药物非临床安全评价关键技术讲课教案

1、药物非临床安全评价关键技术药物非临床安全评价关键技术毒理学毒理学研究研究一般药理一般药理急性毒性急性毒性试验试验长期毒性长期毒性试验试验过敏性过敏性试验试验溶血性溶血性试验试验局部局部刺激性刺激性致突变试验致突变试验（遗传毒性）（遗传毒性）生殖毒性生殖毒性试验试验药物依赖药物依赖性试验性试验致癌试验致癌试验毒理学研究毒理学研究急性毒性研究：是指动物一次或急性毒性研究：是指动物一次或24 24 小时内多次给予小时内多次给予受试物后，一定时间内所产生的毒性反应。受试物后，一定时间内所产生的毒性反应。动物种属：急性毒性试验应采用至少动物种属：急性毒性试验应采用至少两种两种哺乳动物，哺乳动物，根据药物

2、的特点，可选用一种根据药物的特点，可选用一种啮齿类动物啮齿类动物加一种加一种非非啮齿类动物啮齿类动物进行试验。进行试验。给药途径：应至少包括给药途径：应至少包括临床拟用途径临床拟用途径和一种能使原和一种能使原型药物较型药物较完全进入循环的途径完全进入循环的途径（如静脉注射）。如（如静脉注射）。如果临床拟用途径为静脉给药，则仅此一种途径即可。果临床拟用途径为静脉给药，则仅此一种途径即可。急性毒性试验常用试验方法急性毒性试验常用试验方法最大耐受量法最大耐受量法最大给药量法最大给药量法半数致死量法半数致死量法固定剂量法固定剂量法上下法（阶梯法，序贯法上下法（阶梯法，序贯法) )近似致死剂量法近似致死

3、剂量法毒理学研究毒理学研究长期毒性长期毒性: :实验动物长期反复给药引起的毒性效应实验动物长期反复给药引起的毒性效应目的：目的： 发现受试物可能引起的发现受试物可能引起的临床不良反应临床不良反应，包括不良反应，包括不良反应的性质、程度、量效和时效关系、可逆性等；的性质、程度、量效和时效关系、可逆性等； 判断受试物反复给药的判断受试物反复给药的毒性靶器官或靶组织毒性靶器官或靶组织； 推测临床试验的推测临床试验的起始剂量起始剂量和重复用药的和重复用药的安全范围安全范围； 提示临床试验中需重点监测的提示临床试验中需重点监测的安全性指标安全性指标； 对毒性作用强、毒性症状发生迅速、安全范围小的化对毒性

4、作用强、毒性症状发生迅速、安全范围小的化合物，长期毒性研究还可以为临床试验中的合物，长期毒性研究还可以为临床试验中的解毒或解救措施解毒或解救措施提提供参考。供参考。试验动物试验动物1 1、试验动物种属或品系的选择、试验动物种属或品系的选择长期毒性研究一般采用两种试验动物，一种为啮齿类，另一种长期毒性研究一般采用两种试验动物，一种为啮齿类，另一种 为非啮齿类。为非啮齿类。 对受试物的生物转化与人体相近；对受试物的生物转化与人体相近； 对受试物敏感；对受试物敏感； 已有大量历史对照数据。已有大量历史对照数据。通常以通常以大鼠大鼠和和BeagleBeagle犬犬或或猴猴作为长期毒性研究的试验动物。某

5、作为长期毒性研究的试验动物。某些特殊结构的受试物应选用特殊种属或品系的动物进行长期毒些特殊结构的受试物应选用特殊种属或品系的动物进行长期毒性研究。鼓励在长期毒性研究前采用体外试验体系对试验动物性研究。鼓励在长期毒性研究前采用体外试验体系对试验动物的种属或品系进行选择。的种属或品系进行选择。毒理学研究毒理学研究给药剂量：给药剂量： 长期毒性研究一般至少设长期毒性研究一般至少设高、中、低高、中、低三个剂量给药组和一三个剂量给药组和一个个赋形剂对照组赋形剂对照组，必要时还需设立正常对照组或阳性对照组。，必要时还需设立正常对照组或阳性对照组。 高剂量原则上应使动物产生高剂量原则上应使动物产生明显的毒性

