试自身能力考点三基因工程的应用及蛋白质工程基因工程的操作工具限制酶限制酶BamHBclSau3AHind识别序识别序列及切列及切割位点割位点图图1图图2形成单形成单链链DNA新的新的DNA分子分子形成重组形成重组DNA分子分子黏性末端黏性末端或平末端或平末端形成形成产物产物碱基对碱基对间的氢键间的氢键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键作用作用部位部位DNA分子分子脱氧核苷酸脱氧核苷酸DNA分分子片段子片段DNA分子分子作用作用底物
2、底物解旋酶解旋酶DNA聚合酶聚合酶DNA连接酶连接酶限制酶限制酶比较比较项目项目基因工程的基本操作程序比较项目比较项目细胞内细胞内DNA复制复制PCR技术技术不不同同点点解旋解旋在在_作用下边解旋边作用下边解旋边复制复制80100 高温解旋,高温解旋,双链完全分开双链完全分开酶酶_、DNA聚合酶聚合酶Taq DNA聚合酶聚合酶引物引物RNA一般为一般为DNA温度温度体内温和条件体内温和条件_相相同同点点需提供需提供DNA复制的复制的_;以四种脱氧核苷酸作原料;以四种脱氧核苷酸作原料;子链延伸的方向都是从子链延伸的方向都是从5端到端到3端端解析解析返回返回反转反转录法录法化学化学合成法合成法从部
3、分基因文从部分基因文库,如库,如cDNA文库中获取文库中获取从基因组文从基因组文库中获取库中获取过过程程人工合成人工合成从基因文库中获取从基因文库中获取方法方法Ca2处理细胞处理细胞感受态细胞感受态细胞重组表达载重组表达载体与感受态细体与感受态细胞混合胞混合感受感受态细胞吸收态细胞吸收DNA分子分子将含有目的基将含有目的基因的表达载体因的表达载体提纯提纯取卵取卵(受受精卵精卵)显微注显微注射射受精卵发受精卵发育育获得具有获得具有新性状的动物新性状的动物将目的基因插将目的基因插入到入到Ti质粒的质粒的TDNA上上农农杆菌杆菌导入植导入植物细胞物细胞整合整合到受体细胞的到受体细胞的染色体染色体DN
4、A上上表达表达转化转化过程过程原核细胞原核细胞受精卵受精卵体细胞体细胞受体细胞受体细胞感受态细胞法感受态细胞法显微注射技术显微注射技术农杆菌转化法农杆菌转化法常用方法常用方法微生物细胞微生物细胞动物细胞动物细胞植物细胞植物细胞生物种类生物种类基因工程的应用及蛋白质工程蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程基因工程基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造行修饰、改造联系联系只能生产自然界已有的蛋白只能生产自然界已有的蛋白质质可生产自然界没有的蛋可生产自然界没有的蛋白质白质结果结果定向改造生物的遗传特性,定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型以获得人类所需的生物类型或生物产品或生物产品定向改造或生产人类所定向改造或生产人类所需的蛋白质需的蛋白质实质实质获取目的基因获取目的基因构建基因表构建基因表达载体达载体将目的基因导入受将目的基因导入受体细胞体细胞目的基因的检测与目的基因的检测与鉴定鉴定预期蛋白质功能预期蛋白质功能设计设计预期的蛋白质结构预期的蛋白质结构推推测应有的氨基酸序
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