限制性内切酶的应用PPT学习教案_第1页
限制性内切酶的应用PPT学习教案_第2页
限制性内切酶的应用PPT学习教案_第3页
限制性内切酶的应用PPT学习教案_第4页
限制性内切酶的应用PPT学习教案_第5页
已阅读5页，还剩38页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、会计学1第1页/共43页第2页/共43页第3页/共43页第4页/共43页第5页/共43页第6页/共43页第7页/共43页第8页/共43页第9页/共43页第10页/共43页第11页/共43页第12页/共43页同裂酶： 有时两种限制性内切酶的识别核苷酸顺序和切割位置都相同，其差别只在于当识别顺序中有甲基化的核苷酸时，一种限制性内切酶可以切割，另一种则不能。例如Hpa和Msp的识别顺序都是5CCGG3，如果其中有5-甲基胞嘧啶，则只有Hpa能够切割。这些有相同切点的酶称为同裂酶（同切酶或异源同工酶）。 同裂酶和同尾酶：第13页/共43页 有时两种酶切割序列不完全相同，但却能产生相同的粘性末端，这类酶

2、被称为同尾酶，可以通过DNA连接酶将这类末端连接起来，但原来的酶切位点将被破坏，有时可能会产生一个新的酶切位点。如Xba (TCTAGA)、Nhe (GCTAGC） 、Spe (ACTAGT)切割的DNA序列不同，但均给出相同的“CTAG”粘性末端。这些粘性末端连接后，以上的酶将不能再切割，但却产生了一个新的4核苷酸的酶切位点，即 Bfa （CTAG) 的酶切位点。同尾酶：第14页/共43页第15页/共43页第16页/共43页第17页/共43页InsertEcoR1Xho11.9kb质粒质粒第18页/共43页该实验用质粒pCMV-Myc-T10经EcoR单酶切后应为5.7kb；用EcoR和Xh

3、o双酶切后应产生两条DNA片段，一条是3.8kb，另一条是1.9kb（如下图）。3.06.0EcoRIEcoRI&XhoIDNA Marker2.03.81.95.7第19页/共43页 限制性片段长度多态性限制性片段长度多态性 RFLPs ( restriction fragment length polymorphisms) 1987年，第一张较完整的人基因连锁图，500多个RELP 位点，定位了Huntington病，CF（囊性纤维化）和癌相关基因（APC，DCC 等）第20页/共43页RFLP在遗传病检测中的应用 镰状细胞贫血症（ globin，6 ），其GAGGTG的突变，可用RFLP（Mst II，CCTNAGG）或PCR-SSCP检出。 甲型血友病（FVIII，XR）可用PCR-RFLP检出。142 bp 99 bp第21页/共43页IIII第22页/共43页第23页/共43页0.5 g的的1kb DNA Ladder 0.8%TAE琼脂糖凝胶，琼脂糖凝胶，EB染色染色 第24页/共43页第25页/共43页第26页/共43页第27页/共43页第28页/共43页第29页/共43页第30页/共43页第31页/共43页第32页/共43页第33页/共43页第34页/共43页第35页/共43页第3

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论