6、反应明显的毒性反应。 低剂量原则上应高于同种动物药效学试验的有效剂量或预低剂量原则上应高于同种动物药效学试验的有效剂量或预期临床治疗剂量的等效剂量，并不使动物出现毒性反应。期临床治疗剂量的等效剂量，并不使动物出现毒性反应。 中剂量应在高剂量和低剂量之间设立。中剂量应在高剂量和低剂量之间设立。毒理学研究毒理学研究 给药途径：原则上应与给药途径：原则上应与临床用药途径临床用药途径一致一致 给药频率：原则上长期毒性研究中动物应给药频率：原则上长期毒性研究中动物应每天每天给药给药，给药期限，给药期限超过超过3 3个月个月的药物的药物每周至少应给药每周至少应给药6 6天天。特殊类型的受试物由于其毒性特点

7、和临床给药。特殊类型的受试物由于其毒性特点和临床给药方案等原因，应根据具体药物的特点设计给药频率。方案等原因，应根据具体药物的特点设计给药频率。毒理学研究毒理学研究过敏反应概念过敏反应概念: : 过敏反应又称变态反应，是指机体受同一抗原再刺激后过敏反应又称变态反应，是指机体受同一抗原再刺激后产生的一种表现为组织损伤或生理功能紊乱的特异性免疫反产生的一种表现为组织损伤或生理功能紊乱的特异性免疫反应，是异常或病理性免疫反应。应，是异常或病理性免疫反应。毒理学研究毒理学研究溶血性试验概念溶血性试验概念: : 观察受试物是否引起溶血和红细胞凝聚等反应。观察受试物是否引起溶血和红细胞凝聚等反应。分类分类

8、: : 免疫和非免疫溶血免疫和非免疫溶血. .有体内溶血试验和体外溶血试验有体内溶血试验和体外溶血试验 某些注射剂型，由于含有溶血成分如某些注射剂型，由于含有溶血成分如皂甙皂甙或物理、化或物理、化学及生物等方面的原因，注入血管后可产生溶血作用；也学及生物等方面的原因，注入血管后可产生溶血作用；也有些注射剂中因含有有些注射剂中因含有鞣质鞣质等杂质成分，注入血管后可产生等杂质成分，注入血管后可产生血细胞凝聚，引起血液循环功能障碍等不良反应；另外，血细胞凝聚，引起血液循环功能障碍等不良反应；另外，有些对免疫系统有影响的药物，也会因免疫反应引起免疫有些对免疫系统有影响的药物，也会因免疫反应引起免疫性溶

9、血。性溶血。 凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反应的其他药物制剂均应进行溶血性试验。应的其他药物制剂均应进行溶血性试验。毒理学研究毒理学研究局部刺激性试验：局部刺激性试验： 指非口服给药制剂给药后对给药部位产生的可逆性炎症指非口服给药制剂给药后对给药部位产生的可逆性炎症反应。刺激性试验是观察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等反应。刺激性试验是观察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性或坏死部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性或坏死等局部反应。等局部反应。毒理学研究毒理学研究致突变（遗传毒性）试

10、验概念：致突变（遗传毒性）试验概念： 研究受试物对生物遗传结构的损害作用及规律研究受试物对生物遗传结构的损害作用及规律目的目的: : 检测受试物能否引起检测受试物能否引起DNADNA损伤损伤, ,研究其遗传毒作用研究其遗传毒作用的特点及对人类的潜在危害的特点及对人类的潜在危害毒理学研究毒理学研究遗传毒性主要研究内容：遗传毒性主要研究内容： Ames Ames试验试验: :鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验 微核试验微核试验 染色体畸变试验（染色体畸变试验（CHLCHL细胞、人外周血）细胞、人外周血） MLA(L5178Y) MLA(L5178Y)毒理学研究毒理学研究生殖毒性试

