丙种球蛋白的制备方案ppt课件

1、义务义务1 1 丙种球蛋白分别制备方案的制定丙种球蛋白分别制备方案的制定生药生药1111_11_ 1111_11_ 第七组第七组 刘行行刘行行目录u 丙种球蛋白的根本概述丙种球蛋白的根本概述u 丙种球蛋白的作用丙种球蛋白的作用u Sephadex G-50分别制备丙种球蛋白分别制备丙种球蛋白u丙种球蛋白的日常运用丙种球蛋白的日常运用u丙种球蛋白的临床实际丙种球蛋白的临床实际 丙种球蛋白预防传染丙种球蛋白预防传染性肝炎，预防麻疹等性肝炎，预防麻疹等病毒性疾病感染，治病毒性疾病感染，治疗先天性丙种球蛋白疗先天性丙种球蛋白缺乏症缺乏症 ，与抗生素合，与抗生素合并运用，可提高对某并运用，可提高对某些严

2、重细菌性和病毒些严重细菌性和病毒性疾病感染的疗效。性疾病感染的疗效。 预防传染性肝炎，如乙肝、甲肝等。 用于麻疹、水痘、带状疱疹等病毒感染和菌感染的防治。 用于哮喘、过敏性鼻炎等内源性过敏性疾病 与抗生素合并运用，可提高对某些严重细 菌性和病毒性疾病感染的疗效。 主要治疗先天性丙种球蛋白缺乏症和免疫缺陷病。 Sephadex G-50分别制备丙种球蛋白分别制备丙种球蛋白 一、简介一、简介 Sephadex是由葡聚糖经过环是由葡聚糖经过环氧氯丙烷交联构成的三维网氧氯丙烷交联构成的三维网状凝胶颗粒。状凝胶颗粒。 Sephadex凝胶按交联度不同，凝胶按交联度不同，用用Sephadex G加一个数字

3、加一个数字来区别型号，数字越小，表来区别型号，数字越小，表示介质交联度越大，分级范示介质交联度越大，分级范围越小，反之亦然。围越小，反之亦然。 1、实验器材、实验器材 层析柱玻璃柱、铁层析柱玻璃柱、铁架台架台 2、实验资料、实验资料 样品液：样品液：0.05%核黄核黄素素(VitB2)与与6%丙种球丙种球蛋白等量混合置蛋白等量混合置4oC保管。保管。 3、实验试剂：、实验试剂： (1) 洗脱液洗脱液(pH7.2 ;0.1mol/L磷酸盐缓磷酸盐缓冲液冲液:取取0.1mol/L磷酸氢二钠磷酸氢二钠720ml和和0.1mol/L磷酸二氢钠磷酸二氢钠280ml,混匀。混匀。 五、实验过程五、实验过程

4、 1 、 取直径取直径0.81.2cm，长度为，长度为25cm的层析的层析柱，在上口箍橡皮筋，出口处装上乳胶管，柱内加柱，在上口箍橡皮筋，出口处装上乳胶管，柱内加注蒸馏水注蒸馏水23ml，排出乳胶管内的气泡，抬高乳，排出乳胶管内的气泡，抬高乳胶管防止柱内的蒸馏水排空。自顶部渐渐参与经膨胶管防止柱内的蒸馏水排空。自顶部渐渐参与经膨胀的葡聚糖胀的葡聚糖G-50悬液。待底部凝胶堆积悬液。待底部凝胶堆积23cm时将乳胶管放低，仍继续参与上述悬液至凝胶层积时将乳胶管放低，仍继续参与上述悬液至凝胶层积至至18cm高度即可。操作过程中，应防止气泡与分高度即可。操作过程中，应防止气泡与分层景象的发生。让凝胶自

5、然下沉，使表层平整。待层景象的发生。让凝胶自然下沉，使表层平整。待凝胶柱层稳定后，以洗脱液凝胶柱层稳定后，以洗脱液(蒸馏水蒸馏水)洗柱洗柱5分钟，分钟，调理流速至调理流速至4滴每分钟。滴每分钟。 2. 待蒸馏水流至柱面平常，待蒸馏水流至柱面平常，(留意，不可使柱面干留意，不可使柱面干掉掉)，马上沿层析柱内壁小心加，马上沿层析柱内壁小心加4滴样品于柱床面，滴样品于柱床面，留意尽量不使床面搅动，马上参与留意尽量不使床面搅动，马上参与12倍于样晶倍于样晶体积的蒸馏水，反复两次后，可加大量蒸馏水延续体积的蒸馏水，反复两次后，可加大量蒸馏水延续洗脱，这样可以使样品稀释最小。洗脱，这样可以使样品稀释最小。

6、 3样品一旦参与后马上用量筒或刻度离心管搜集样品一旦参与后马上用量筒或刻度离心管搜集流出液，柱床上不断加蒸馏水，待红色流出液，柱床上不断加蒸馏水，待红色(血红蛋白血红蛋白)流出一半时记录毫升数，此为血红蛋白流出一半时记录毫升数，此为血红蛋白Ve也为也为Vo。继续搜集流出液，待黄色继续搜集流出液，待黄色(核黄素核黄素)流出一半时记录流出一半时记录体积，此为核黄素体积，此为核黄素Ve。 4测出柱床体积测出柱床体积(Vt)，外水体积，外水体积(Vo)内水内水体积体积(Vi)，及核黄素的洗脱体积，及核黄素的洗脱体积(Ve)。并。并计算出计算出Hb及鱼精蛋的分配系数及鱼精蛋的分配系数(Kd)。 5用蒸馏水反复加在柱床上面，洗柱用蒸馏水反复加在柱床上面，洗柱10分分钟然后将柱内凝胶回收入凝胶瓶内。钟然后将柱内凝胶回收入凝胶瓶内。 运用静注丙种球蛋白治疗小儿病毒性心肌炎静注丙种球蛋白治疗小儿病毒性心肌炎静注丙种球蛋白治疗格林一巴利综合症静注丙种球蛋白治疗格林一巴利综合症静脉注射用丙种球蛋白治疗慢性结肠炎静脉注射用丙种球蛋白治疗