11、验概念：生殖毒性试验概念： 评价受试物对生殖和发育的毒性试验评价受试物对生殖和发育的毒性试验目的：目的： 研究受试物对哺乳动物生殖发育的任何有害影响研究受试物对哺乳动物生殖发育的任何有害影响, ,并并将研究结果与所有其它毒理将研究结果与所有其它毒理/ /药理资料联系起来药理资料联系起来, ,推测对人推测对人可能造成的生殖危险可能造成的生殖危险毒理学研究毒理学研究生殖毒性试验主要研究内容：生殖毒性试验主要研究内容：1.1.生育力和早期胚胎发育毒性试验生育力和早期胚胎发育毒性试验(段段) )2.2.胚胎胚胎- -胎体毒性试验胎体毒性试验( (致畸试验致畸试验,段段) )3.3.出生前和出生后发育毒

12、性试验出生前和出生后发育毒性试验( (围生期毒性试验围生期毒性试验,段段) )毒理学研究毒理学研究致癌试验：致癌试验： 用来确定受试物对试验动物的致癌性用来确定受试物对试验动物的致癌性, ,剂量剂量- -反应关系反应关系及诱发肿瘤的靶器官及诱发肿瘤的靶器官主要研究内容主要研究内容(ICH)(ICH)：小鼠和仓鼠小鼠和仓鼠18-2418-24个月个月大鼠大鼠24-3024-30个月个月替代试验替代试验毒理学研究毒理学研究药物依赖性试验主要研究内容：药物依赖性试验主要研究内容： 身体依赖性试验身体依赖性试验 自然戒断试验自然戒断试验 替代试验替代试验 催促试验催促试验 诱导试验诱导试验 精神依赖性

13、试验精神依赖性试验SFDASFDA对中药申报资料的毒理学要求对中药申报资料的毒理学要求中药申报资料说明：中药申报资料说明：过敏性、溶血性和局部刺激性、依赖性等：根据过敏性、溶血性和局部刺激性、依赖性等：根据药物给药途径及制剂特点提供相应的制剂安全性试验资药物给药途径及制剂特点提供相应的制剂安全性试验资料。具有依赖性倾向的新药，应提供药物依赖性试验资料。具有依赖性倾向的新药，应提供药物依赖性试验资料。（特别注意料。（特别注意中药注射液中药注射液）致突变试验：如果处方中含有无致突变试验：如果处方中含有无法定标准的药材法定标准的药材，或来源于或来源于无法定标准药材的有效部位无法定标准药材的有效部位，

14、以及，以及用于育龄人用于育龄人群并可能对生殖系统产生影响的新药群并可能对生殖系统产生影响的新药（如避孕药、性激（如避孕药、性激素、治疗性功能障碍药、促精子生成药保胎药或有细胞素、治疗性功能障碍药、促精子生成药保胎药或有细胞毒作用等的新药），应报送毒作用等的新药），应报送致突变试验资料致突变试验资料。生殖毒性试验：用于生殖毒性试验：用于育龄人群并可能对生殖系统产生影响育龄人群并可能对生殖系统产生影响的的新药（如避孕药、性激素、治疗性功能障碍药、促精子生成药、保新药（如避孕药、性激素、治疗性功能障碍药、促精子生成药、保胎药以及致突变试验阳性或有细胞毒作用等的新药），应根据具胎药以及致突变试验阳性或

15、有细胞毒作用等的新药），应根据具体情况提供相应的生殖毒性研究资料。体情况提供相应的生殖毒性研究资料。致癌试验：新药在长期毒性试验中发现致癌试验：新药在长期毒性试验中发现有细胞毒作用有细胞毒作用或者对或者对某些某些脏器组织生长有异常促进作用脏器组织生长有异常促进作用的以及的以及致突变试验结果为阳性致突变试验结果为阳性的的必须提供致癌试验资料及文献资料。必须提供致癌试验资料及文献资料。对于对于“注册分类注册分类1”1”的未在国内上市销售的从植物、动物、的未在国内上市销售的从植物、动物、矿物等中提取的有效成分及其制剂，矿物等中提取的有效成分及其制剂，当有效成分或其代谢产物与已当有效成分或其代谢产物与

16、已知致癌物质有关或相似知致癌物质有关或相似、预期连续用药、预期连续用药6 6个月以上个月以上或或治疗慢性反复治疗慢性反复发作性疾病发作性疾病而需经常间歇使用时，必须提供致癌性试验资料。而需经常间歇使用时，必须提供致癌性试验资料。 传统中药复方制剂的主治病证在传统中药复方制剂的主治病证在国家中成药标准中国家中成药标准中没有收载没有收载，有下列情况之一者需提供毒理试验资料：一是含，有下列情况之一者需提供毒理试验资料：一是含有法定标准中标示有毒性及现代毒理学证明有毒性的药材；有法定标准中标示有毒性及现代毒理学证明有毒性的药材；二是含有十八反、十九畏的配伍禁忌。二是含有十八反、十九畏的配伍禁忌。 中药

17、、天然药物和化学药品组成的复方制剂应当提中药、天然药物和化学药品组成的复方制剂应当提供中药、天然药物和化学药品间药效、毒理相互影响（增效、供中药、天然药物和化学药品间药效、毒理相互影响（增效、减毒或互补作用）的比较性研究试验资料减毒或互补作用）的比较性研究试验资料 改变剂型时，如果生产工艺有质的改变，申报资料改变剂型时，如果生产工艺有质的改变，申报资料应当提供新制剂与原制剂在制备工艺、剂型、质量标准、稳应当提供新制剂与原制剂在制备工艺、剂型、质量标准、稳定性、药效学、临床等方面的对比试验及毒理学的研究资料。定性、药效学、临床等方面的对比试验及毒理学的研究资料。现场核查的实施及关注的重要环节现场

18、核查的实施及关注的重要环节 根据注册分类确定需要做的药理毒理资料根据注册分类确定需要做的药理毒理资料 查看研究报告是否齐全查看研究报告是否齐全 如系委托研究需查看委托合同如系委托研究需查看委托合同 毒理研究需要查看注册分类和毒理研究需要查看注册分类和GLPGLP依从性要求依从性要求为人用药品注册目的而进行的非临床安全性评价：为人用药品注册目的而进行的非临床安全性评价：单次给药毒性试验单次给药毒性试验多次给药毒性试验多次给药毒性试验生殖毒性试验生殖毒性试验遗传毒性试验遗传毒性试验致癌性试验致癌性试验局部毒性试验局部毒性试验免疫原性试验免疫原性试验依赖性试验依赖性试验一般药理试验一般药理试验毒代动

19、力学研究毒代动力学研究具有放射性物质的安全性试验具有放射性物质的安全性试验具有生物危害性的安全性试验具有生物危害性的安全性试验现场核查的实施及关注的重要环节现场核查的实施及关注的重要环节现场核查的实施及关注的重要环节：现场核查的实施及关注的重要环节： 查有无试验方案查有无试验方案 查实施过程有无按方案实施及研究报告是否真实反应了研究结果查实施过程有无按方案实施及研究报告是否真实反应了研究结果 供试品：来源，批号，成份、规格、活性、浓度、配制记录、有效期限供试品：来源，批号，成份、规格、活性、浓度、配制记录、有效期限 动物信息：来源，发票复印件，数量动物信息：来源，发票复印件，数量 体外材料：细胞体外材料：细胞/ /菌株来源菌株来源 主要仪器设备：应该现场核对主要仪器设备：应该现场核对 研究结果与报告中数据的一致性，必要时抽取个体数据计算均数及研究结果与报告中数据的一致性，必要时抽取个体数据计算均数及SDSD现场核查的实施及关注的重要环节现场核查的实施及关注的重要环节 供试品信息：批号和第一次给药时间，药品的组方有效期供试品信息：批号和第一次给药时间，药品的组方有效期 配药记录：抽查配制过程有无误差，核查出入是否平衡。配药记录：抽查配制过程有无误差，核查出入是否平衡。 动物信息：动物接收时间和数据采集时间，回收动物的清洗期动物信息：动